中药肿节风药用成分的研究
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摘要
肿节风是一味重要的传统中药，具有多种药理活性。本文通过DPPH法、脂质过氧化抑制试验、羟自由基清除试验测定了肿节风不同提取物的抗氧化作用，考察了它们的总多酚含量和总黄酮含量，采用MTT法体外抗肿瘤试验研究肿节风各个提取物的抗肿瘤效果。通过单因素试验和正交试验考察了肿节风乙醇提取工艺、超临界二氧化碳提取工艺的最优条件。并将最优工艺条件得到的提取物进行了抗氧化和抗肿瘤活性验证。通过GC-MS考察了肿节风超临界提取物和肿节风乙酸乙酯提取物的成分，并采用硅胶柱层析法对肿节风石油醚提取物进行了初步分离纯化。
结果如下：
(1)肿节风各提取物对DPPH自由基均显示了较好的清除作用，其中乙酸乙酯提取物的清除效果最佳；肿节风提取物显示了一定的脂质过氧化抑制作用，超临界提取物相对抑制脂质过氧化能力最好，在VC-Fe~(2+)的诱导下抑制率明显提高；肿节风各提取物显示了一定的羟自由基清除作用；肿节风乙酸乙酯提取物的总多酚和总黄酮含量最高；肿节风乙酸乙酯提取物有较好的体外抗HeLa、HepG-2肿瘤作用，肿节风乙酸乙酯提取物表现了较好的抗氧化和抗肿瘤活性，这可能和其所含的总黄酮含量有关，其内含的黄酮类物质是其抗氧化和抗肿瘤的主要药用成分之一。
(2)肿节风总黄酮的最佳乙醇提取工艺条件是料液比1：35、乙醇浓度70％、提取温度80℃、提取时间2.5h。肿节风超临界二氧化碳萃取的最优工艺是以总黄酮、提取物质量为指标：萃取温度45℃，萃取器压力15MPa，乙醇夹带剂用量80ml，萃取时间1.5h；以异嗪皮啶的质量为指标：萃取温度35℃，萃取器压力25MPa，乙醇夹带剂用量60ml，萃取时间1h。肿节风乙醇提取最佳工艺条件制备得到的乙酸乙酯提取物经验证有较好的抗氧化、抗肿瘤效果。
(3)气质联用分析肿节风超临界提取物和肿节风乙酸乙酯提取物，结果表明这两种提取物的成分有很大差异。石油醚提取物部分通过硅胶柱层析分离纯化得到一化合物，经鉴定为β-谷甾醇。
Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai is an important crude herb used intraditional Chinese medicine, which has various pharmacological activiti-es. In this paper, the antioxidant ability of S. glabra extracts was assayedthrough 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) method, lipid peroxidationinhibiting test, hydroxyl free radical scavenging test. The total phenolic andtotal flavones contents of the extracts were assayed. The antitumor activityof the extracts was tested by MTT method. The optimum extractionprocesses of medicinal components in S. glabra by ethanol extraction andsupercritical carbon dioxide fluid extraction were chosen through singlefactor and orthogonal experiments. The antioxidant and antitumor activitiesof the extracts under the optimum extraction processes were validated.
The results were showed as followed:
(1) All S. glabra extracts showed good DPPH radical scavenging effects, while the ethyl acetate extract showed best effect. All S. glabra extractsshowed lipid peroxidation inhibiting ability in certain extent, while theextracts of supercritical carbon dioxide fluid extraction showed best effect.The inhibiting rate was enhanced under the inducement from Fe~(2+)-VCobviously. All S. glabra extracts showed hydroxyl free radical scavengingability in certain extent. The ethyl acetate extract had the top content of totalphenolic and total flavones, and it inhibited the growths of HeLa andHepG-2 cells. It indicated that antioxidant and antitumor activities of theextracts were related with total flavones content. Total flavones in theextracts of S. glabra was one of the main medicinal components in S.glabra.
(2) The optimum ethanol extraction process of total flavones from S.glabra was adding 35 times amount of 70% ethanol and extracting for 2.5hours at 80℃. The optimum supercritical carbon dioxide fluid extractionprocess was 45℃, 15MPa, 80ml ethanol and 1.5 hours, evaluated by bothtotal flavones content and extract content. The optimum supercritical carbondioxide fluid extraction process was 35℃, 25MPa, 60ml ethanol and 1 hour,evaluated by isofraxidin content. The ethyl acetate extract gained from theoptimum ethanol extraction process was proved to have good antioxidantand antitumor activities.
