细粒棘球蚴egG1Y162-1、egG1Y162-2疫苗诱导小鼠保护作用机制的研究
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摘要
目的:在成功构建egG1Y162-1与egG1Y162-2重组蛋白,并确定其具有良好的抗原性与免疫原性的基础上,将疫苗egG1Y162-1与egG1Y162-2免疫BALB/c小鼠,并用细粒棘球原头蚴攻击感染,研究免疫保护作用及其作用机制,为包虫病疫苗的研制提供新的候选分子。方法:将实验动物分为实验组、对照组分别对其进行皮下注射egG1Y162-1、egG1Y162-2、生理盐水+佐剂和生理盐水,之后进行三次加强免疫。每组均于末次免疫后两周(即第8W)用1000只细粒棘球蚴的原头蚴腹腔攻击感染。在第30w剖杀各组剩余小鼠,分离并称重细粒棘球坳囊,计算囊重抑制率;检测小鼠抗体水平和细胞因子水平的变化。结果:(1)egG1Y162-1、egG1Y162-2疫苗均可以诱导小鼠产生明显免疫保护力。(2)采集血清进行ELISA试验检测血清中抗体IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgE的变化,结果表明IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b和IgE在免疫后实验组不同程度的上升,与对照组相比具有统计学意义。其中IgG、IgG2a、IgG2b和IgE在免疫后8达到最高水平,在感染后期下降;而IgG1在免疫后升高后在感染后期达到最好水平;血清细胞因子IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4和IL-10的检测结果显示,IL-2和TNF-α水平在第8W(免疫后)达到最高水平,在第30W(感染后)下降;IFN-γ、IL-4和IL-10在第8W(免疫后)出现增高趋势,在第30W(感染后)达到峰值。实验组与对照组差异均有统计学意义。结论:egG1Y162-1与egG1Y162-2为极具应用潜质的疫苗候选分子。对疫苗egG1Y162-1与egG1Y162-2产生的免疫保护性可能机制有,抗体介导的体液免疫,IgG及其亚类IgG2a、IgG2b和IgE介导的体液免疫,在抗细粒棘球蚴感染过程中发挥重要作用;细胞免疫中,细胞因子水平变化显示Th1类免疫应答在疫苗免疫组的保护中占优势作用,有利于机体抵御细粒棘球蚴的感染。
引文

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