亚洲带绦虫实验感染早期乳猪肝细胞MAPK信号通路相关基因的研究
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摘要
目的了解亚洲带绦虫感染早期及MAPK特异性抑制剂干预后乳猪肝细胞MAPK信号通路相关基因表达、细胞活力和细胞凋亡的变化,探究MAPK特异性抑制剂是否能够减轻亚洲带绦虫所致肝组织损伤,进一步为抗囊尾蚴病的药物研发及囊尾蚴病的治疗提供新的、有价值的基础资料。方法将采自贵州省都匀市墨冲镇的亚洲带绦虫孕节解剖后,用生理盐水反复清洗、离心沉淀收集虫卵。20日龄约克二元施格杂交乳猪31头,随机分为感染组和正常对照组各5头、抑制剂U0126干预组、SB203580干预组和SP600125干预组各7头,感染组及抑制剂干预组均以定量虫卵15万个/头灌胃感染。抑制剂干预组自灌胃之日起每头乳猪分别腹腔注射抑制剂U0126、SB203580和SP6001251mg/kg,隔天一次,连续注射7次。于感染后15天麻醉处死各组乳猪以获取其肝脏。用cck-8法检测各组肝细胞生长抑制率;用荧光定量PCR技术检测各组乳猪肝细胞的ERK1、p38和JNK1基因mRNA的相对表达量;并用流式细胞术检测各组乳猪肝细胞的凋亡率。采用方差分析对数据进行统计学分析。结果 U0126干预组、SB203580干预组和SP600125干预组的肝细胞生长抑制率均较感染组明显下降(P<0.05)。感染组和抑制剂干预组的肝细胞凋亡率均较对照组明显增高(P<0.05),且U0126干预组肝细胞凋亡率较感染组明显增高(P<0.05),但SB203580和SP600125干预组肝细胞凋亡率均较感染组降低(P<0.05)。U0126干预组的ERK1 mRNA表达水平较对照组明显上调(P<0.05);SB203580干预组的p38 mRNA表达水平较对照组明显上调(P<0.05),但SB203580干预组较感染组明显下调(P<0.05);SP600125干预组的JNK1 mRNA表达水平较对照组明显下调(P<0.05),且SP600125干预组较感染组明显下调(P<0.05)。结论特异性抑制剂在亚洲带绦虫感染早期可以通过上调或下调乳猪肝细胞MAPK相关基因的mRNA水平来介导肝细胞的生长抑制和细胞凋亡。
引文

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