(3) The chemical compositions of the extract from supercritical carbondioxide fluid extraction and ethyl acetate extract were separated and identified by GC-MS. The results showed great difference between twoextracts. Petroleum etherp extract was isolated by repeatedly silica gelcolumn chromatography, and one compound was isolated and identified asβ-sitosterol.
结果如下：
(1)肿节风各提取物对DPPH自由基均显示了较好的清除作用，其中乙酸乙酯提取物的清除效果最佳；肿节风提取物显示了一定的脂质过氧化抑制作用，超临界提取物相对抑制脂质过氧化能力最好，在VC-Fe~(2+)的诱导下抑制率明显提高；肿节风各提取物显示了一定的羟自由基清除作用；肿节风乙酸乙酯提取物的总多酚和总黄酮含量最高；肿节风乙酸乙酯提取物有较好的体外抗HeLa、HepG-2肿瘤作用，肿节风乙酸乙酯提取物表现了较好的抗氧化和抗肿瘤活性，这可能和其所含的总黄酮含量有关，其内含的黄酮类物质是其抗氧化和抗肿瘤的主要药用成分之一。
(2)肿节风总黄酮的最佳乙醇提取工艺条件是料液比1：35、乙醇浓度70％、提取温度80℃、提取时间2.5h。肿节风超临界二氧化碳萃取的最优工艺是以总黄酮、提取物质量为指标：萃取温度45℃，萃取器压力15MPa，乙醇夹带剂用量80ml，萃取时间1.5h；以异嗪皮啶的质量为指标：萃取温度35℃，萃取器压力25MPa，乙醇夹带剂用量60ml，萃取时间1h。肿节风乙醇提取最佳工艺条件制备得到的乙酸乙酯提取物经验证有较好的抗氧化、抗肿瘤效果。
(3)气质联用分析肿节风超临界提取物和肿节风乙酸乙酯提取物，结果表明这两种提取物的成分有很大差异。石油醚提取物部分通过硅胶柱层析分离纯化得到一化合物，经鉴定为β-谷甾醇。
Sarcandra glabra (Thunb.) Nakai is an important crude herb used intraditional Chinese medicine, which has various pharmacological activiti-es. In this paper, the antioxidant ability of S. glabra extracts was assayedthrough 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) method, lipid peroxidationinhibiting test, hydroxyl free radical scavenging test. The total phenolic andtotal flavones contents of the extracts were assayed. The antitumor activityof the extracts was tested by MTT method. The optimum extractionprocesses of medicinal components in S. glabra by ethanol extraction andsupercritical carbon dioxide fluid extraction were chosen through singlefactor and orthogonal experiments. The antioxidant and antitumor activitiesof the extracts under the optimum extraction processes were validated.
The results were showed as followed:
(1) All S. glabra extracts showed good DPPH radical scavenging effects, while the ethyl acetate extract showed best effect. All S. glabra extractsshowed lipid peroxidation inhibiting ability in certain extent, while theextracts of supercritical carbon dioxide fluid extraction showed best effect.The inhibiting rate was enhanced under the inducement from Fe~(2+)-VCobviously. All S. glabra extracts showed hydroxyl free radical scavengingability in certain extent. The ethyl acetate extract had the top content of totalphenolic and total flavones, and it inhibited the growths of HeLa andHepG-2 cells. It indicated that antioxidant and antitumor activities of theextracts were related with total flavones content. Total flavones in theextracts of S. glabra was one of the main medicinal components in S.glabra.
(2) The optimum ethanol extraction process of total flavones from S.glabra was adding 35 times amount of 70% ethanol and extracting for 2.5hours at 80℃. The optimum supercritical carbon dioxide fluid extractionprocess was 45℃, 15MPa, 80ml ethanol and 1.5 hours, evaluated by bothtotal flavones content and extract content. The optimum supercritical carbondioxide fluid extraction process was 35℃, 25MPa, 60ml ethanol and 1 hour,evaluated by isofraxidin content. The ethyl acetate extract gained from theoptimum ethanol extraction process was proved to have good antioxidantand antitumor activities.
(3) The chemical compositions of the extract from supercritical carbondioxide fluid extraction and ethyl acetate extract were separated and identified by GC-MS. The results showed great difference between twoextracts. Petroleum etherp extract was isolated by repeatedly silica gelcolumn chromatography, and one compound was isolated and identified asβ-sitosterol.
