摘要
目的:
通过观察益气解毒活络中药复方对链脲佐菌素(STZ)所致早期糖尿病肾病(DN)大鼠一般状况的影响;对药效学指标(体重、空腹血糖、糖化血红蛋白、尿微量白蛋白、血β2微球蛋白及肾脏病理改变等)变化的影响;对药物作用机制指标【血清脂联素(ADPN)、血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肾组织单核细胞趋化蛋白(MCP)-1及肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)】变化的影响,以探讨益气解毒活络中药复方防治早期糖尿病肾病的效果及作用机制,并深入探讨早期糖尿病肾病发生发展的病理机制。
材料与方法:
1.实验材料:选择SPF级的健康SD雄性大鼠;益气解毒活络中药复方由黄精、黄芪、黄连、虎杖、泽兰、水蛭粉组成,用免煎中药配方颗粒;西药选用盐酸贝那普利(洛汀新)片。
2.动物分组及造模方法:将大鼠按体重随机分为六组,即A组-正常对照组、B组-模型空白组、C组-中药预防组、D1组-中药低剂量治疗组、D2组-中药高剂量治疗组及E组-阳性西药对照组。所有造模大鼠采用高脂高糖饮料喂养4周,在注射STZ后72小时,将空腹血糖≥16.7mmol/L确定为DM模型,纳入到正式实验中,根据血糖值高低进行随机分组。
3.给药方法:正常对照组、模型空白组给生理盐水2ml;中药颗粒剂溶于蒸馏水中,中药预防组、中药低剂量治疗组及阳性西药对照组的大鼠每日用药量按人体(g/kg)的等效剂量,即6.3倍计算;中药高剂量治疗组的用药量按中药低剂量组的3倍计算。中药预防组在血糖达标后即给予中药。DM模型复制成功两周后,中药低剂量治疗组、中药高剂量治疗组及阳性西药对照组开始给药。灌胃,每日1次,给药疗程共4周。
4.观测指标:药效学指标,其中包括:大鼠的一般情况、体重、血糖、糖化血红蛋白、血β2微球蛋白、24h尿微量白蛋白及肾脏组织病理形态学。观测益气解毒活络中药复方的药物作用机制指标,其中包括:血清脂联素和血清超敏C-反应蛋白,肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA含量及其蛋白表达的变化。
5.统计学分析:统计分析采用SPSS11.5统计软件进行分析,组间比较用单因素方差分析(One-Way ANOVE),P<0.05为有显著性差异。
结果:
1.对大鼠一般状况的影响:正常对照组大鼠体重明显增加,精神状态良好,反应灵敏,动作敏捷,毛色光泽。模型空白组大鼠表现为多饮、多食、多尿,精神萎靡,反应迟钝,动作迟缓,毛枯黄稀少,拱背蜷卧,2只出现尾部溃烂,2只大鼠的眼睛出现病理变化。实验组也有类似表现,经治疗后,程度均有所缓解。
2.对大鼠体重的影响:模型空白组大鼠的体重在成模后4周末明显下降,与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01);经药物干预后的各组大鼠,体重明显增加,与模型空白组比较都有显著性的差异(P<0.01)。
3.对血糖的影响:模型空白组大鼠的血糖在成模后4周末比正常组明显升高,两组之间存在显著性差异(P<0.01);用药物干预后的各组大鼠,血糖值与模型空白组相比均呈显著性下降(P<0.01)。
4.对糖化血红蛋白的影响:与正常对照组组比较,模型空白组大鼠的糖化血红蛋白含量明显升高,组间存在显著性差异(P<0.01);经药物干预后的各组大鼠,其糖化血红蛋白含量与模型组相比均呈显著性下降(P<0.01)。
5.对24h尿微量白蛋白的影响:模型空白组大鼠24h尿微量白蛋白含量比正常对照组明显上升,组间存在显著性差异(P<0.01);经药物干预后的各组大鼠,其24h尿微量白蛋白含量明显下降,与模型空白组比较均有显著性差异(P<0.01)。
6.对血β2微球蛋白的影响:与正常对照组比较,模型空白组大鼠的血β2微球蛋白含量明显上升,存在显著性的差异(P<0.01);经各药物干预后的大鼠,其血β2微球蛋白含量明显下降,与模型空白组比较均有显著性差异(P<0.01)。
7.对大鼠肾脏病理变化的影响:光镜下,正常组可见正常肾小球,细胞无明显增生,系膜区较窄,毛细血管腔开放,充满红细胞。模型组系膜区增宽,肾小球囊与毛细血管襻发生粘连;肾脏皮质变窄;髓质肾小管上皮空泡变;管腔内可见蛋白样物;肾小管破坏,部分上皮细胞核消失。各中药组和西药组大鼠经治疗后,上述病变有不同程度的改善,光镜下可见部分肾小球增大,皮质变窄,髓质肾小管上皮空泡变及肾小球系膜细胞增生等改变均减轻。
8.对血清脂联素的影响:模型空白组的血清脂联素含量与正常对照组相比明显下降,存在着明显的差异(P<0.01);经药物干预后,各组血清脂联素水平比模型空白组均呈现上升趋势,且与模型空白组都有显著性差异(P<0.01)。
9.对血清hs-CRP的影响:模型空白组的血清hs-CRP含量明显高于正常对照组,具有显著性差异(P<0.01)。经药物干预治疗后,各组血清hs-CRP含量与模型空白组相比均下降,且与模型空白组间均存在显著性差异(P<0.01)。
10.对肾组织单核细胞趋化蛋白-1的影响
10.1对肾组织MCP-1mRNA含量的影响:模型空白组大鼠肾组织的MCP-1mRNA含量比正常对照组明显上升,并具有显著性差异(P<0.01);经药物干预后,各组大鼠肾组织的MCP-1mRNA含量比模型空白组明显下降(P<0.01)。
