三维回转培养条件对人成骨样细胞MG-63细胞骨架和钙离子/钙调蛋白信号影响
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摘要
空间失重环境可导致航天员出现骨质丢失,其机制及其防护有待阐明。有研究表明成骨细胞的成骨活性下降是出现骨丢失的主要原因。细胞可能通过细胞骨架或者离子通道感受重力环境条件的变化;钙离子/钙调蛋白信号是否参与细胞骨架变化则有待研究。在地面采用三维回转培养条件可模拟失重生物学效应并对其机制进行探讨。 本文采用三维回转器处理人骨肉瘤细胞MG-63,观察细胞骨架和钙信号变化,探讨钙离子/钙调蛋白信号在三维回转条件下细胞骨架变化中的作用。将处于对数生长期的MG-63细胞以2×104cells/Blask接种到培养瓶中,加满培养基后置CO2培养箱中静置培养24h后,实验组置三维回转器回转,分别于12h、24h检测细胞骨架、细胞游离钙离子浓度和钙调蛋白表达和分布变化。实验结果表明,三维回转处理导致MG-63细胞微丝分布发生变化,表现为三维回转器处理12h后细胞中央区域应力纤维解聚,边缘区域微丝增加,且形成大量板状伪足;24h组与12组相比中央区域应力纤维有所增加,但少于对照组,边缘区域形成大量板状伪足。与对照组相比,三维回转器处理MG-63细胞12h和24h组胞内钙离子浓度增加,t检验表明有显著性差异。