引文
[1] 肖培根．新编中药志[M]．北京：化学工业出版社，2002，3：195-199．
[2] 中国药典[S]．北京：化学工业出版社，2005，1：154-155．
[3] 临床抗癌中药彩色图典[M]．北京：人民卫生出版社，2001，1：147．
[4] 王钢力，陈道峰，林瑞超．肿节风的化学成分及其制剂质量控制研究进展[J]．中草药，2003，34(8)：附12-14．
[5] 罗永明，刘爱华，余邦伟，等．中药草珊瑚的化学成分研究[J]．中国药学杂志，2005，40(17)：1296-1298．
[6] 曾爱华，罗永明．草珊瑚化学成分研究[J]．中药材，2005，28(4)：292-293．
[7] Luo Yong-ming, Liu Ai-hua.Two new triterpenoid saponins from Sarcandra glabra [J]. Journal of Asian Natural Products Research, 2005, 7 (6): 829-834.
[8] 陆颂规．肿节风的研究进展[J]．中药材，2001，24(8)：606-608．
[9] 黄荣清，谢平，史建栋，等．月中节风挥发油的气相色谱—质谱分析[J]．中成药，1998，20(1)：37-38．
[10] 李先春，王敦清．测定草珊瑚中硒含量的方法研究[J]．江西师范大学学报(自然科学版)，1998，22(1)：53-56．
[11] 孙文娟，李晶，兰凤英，等．肿节风注射液抗小鼠肝癌Hep-A-22的作用及毒性[J]．中成药，2003，25(4)：313-315．
[12] 孙文娟，李晶，兰凤英，等．肿节风注射液抗小鼠前胃癌FC的作用及毒性[J]．中药新药与临床药理，2003，14(3)：168-171．
[13] 蒋伟哲，孙晓龙．肿节风片对恶性肿瘤和免疫功能的影响[J]．广西医科大学学报，2001，18(1)：39-41．
[14] 蒋伟哲，孙晓龙．肿节风片的抗菌和抗炎作用研究[J]．广西中医学院学报，2000，17(1)：50-52．
[15] 黄芳，何宏文．九节茶对变形链球菌体外致龋力的实验研究[J]．中国民政医学杂志，2001，13(4)：201-203．
[16] 赵诗云，彭旦明，周名智，等．肿节风对小鼠白细胞和血小板的影响[J]．上海实验动物 科学，2000，20(3)：154-156．
[17] 徐国良，肖兵华，陈奇，等．肿节风及其分离部位对免疫性血小板减少性紫癜小鼠血小板的影响[J]．中国实验方剂学杂志，2005，11(4)：33-36．
[18] 钟立业，刘天浩，陈运贤，等．肿节风防治化疗后血小板减少症的研究[J]．中药材，2005，28(1)：35-37．
[19] 孙建琴，孙晓红，王惠群，等．草珊瑚的毒性研究[J]．贵阳医学院学报，1998，23(1)：43-44．
[20] 黄智峰，赖海标，曾晔，等．肿节风注射液对中晚期前列腺癌26例PSA、F-PSA的影响[J]．中医研究，2006，19(11)：25-26．
[21] 丛珊亭，毕文，姜立喜．肿节风注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌[J]．肿瘤防治杂志，2005，2：156．
[22] 郭岳峰，黄莉，王胜虎，等．肿节风注射液联合化疗治疗中晚期胃癌32例[J]．中医杂志，2003，44(6)：434．
[23] 杨人寿．子宫卵巢转移性恶性淋巴瘤长期存活一例[J]．广西中医学院学报，1999，39(4)：23．
[24] 周娇妹，樊慧苏，卢芹芳月中节风注射液治疗婴幼儿毛细支气管炎50例[J]．浙江中西医结合杂志，2006，16(3)：171．
[25] 林如平，郭蜀京，胡英．肿节风注射液治疗慢性支气管炎急性发作疗效观察[J]．四川中医，2006，24(7)：49-50．
[26] 欧江琴，刘良丽．肿节风注射液治疗老年肺炎24例疗效观察[J]．河北中医，2004，26(10)：782．
[27] 张东坡，郭燕华，彭蕻琳，等．肿节风注射液治疗急性上呼吸道感染68例[J]．临床医药，2006，15(12)：53-54．
[28] 杜永翠，李蔚青，邱黎．肿节风注射液治疗腮腺炎68例疗效观察[J]．现代中西医结合杂志，2005，14(22)：2935．
[29] 杨连山，孙洪梅．草珊瑚口腔膏治疗急性智齿冠周炎的疗效[J]．牙体牙髓牙周病学杂志，2004，14(12)：669．
[30] 黄长联，董海辉，李勇军．肿节风注射液关节腔内注射配合舒筋汤外洗治疗关节骨性关节炎68例疗效观察[J]．新中医，2006，38(4)：56-57．
[31] 王迎春，阮长耿小剂量糖皮质激素联合肿节风治疗原发性血小板减少性紫癜的初步报 告[J]．江苏临床医学杂志，2002，6(3)：193-195．
[32] 王陆军，潘理明，吴亮生，等．血康在成人原发性血小板减少性紫癜的应用[J]．安徽医学，1996，17(5)：50．
[33] 范献群，鲍圆华，陈海琼，等．草珊瑚治疗细菌性痢疾33例疗效观察[J]．中成药研究，1983，(8)：28-29．
[34] 罗奇志，戴开金，马安德．高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定肿节风中异秦皮啶的含量[J]．南方医科大学学报，2006，26(12)：1821-1823．
[35] 王砚，王钢力，姚令文，等．肿节风药材中反丁烯二酸和异秦皮啶的含量测定[J]．华西药学杂志，2005，20(1)：60-62．
[36] 谢东，文东旭，周嵩煜，等．HPLC测定复方肿节风胶囊中异嗪皮啶的[J]．华西药学杂志，2001，16(4)：376-377．
[37] Zheng Wen-jie, Wang Shu-fang, Chen Xing-guo. Analysis of Sarcandra glabra and its medicinal preparations by capillary electrophoresis[J]. Talanta, 2003, 60(5): 955-960.