10.2对肾组织MCP-1蛋白表达的影响:模型空白组大鼠肾组织的MCP-1蛋白表达比正常对照组明显上升,并具有显著性差异(P<0.01);经药物干预后,各组大鼠肾组织的MCP-1蛋白表达比模型空白组均有显著性下降(P<0.01)。
11.对肾组织肿瘤坏死因子-α的影响
11.1对肾组织TNF-αmRNA含量的影响:模型空白组大鼠肾组织的TNF-αmRNA含量明显上升,与正常对照组相比具有显著性差异(P<0.01);经药物干预后的各组大鼠,其肾组织的TNF-αmRNA含量表达水平比模型空白组均显著性下降(P<0.01)。
11.2对肾组织TNF-α蛋白表达的影响:模型空白组大鼠肾组织的TNF-α蛋白表达比正常对照组明显上升,具有显著性差异(P<0.01);经药物干预后的各组大鼠,其肾组织的TNF-α蛋白表达水平比模型组均显著性下降(P<0.01)。
结论:
1.益气解毒活络中药复方对早期DN大鼠的药效学指标(大鼠的一般情况、体重、血糖、糖化血红蛋白、24h尿微量白蛋白、血β2微球蛋白及肾脏的病理改变)有显著的改善作用,能够有效控制早期DN大鼠的血糖变化、保护受损的肾组织,对早期DN有明显的预防和治疗作用。
2.益气解毒活络中药复方对早期DN大鼠药物作用机制指标(血清脂联素、血清超敏C-反应蛋白、肾组织MCP-1含量及肾组织TNF-α含量)的异常变化有显著的调节作用,能够有效控制早期DN发生发展过程中的炎症反应,该中药复方防治早期DN发生发展的药理机制是通过改善上述指标的异常表达来实现。
3.早期DN的发生发展与脂联素表达水平降低、hs-CRP含量升高、MCP-1表达升高及TNF-α表达升高密切相关,提示早期DN的发病机制可能与上述指标的异常变化相关。
Purpose:We took the DN rat model, built with HG & HF feeding and once injection through vena caudalis with STZ as the research object, to investigate the pathological mechanism of DN in early period of occurrence and development and to approach the effect and acting mechanism of pescription of invigorate vital energy, detoxicating and activating collaterals (IDAP) in preventing and curing DN by evaluating the general condition of rats, detecting the related figure such as weight, BFS, glycosylated hemoglobin, uria albumin, serum beta 2-microglobulin and MCP-1 and TNF-αin nephridial tissue and observing the pathological change of kidney.
Material and method:
1.Materials
We took healthy and male, SD rats in SPF Level as research object. Pescription of invigorate vital energy, detoxicating and activating collaterals (IDAP) was composed of the detocting free powder of herbs including solomonseal rhizome, astragali,radix, coptis chinensis, giant knotweed rhizome, eupatorium and sanguisuge. benazepril hydrochloride pellet was taken as the positive controlling factor.
2.Grouping dividing and DN rat model building:
72 SD rats were randomly divided into 6 groups as following, control group (A), blank group (B), LD group (D1), HD group (D2) and positive control group (E). We built up DN rat model by 4-week HG & HF feeding and once injection through vena caudalis with STZ and recognized the model by the standard of FBG≥16.7mmol/L.
