摘要
研究目的:本研究拟通过建立自然衰老大鼠模型,比较青年对照组、自然衰老组和运动干预组的脑组织中miR-34a及自噬的变化情况,研究自由转轮运动干预对miR-34a、SIRT1及自噬变化的影响;以阐明运动干预是否通过下调miR-34a上调自噬从而延缓脑衰老的发生发展。研究方法:动物分组:实验大鼠共分为3组:青年对照组(2月龄)、自然衰老组(26月龄)、自然衰老+运动干预组乙醚麻醉下开腹,灌注固定,灌注完毕后断头取脑,矢状面切取脑组织,置于4%多聚甲醛中再固定24h,运用Nissle染色,在显微镜下观察海马CA1区神经元形态变化。运用Real-time PCR方法检测大鼠海马组织中miRNA-34amRNA的变化;蛋白抽提收集各组大鼠另一侧海马组织的总蛋白,BCA法定量后经Westem blot方法检测海马中衰老相关蛋白表达的情况。研究结果:与青年组正常大鼠相比较,自然衰老组大鼠神经元密度明显下降,出现典型的病理变化,如神经元丢失,核皱缩,尼氏小体消失等。而运功干预组大鼠的神经元数目明显增加。Real-time PCR结果表明,与青年组大鼠相比较,自然衰老大鼠组miR-34a的基因表达明显增加。然而,运动干预明显抑制了miR-34a的表达。Westernblot结果显示,与青年组大鼠相比较,自然衰老大鼠组SIRT1蛋白的表达明显下降。然而,运动干预明显激活了SIRT1。上述结果提示,在自然衰老大鼠中,miR-34a与SIRT1的表达呈明显的负相关。除此之外,自然衰老大鼠中的自噬相关蛋白如LC3,Beclin-1,Atg7、p62的降解明显减少,而运动干预明显逆转了自噬的下降,激活细胞自噬。进一步的研究发现,运动干预明显激活了AMPK。我们的研究结果表明运动干预可能通过下调miR-34研究结论:自由转轮运动干预通过调控miR-34a/SIRT1/AMPK信号激活自噬减缓脑衰老的进展。
引文