[38] 董昌平．RP-HPLC法分别测定肿节风的根、茎、叶中异嗪皮啶的含量[J]．中国新医药，2004，3(10)：93-94．
[39] 曾爱华，罗永明，刘宁．草珊瑚药材中依斯坦布林A的HPLC法测定[J]．中药材，2006，29(5)：443-444．
[40] 吴永江，侯晓蓉，程翼宇．肿节风HPLC指纹图谱研究[J]冲国中药杂志，2005，30(1)：67-69．
[41] 涂艺声，吴笑臣．筛选草珊瑚黄酮高产细胞克隆系的研究[J]．中草药，2006，37(2)：276-279．
[42] 朱才庆，余华，张锐，等．草珊瑚浸膏的絮凝和膜分离纯化研究[J]．中草药，2006，37(1)：45-48．
[43] 胡小平，朱才庆，朱良辉，等．超声对草珊瑚液膜分离效果的影响[J]．中成药，2006，28(4)：486-488．
[44] Prise KM, Davies S, Stratfofd MR, et al. The role of non-protein sulphdryls in determining the chemical repair rates of free radical precursors of DNA damage and cell killing in Chinese hamster V79 cells. International Journal of Radiation Biology, 1992, 62(3): 297-306.
[45] 熊皓平，杨伟丽，张友胜，等．天然植物抗氧化剂的研究进展[J]．天然产物研究与开发，2001，13(5)：75-79．
[46] Horakova L, Licht A, Sandig G, et al. Standardized extracts of flavonoids increase the viability of PC12 cells treated with hydrogen peroxide effects on oxidative injury[J]. Archives of Toxicology, 2003, 77(1): 22-29.
[47] 李丹，肖刚，丁霄霖．苦荞黄酮抗氧化作用的研究[J]．无锡轻工大学学报，2001，20(1)：44-47．
[48] 张健，曹恩华，马文建，等．药物的抗氧化作用对DNA发光动力学行为的影响[J]．感光科学与光化学，1997，15(2)：114-119．
[49] 常翠青，陈吉棣，王香生．有机酸对人血管内皮细胞的保护作用[J]．中华预防医学杂志，2001，35(2)：79-82
[50] Chlopcikova S, Psotova J, Miketova P, et al. Chemoprotective effect of plant phenolics against anthracycline-induced toxicityon rat cardiomyocytes. Part Ⅱ. caffeic, chlorogenic and rosmarinic acids. Phytotherapy research, 2004, 18: 408-413.
[51] Owen RW, Mier W, Giacosa A, et al. Identification of lignans as major components in the phenolic fraction of olive oil. Clinical Chemistry, 2000, 46: 976-988.
[52] 陈晓玲．植物药中原花青素的抗氧化作用[J]．中国中药杂志，2003，28(8)：700-702．
[53] Yamakoshi J, Ktoka S, Loag T, et al. Prounthocyanidin rich extract from Grape seeds attenuaters the development of aortic atherosclerosis in cholesterol feed rabbits[J]. Atherosclerosi, 1999, 142(1): 139-146.
[54] Sinatra ST, Demarco J. Oxidized low density lipoprotein (LDL) and the heart: antioxidants and other strategies to limit cardiovascular damage[J]. Connecticut medicine, 1995, 59(10): 579-588.