3.Medication
We daily intragastricly administrated the rats of Group A and B with NS 2ml, the rats of Group C, D1, and D2 with IDAP, drug granules dissolved in distilled water, at respectively dose as 14.7g/kg, 14.7g/kg and 44.1g/kg and the rats of group E with Benazepril Hydrochloride Tablets at dose of 1.05mg/kg. The procedure administrating with drug lasted 4weeks in total.
4.Figure and Assay method
The pharmacodynamics figure we took to observe the effect and mechanism of IDAP includes general condition, weight, blood glucose, serum beta2-microglobulin, uria-albumin (24h), pathomorphism change of nephridial tissue, hs-CRP and ADPN in serum (ELISA), MCP-1 and TNF-α.
5.Statistics analysis
Measurement data was taken by using SPSS11.5 software and P<0.05 was recognized as significant difference existing.
Results:
1.Influences to general conditions of rats:
Group A- obviously weight gained, in good mood and sensitive, agile moving, tramosericeous color pattern and no death.
Group B- polydipsia, polyphagia, hyperdiuresis, depressed, dull, sluggishly moving, dry and rare fur, bending, tow rats got ulcerate in tail.
Group C, D1, D2, E– similar manifestation to Group B but less in degree.
2.Influences to weight: Compared to group A, result of group B is significantly lower when 4w after pattern achieved (P<0.01). Compared to group B, result of group C, D1, D2, E is significantly higher (P<0.01).
3.Influences to blood glucose: 4w after pattern achieved, result of group B is significantly higher than group A (P<0.01). Compared to group B, result of group C, D1, D2, E is significantly lower (P<0.01).
4.Influences to glycosylated hemoglobin: Result of group B is significantly higher than group A, interclass significant difference shown (P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E are all significantly lower (P<0.01).
5.influences to results of uria-albumin (24h): Result of group B is significantly higher than group A, interclass significant difference shown(P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E are all significantly lower (P<0.01).
6.Influences to Beta 2-Microglobulin in serum: Result of group B is significantly higher than group A, significant difference shown(P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E are all significantly lower (P<0.01).
7.Influence to nephric pathological change: Observed with light microscope, nephridial tissue of group A appears normal acinus renis, no cellular proliferation, tight mesangial region, open capillary lumen, RBC suffusion. In contrast, nephridial tissue of group B appears accretion between capsula glomeruli and loop of micrangium, cortical substance narrowed, vacuolus-like change in endepidermis of nephric tubule, protein-like mas in lumina, nephric tubule ruined and cellula epithelialis nucleus partly disappeared. Nephridial tissue of group C, D1, D2 and E are all observed better than group B and all the pathological changes got improved. We can see abatement in acinus renis partly accreted, cort narrowed, vacuolus-like change in endepidermis of nephric tubule and mesangial cellular proliferation.
8.Influences to serum ADPN: Result of group B is significantly lower than group A, significant difference shown(P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E show significantly upgrading tendency (P<0.01).
9.Influences to hs-CRP in serum: Result of group B is significantly higher than group A, significant difference shown(P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E show significantly descending tendency (P<0.01).
10.Influence to MCP-1 in nephridial tissue:
A. m-RNA content: Result of group B is significantly higher than group A, significant difference shown (P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E show significantly descending tendency (P<0.01). B. Protein expression of MCP-1:
Result of group B is significantly higher than group A, significant difference shown (P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E show significantly decreased (P<0.01)
11.Influence to TNF-α:
A. m-RNA content: Result of group B is significantly higher than group A, significant difference shown (P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E show significantly descending tendency (P<0.01)
B. Protein expression of TNF-α:
Result of group B is significantly higher than group A, significant difference shown (P<0.01). Compared to group B, results of group C, D1, D2, E show significantly decreased (P<0.01).
Conclusion:
1.Pescription of invigorate vital energy, detoxicating and activating collaterals (IDAP) can obviously regulate and amend the pharmacodynamics figure of DN rats, including general condition, weight, blood glucose, glycosylated hemoglobin, 24h-urina mALB,β2- microglobulin in serum and patho-change in nephridial tissue, meanwhile IDAP can control the BG and protect nephridial tissue.
2.Pescription of invigorate vital energy, detoxicating and activating collaterals (IDAP) can obviously regulate and amend the figure of drug action as ADPN, hs-CRP, MCP-1 and TNF-α. IDAP can control the inflammatory reaction during the occurrence and development of DN and its mechanism maybe take the way of regulating the above figures.
