视黄酸对大鼠垂体生长调控相关miRNAs表达的影响
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摘要
本研究旨在探索视黄酸对大鼠垂体生长调控相关miRNAs以及生长相关基因的影响,为进一步探索微量营养物质对miRNAs表达调控的研究提供参考依据。一方面,在细胞水平上,以大鼠垂体瘤细胞(GH3细胞)为研究对象,分别用不同浓度的视黄酸(0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L)处理GH3细胞36 h(n=6),收集细胞后抽提RNA并反转录,通过实时荧光定量PCR检测与生长调控相关的miRNAs(miR-141-3p、miR-7a-5p、miR-375-3p和miR-709)的表达以及GH1和PIT1基因的mRNA水平变化;另一方面,在活体水平上,选取4周龄雄性SD大鼠40只,随机分为5组(每组8只),分别饲喂不同的饲粮:基础饲粮,维生素A缺乏饲粮以及在维生素A缺乏的基础上以每千克饲粮分别添加2、4和10 mg视黄酸的试验饲粮,试验期35天,试验结束采集大鼠垂体组织并抽提RNA反转录,同样采用实时荧光定量PCR检测垂体中生长调控相关miRNAs(miR-141-3p、miR-7a-5p、miR-375-3p和miR-709)的表达以及GH1和PIT1基因的mRNA水平变化。结果发现:细胞水平上,在0.1μmol/L时,视黄酸显著抑制miR-141-3p的表达(P<0.05),对GH1和PIT1无显著影响(P>0.05);在1μmol/L时,视黄酸显著抑制miR-7a-5p、miR-375-3p以及miR-709的表达(P<0.05),同时显著促进GH1和PIT1基因的mRNA表达(P<0.05);在10μmol/L时,视黄酸显著抑制miR-709的表达并促进GH1和PIT1的mRNA表达(P<0.05)。活体水平上,饲粮添加2 mg/kg视黄酸,对于所检测的4种miRNAs表达均无显著影响(P>0.05);饲粮添加4 mg/kg和10 mg/kg视黄酸,可以显著抑制miR-7a-5p、miR-375-3p和miR-709的表达(P<0.05),且在4 mg/kg时可以显著促进GH1和PIT1的mRNA表达(P<0.05)。由此可见,视黄酸可以抑制大鼠垂体中与生长调控相关的miRNAs(miR-141-3p、miR-7a-5p、miR-375-3p和miR-709)的表达并可以促进GH1和PIT1的mRNA表达。
引文

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