[55] 徐先祥，夏伦祝，高家荣．中药皂苷类物质抗氧化作用研究进展[J]．中国中医药科技，2004，11(2)：126-128．
[56] 吴春福，于庆海，刘雯，等．依据自由基学说研究人参茎叶皂甙的抗衰老作用[J]．沈阳药学院学报，1992，9(1)：37-40．
[57] 孙健，崔燕，孟小萍．三七总皂甙对培养的大白兔泡沫细胞产生的氧自由基的影响[J]．长春中医学院学报，1999，15(3)：49-51．
[58] 张慧丽，宋有涛，辛如，等．超声提取绞股蓝总皂苷及抗氧化作用的研究[J]．辽宁大学学报，2006，33(4)：346-348．
[59] 边晓丽，靳菊情，丁东宁，等．长松萝多糖清除氧自由基和抗脂质过氧化反应的研究[J]．中药材，2002，25(3)：188-189．
[60] 谢大泽，湛学军，章涛，等．枸杞等5种多糖清除氧自由基的实验研究[J]．江西医学检验，2002，20(4)：195-196．
[61] 黄进，杨国宇，李宏基，等．抗氧化剂作用机制研究进展[J]．自然杂志，2004，26(2)：74-78．
[62] 徐勤．鞣质的研究进展[J]．华夏医学，2004，17(1)：113-115．
[63] 谭仁祥，王剑文，徐琛，等．植物成分功能[M]．北京：科学出版社，2003：423．
[64] 何凤慈，唐汝愚，姚丹帆．粉防己碱对急性炎症血管通透性和嗜中性白细胞功能的影响[J]．中国药理学报，1989，10(3)：249．
[65] 宋洪涛，郭涛，宓鹤鸣．天然药物中的抗氧化剂[J]_中草药，1991，22(7)：331-334．
[66] 凌关庭．抗氧化食品与健康[M]．北京：化学工业出版社，2004，330．
[67] 林金明，屈锋，单孝全．活性氧测定的基本原理与方法[J]．分析化学，2002，30(12)：1507-1514．
[68] 文镜，贺素华，杨育颖，等．保健食品清除自由基作用的体外测定方法和原理[J]．食品科学，2004，25(11)：190-195．
[69] Nicole Cotelle, et al. Antioxidant properties of hydroxy flavones[J].Free Radical Biology & Medicine, 1996, 20(1): 35-43.
[70] Tatiana D, Galina T, Vilhelmina J. Characterization of the Radical Scavenging Activity of Lignins-natural Antioxidants[J]. Bioresource Technology, 2004, 95: 309-317.
[71] 丁晓霜．人参炔三醇抑制肿瘤细胞增殖，诱导细胞周期停止于G_2／M期[J]．国外医学中医中药分册，2004，26(1)：42．
[72] 黄挺，陈震，李勇，等．参麦液抗肿瘤作用及其对糖代谢影响[J]．中成药，2003，25(5)：390-393．
[73] 齐春会，张永祥，李凤仙，等．六味地黄多糖体外抗肿瘤作用的初步研究[J]．中国药理学通报，1999，15(4)：322-324．
[74] 李贵新，徐功立，姜夕锋，等．蟾酥注射液抑制淋巴瘤U_(937)细胞增殖和诱导其凋亡的研究[J]．中成药，2002，24(11)：854-856．
[75] 李同度．临床肿瘤学[M]．合肥：安徽科学技术出版社，1995，70．
[76] 邬伟秀，郭峰．天花粉对血液肿瘤患者红细胞免疫功能影响的实验研究[J]．上海免疫学杂志，1995，15(3)：156．
[77] 沃兴德，丁志山，袁巍，等．姜黄素及其衍生物抑制肿瘤作用的实验研究[J]．浙江中医学院学报，2005，29(2)：53-61．
[78] 胡丰林，陆瑞利．蔷薇科一些植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性的研究[J]．植物学通报，2004，21(1)：74-78．
[79] 赵肃清，孙远明，蔡燕飞，等．香蕉皮黑色素的鉴定及其抗氧化作用研究[J]．中草药，2002，33(6)：406-498
[80] 焦扬，李彩霞，胡丽杰，等．唐古特白刺提取物抗氧化作用的研究[J]．食品工业科技，2006，(5)：54-55．
[81] 冯建光，陈利琼．葡萄籽提取物中原花青素的测定[J]．中国食品添加剂，2003，6：103-105．
[82] 中国药典[S]．北京：化学工业出版社，2005，1：23．
[83] 李杰，刘玉琴．MTT法在肿瘤研究中的改良及应用进展[J]．中国肿瘤临床，1998，25(4)：312-313．
[84] 中草药情报中心站，植物药有效成分手册[M]．北京：人民卫生出版社，1983，968．
[2] 中国药典[S]．北京：化学工业出版社，2005，1：154-155．
[3] 临床抗癌中药彩色图典[M]．北京：人民卫生出版社，2001，1：147．
[4] 王钢力，陈道峰，林瑞超．肿节风的化学成分及其制剂质量控制研究进展[J]．中草药，2003，34(8)：附12-14．
[5] 罗永明，刘爱华，余邦伟，等．中药草珊瑚的化学成分研究[J]．中国药学杂志，2005，40(17)：1296-1298．
[6] 曾爱华，罗永明．草珊瑚化学成分研究[J]．中药材，2005，28(4)：292-293．
[7] Luo Yong-ming, Liu Ai-hua.Two new triterpenoid saponins from Sarcandra glabra [J]. Journal of Asian Natural Products Research, 2005, 7 (6): 829-834.
