Burkitt淋巴瘤细胞株中免疫球蛋白κ轻链3’增强子与C-Myc的正反馈调控机制初探

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• 论文作者：汪晓莺 ; 邵晓轶 ; 孙鑫 ; 范义辉
• 年：2016
• 作者机构：南通大学;
• 论文关键词：IgκE3’ ; C-Myc ; E2A
• 会议召开时间：2016-11-04
• 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
• 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
• 语种：中文
• 分类号：R733.1
• 学会代码：IGMD
• 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
• 会议地点：中国安徽合肥
• 主办单位：中国免疫学会
• 学会名称：中国免疫学会
• 页数：2
• 文件大小：1353k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

目的:研究Burkitt淋巴瘤Raji细胞株中Igκ3’增强子和C-Myc的相互作用的正反馈通路并初步探讨其作用机制。方法:荧光素酶报告质粒转染Raji细胞(C-Myc P1+IgκE3’组、C-Myc P1+IgκE3’-Del E2A组),分析检测C-Myc启动子p1的含量;在Raji细胞株中转染C-Myc过表达质粒、C-Myc siRNA、E2A siRNA质粒或C-Myc化学抑制剂及ERK化学抑制剂AZD8330处理细胞后,WB/PCR检测C-Myc、E2A、Igκ、pERK的含量;荧光素酶报告分析检测C-Myc对IgκE3’活性的调节;Chip实验检测C-Myc促进转录因子E2A与E3’相应基序的结合。结果:Igκ3’增强子E2A结合位点敲除组C-Myc启动子P1的表达水平低于未敲除组组(P<0.05);转染C-Myc过表达质粒后,Raji细胞株中C-Myc的表达量上升,同时E2A、Igκ、p ERK的mRNA含量及蛋白含量均高于对照组(P<0.05);Raji细胞株中转染C-Myc siRNA或使用10058-F4后,C-Myc、E2A、Igκ、p ERK的mRNA含量及蛋白含量较对照组低(P<0.05,P<0.01);Raji细胞中转染E2A siRNA质粒后,E2A、Igκ的蛋白及mRNA含量均较对照组低(P<0.05);ERK磷酸化化学抑制剂AZD8330作用于细胞后,E2A,Igκ蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01);荧光素酶报告分析显示C-Myc对IgκE3’的活性有调节作用(P<0.05);Chip实验显示C-Myc促进转录因子E2A与E3’相应基序的结合通过ERK通路(P<0.05)。结论:Igκ3’增强子促进Raji细胞株中C-Myc启动子的活化,活化后的C-Myc通过ERK通路调节Igκ3’增强子相关转录因子E2A的活性,从而促进Igκ的表达,形成正反馈通路。

引文