[8] 陆颂规．肿节风的研究进展[J]．中药材，2001，24(8)：606-608．
[9] 黄荣清，谢平，史建栋，等．月中节风挥发油的气相色谱—质谱分析[J]．中成药，1998，20(1)：37-38．
[10] 李先春，王敦清．测定草珊瑚中硒含量的方法研究[J]．江西师范大学学报(自然科学版)，1998，22(1)：53-56．
[11] 孙文娟，李晶，兰凤英，等．肿节风注射液抗小鼠肝癌Hep-A-22的作用及毒性[J]．中成药，2003，25(4)：313-315．
[12] 孙文娟，李晶，兰凤英，等．肿节风注射液抗小鼠前胃癌FC的作用及毒性[J]．中药新药与临床药理，2003，14(3)：168-171．
[13] 蒋伟哲，孙晓龙．肿节风片对恶性肿瘤和免疫功能的影响[J]．广西医科大学学报，2001，18(1)：39-41．
[14] 蒋伟哲，孙晓龙．肿节风片的抗菌和抗炎作用研究[J]．广西中医学院学报，2000，17(1)：50-52．
[15] 黄芳，何宏文．九节茶对变形链球菌体外致龋力的实验研究[J]．中国民政医学杂志，2001，13(4)：201-203．
[16] 赵诗云，彭旦明，周名智，等．肿节风对小鼠白细胞和血小板的影响[J]．上海实验动物 科学，2000，20(3)：154-156．
[17] 徐国良，肖兵华，陈奇，等．肿节风及其分离部位对免疫性血小板减少性紫癜小鼠血小板的影响[J]．中国实验方剂学杂志，2005，11(4)：33-36．
[18] 钟立业，刘天浩，陈运贤，等．肿节风防治化疗后血小板减少症的研究[J]．中药材，2005，28(1)：35-37．
[19] 孙建琴，孙晓红，王惠群，等．草珊瑚的毒性研究[J]．贵阳医学院学报，1998，23(1)：43-44．
[20] 黄智峰，赖海标，曾晔，等．肿节风注射液对中晚期前列腺癌26例PSA、F-PSA的影响[J]．中医研究，2006，19(11)：25-26．
[21] 丛珊亭，毕文，姜立喜．肿节风注射液联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌[J]．肿瘤防治杂志，2005，2：156．
[22] 郭岳峰，黄莉，王胜虎，等．肿节风注射液联合化疗治疗中晚期胃癌32例[J]．中医杂志，2003，44(6)：434．
[23] 杨人寿．子宫卵巢转移性恶性淋巴瘤长期存活一例[J]．广西中医学院学报，1999，39(4)：23．
[24] 周娇妹，樊慧苏，卢芹芳月中节风注射液治疗婴幼儿毛细支气管炎50例[J]．浙江中西医结合杂志，2006，16(3)：171．
[25] 林如平，郭蜀京，胡英．肿节风注射液治疗慢性支气管炎急性发作疗效观察[J]．四川中医，2006，24(7)：49-50．
[26] 欧江琴，刘良丽．肿节风注射液治疗老年肺炎24例疗效观察[J]．河北中医，2004，26(10)：782．
[27] 张东坡，郭燕华，彭蕻琳，等．肿节风注射液治疗急性上呼吸道感染68例[J]．临床医药，2006，15(12)：53-54．
[28] 杜永翠，李蔚青，邱黎．肿节风注射液治疗腮腺炎68例疗效观察[J]．现代中西医结合杂志，2005，14(22)：2935．
[29] 杨连山，孙洪梅．草珊瑚口腔膏治疗急性智齿冠周炎的疗效[J]．牙体牙髓牙周病学杂志，2004，14(12)：669．
[30] 黄长联，董海辉，李勇军．肿节风注射液关节腔内注射配合舒筋汤外洗治疗关节骨性关节炎68例疗效观察[J]．新中医，2006，38(4)：56-57．
[31] 王迎春，阮长耿小剂量糖皮质激素联合肿节风治疗原发性血小板减少性紫癜的初步报 告[J]．江苏临床医学杂志，2002，6(3)：193-195．
[32] 王陆军，潘理明，吴亮生，等．血康在成人原发性血小板减少性紫癜的应用[J]．安徽医学，1996，17(5)：50．
[33] 范献群，鲍圆华，陈海琼，等．草珊瑚治疗细菌性痢疾33例疗效观察[J]．中成药研究，1983，(8)：28-29．
[34] 罗奇志，戴开金，马安德．高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定肿节风中异秦皮啶的含量[J]．南方医科大学学报，2006，26(12)：1821-1823．
[35] 王砚，王钢力，姚令文，等．肿节风药材中反丁烯二酸和异秦皮啶的含量测定[J]．华西药学杂志，2005，20(1)：60-62．
[36] 谢东，文东旭，周嵩煜，等．HPLC测定复方肿节风胶囊中异嗪皮啶的[J]．华西药学杂志，2001，16(4)：376-377．
[37] Zheng Wen-jie, Wang Shu-fang, Chen Xing-guo. Analysis of Sarcandra glabra and its medicinal preparations by capillary electrophoresis[J]. Talanta, 2003, 60(5): 955-960.
[38] 董昌平．RP-HPLC法分别测定肿节风的根、茎、叶中异嗪皮啶的含量[J]．中国新医药，2004，3(10)：93-94．
[39] 曾爱华，罗永明，刘宁．草珊瑚药材中依斯坦布林A的HPLC法测定[J]．中药材，2006，29(5)：443-444．
[40] 吴永江，侯晓蓉，程翼宇．肿节风HPLC指纹图谱研究[J]冲国中药杂志，2005，30(1)：67-69．
[41] 涂艺声，吴笑臣．筛选草珊瑚黄酮高产细胞克隆系的研究[J]．中草药，2006，37(2)：276-279．
[42] 朱才庆，余华，张锐，等．草珊瑚浸膏的絮凝和膜分离纯化研究[J]．中草药，2006，37(1)：45-48．
[43] 胡小平，朱才庆，朱良辉，等．超声对草珊瑚液膜分离效果的影响[J]．中成药，2006，28(4)：486-488．
[44] Prise KM, Davies S, Stratfofd MR, et al. The role of non-protein sulphdryls in determining the chemical repair rates of free radical precursors of DNA damage and cell killing in Chinese hamster V79 cells. International Journal of Radiation Biology, 1992, 62(3): 297-306.
[45] 熊皓平，杨伟丽，张友胜，等．天然植物抗氧化剂的研究进展[J]．天然产物研究与开发，2001，13(5)：75-79．
[46] Horakova L, Licht A, Sandig G, et al. Standardized extracts of flavonoids increase the viability of PC12 cells treated with hydrogen peroxide effects on oxidative injury[J]. Archives of Toxicology, 2003, 77(1): 22-29.
[47] 李丹，肖刚，丁霄霖．苦荞黄酮抗氧化作用的研究[J]．无锡轻工大学学报，2001，20(1)：44-47．
[48] 张健，曹恩华，马文建，等．药物的抗氧化作用对DNA发光动力学行为的影响[J]．感光科学与光化学，1997，15(2)：114-119．
[49] 常翠青，陈吉棣，王香生．有机酸对人血管内皮细胞的保护作用[J]．中华预防医学杂志，2001，35(2)：79-82
[50] Chlopcikova S, Psotova J, Miketova P, et al. Chemoprotective effect of plant phenolics against anthracycline-induced toxicityon rat cardiomyocytes. Part Ⅱ. caffeic, chlorogenic and rosmarinic acids. Phytotherapy research, 2004, 18: 408-413.
[51] Owen RW, Mier W, Giacosa A, et al. Identification of lignans as major components in the phenolic fraction of olive oil. Clinical Chemistry, 2000, 46: 976-988.
[52] 陈晓玲．植物药中原花青素的抗氧化作用[J]．中国中药杂志，2003，28(8)：700-702．
[53] Yamakoshi J, Ktoka S, Loag T, et al. Prounthocyanidin rich extract from Grape seeds attenuaters the development of aortic atherosclerosis in cholesterol feed rabbits[J]. Atherosclerosi, 1999, 142(1): 139-146.
[54] Sinatra ST, Demarco J. Oxidized low density lipoprotein (LDL) and the heart: antioxidants and other strategies to limit cardiovascular damage[J]. Connecticut medicine, 1995, 59(10): 579-588.
[55] 徐先祥，夏伦祝，高家荣．中药皂苷类物质抗氧化作用研究进展[J]．中国中医药科技，2004，11(2)：126-128．
[56] 吴春福，于庆海，刘雯，等．依据自由基学说研究人参茎叶皂甙的抗衰老作用[J]．沈阳药学院学报，1992，9(1)：37-40．
[57] 孙健，崔燕，孟小萍．三七总皂甙对培养的大白兔泡沫细胞产生的氧自由基的影响[J]．长春中医学院学报，1999，15(3)：49-51．
[58] 张慧丽，宋有涛，辛如，等．超声提取绞股蓝总皂苷及抗氧化作用的研究[J]．辽宁大学学报，2006，33(4)：346-348．
[59] 边晓丽，靳菊情，丁东宁，等．长松萝多糖清除氧自由基和抗脂质过氧化反应的研究[J]．中药材，2002，25(3)：188-189．
[60] 谢大泽，湛学军，章涛，等．枸杞等5种多糖清除氧自由基的实验研究[J]．江西医学检验，2002，20(4)：195-196．
[61] 黄进，杨国宇，李宏基，等．抗氧化剂作用机制研究进展[J]．自然杂志，2004，26(2)：74-78．
[62] 徐勤．鞣质的研究进展[J]．华夏医学，2004，17(1)：113-115．
[63] 谭仁祥，王剑文，徐琛，等．植物成分功能[M]．北京：科学出版社，2003：423．
[64] 何凤慈，唐汝愚，姚丹帆．粉防己碱对急性炎症血管通透性和嗜中性白细胞功能的影响[J]．中国药理学报，1989，10(3)：249．
[65] 宋洪涛，郭涛，宓鹤鸣．天然药物中的抗氧化剂[J]_中草药，1991，22(7)：331-334．
[66] 凌关庭．抗氧化食品与健康[M]．北京：化学工业出版社，2004，330．
[67] 林金明，屈锋，单孝全．活性氧测定的基本原理与方法[J]．分析化学，2002，30(12)：1507-1514．
[68] 文镜，贺素华，杨育颖，等．保健食品清除自由基作用的体外测定方法和原理[J]．食品科学，2004，25(11)：190-195．
[69] Nicole Cotelle, et al. Antioxidant properties of hydroxy flavones[J].Free Radical Biology & Medicine, 1996, 20(1): 35-43.
[70] Tatiana D, Galina T, Vilhelmina J. Characterization of the Radical Scavenging Activity of Lignins-natural Antioxidants[J]. Bioresource Technology, 2004, 95: 309-317.
[71] 丁晓霜．人参炔三醇抑制肿瘤细胞增殖，诱导细胞周期停止于G_2／M期[J]．国外医学中医中药分册，2004，26(1)：42．
[72] 黄挺，陈震，李勇，等．参麦液抗肿瘤作用及其对糖代谢影响[J]．中成药，2003，25(5)：390-393．
[73] 齐春会，张永祥，李凤仙，等．六味地黄多糖体外抗肿瘤作用的初步研究[J]．中国药理学通报，1999，15(4)：322-324．
[74] 李贵新，徐功立，姜夕锋，等．蟾酥注射液抑制淋巴瘤U_(937)细胞增殖和诱导其凋亡的研究[J]．中成药，2002，24(11)：854-856．
[75] 李同度．临床肿瘤学[M]．合肥：安徽科学技术出版社，1995，70．
[76] 邬伟秀，郭峰．天花粉对血液肿瘤患者红细胞免疫功能影响的实验研究[J]．上海免疫学杂志，1995，15(3)：156．
[77] 沃兴德，丁志山，袁巍，等．姜黄素及其衍生物抑制肿瘤作用的实验研究[J]．浙江中医学院学报，2005，29(2)：53-61．
[78] 胡丰林，陆瑞利．蔷薇科一些植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性的研究[J]．植物学通报，2004，21(1)：74-78．
[79] 赵肃清，孙远明，蔡燕飞，等．香蕉皮黑色素的鉴定及其抗氧化作用研究[J]．中草药，2002，33(6)：406-498
[80] 焦扬，李彩霞，胡丽杰，等．唐古特白刺提取物抗氧化作用的研究[J]．食品工业科技，2006，(5)：54-55．
[81] 冯建光，陈利琼．葡萄籽提取物中原花青素的测定[J]．中国食品添加剂，2003，6：103-105．
[82] 中国药典[S]．北京：化学工业出版社，2005，1：23．
[83] 李杰，刘玉琴．MTT法在肿瘤研究中的改良及应用进展[J]．中国肿瘤临床，1998，25(4)：312-313．
[84] 中草药情报中心站，植物药有效成分手册[M]．北京：人民卫生出版社，1983，968．