3.Decrease in ADPN expression, increase in hs-CRP content and increase in expression of MCP-1 and TNF-αcan be checked in the DN rat, which indicates that the mechanism in the occurrence and development of DN in early period maybe related to the abnormal change of the above figures.
引文
[1]彭春玲,洪郁芝.脂联素与2型糖尿病肾病的研究进展[J].浙江临床医学.2010,12(5):533-535。
[2]宋皆金.2型糖尿病肾病患者血清脂联素水平与红细胞膜ATP酶活性的关系[J].放射免疫学杂志.2008,21(6):531-533。
[3]龚琴,周成林.2型糖尿病肾病患者血清IL一1 8、脂联素、胱抑素C水平及其临床意义的研究[J].中国民族民间医药.2009,(24):56-60。
[4]Yenicesu M , Yilmaz MI ,Caglar K, et al. Adiponectin level isreduced and inversely correlated with the degree of proteinuria in type 2 diabetic patients. Clin Nephrol ,2005 ,64(1) :12-19。
[5]杨一芬,卿之驹,黄干.2型糖尿病肾病患者血清瘦素和脂联素检测的研究[J].实用预防医学.2007,14(5):1415-1417。
[6]李桂苓,张师梅,王倩.2型糖尿病肾病患者血清同型半胱氨酸和脂联素检测的临床意义[J].天津医科大学学报.2010,16(2):339-341。
[7]程晨,崔明亮,赵玉娟等.脂联素、高敏C一反应蛋白与2型糖尿病肾病关系的探讨[J].中国老年保健医学杂志.2009,7(2):5-7。
[8]傅莉萍,洪郁芝,彭春玲.脂联素在2型糖尿病肾病患者中的变化[J].中国中西医结合肾病杂志.2010,11(6):496-498。
[9]Koshimura J ,Fujita H ,Narita T ,et al. Urinary adiponectin excretion is increased in patients with overt diabetic nephropathy.Biochem Biophys Res Commun ,2004 ,316(1) :165-169。
[10]蔡珂丹,闫蕾,孙子林等.2型糖尿病肾病患者血清脂联素水平的变化[J].肾脏病与透析肾移植杂志.2009,18(1):39-43。
[11]肖正大,韩改玲,李静等. 2型糖尿病肾病患者血清脂联素水平分析[J].山东大学学报(医学版),2006,44(1) : 69-72。
[12]陈文钰,徐向进.单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病的研究进展[J].福建医药杂志.2010,32(2):57-59。
[13]洪秀芳,叶真.单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病[J].浙江中西医结合杂志.2010,20(8):514-516。
[14]Kiyici S,Erturk E,Budak F,et al.Serum monocyte che moattractant prote in-1 and monocyte adhesion molecules in type 1 diabetic patients with nephropa thy.A rch Med Res:2006, 37(8): 998-1003。
[15] Viedt C,Dechend R, Fei J,et al.MCP-1 induces in flammatory activation of human tubular epithelial cells involvement of the transcription factors.nuclear factor-kap-paB and activating protein-1.J Am Soc Nephrol:2002,13(6):1534-1547。
[16]肖曼,高林琳.螺内酯对2型糖尿病肾病患者单核细胞趋化蛋白一1和Ⅳ型胶原的影响[J].中国医师进修杂志.2008,31(2):20-22。
[17]任晓妹,孙子林,杨涛等.伊贝沙坦降低2型糖尿病肾病患者血清单核细胞趋化蛋白-1水平[J].东南大学学报(医学版).2007,26(2):83-86。
[18]朴春丽,杨叔禹,仝小林.解毒通络保肾法抑制糖尿病肾病炎症发病机制的研究[J].实用中西医结合临床杂志.2009,9(3):1-5。
[19]陈应强,曾家顺,李龙.黄芪对糖尿病大鼠肾组织NF—κB和MCP一1表达的影响[J].贵州医药.2009,33(2):102-105。
[20]李新胜,张金城,钱洪霞.胰岛素治疗对2型糖尿病肾病血清C反应蛋白水平的影响[J].中国中西医结合肾病杂志.2005,6(9):539-540。
[21]虎子颖,赵建伟.罗格列酮对早期2型糖尿病肾病患者CRP、PAI-1的影响[J].中原医刊.2007,34(20):27-28。
[22]马力,胡婕.自拟糖肾方配合西药治疗糖尿病肾病3 6例临床观察[J].北京中医.2005,24(5):263-265。
[23]张红梅,毛春谱,李小毅等.益气养阴、补脾益肾法对糖尿病肾病患者血清hs—CRP、尿UAER等指标的影响[J].江苏中医药.2009,41(12):24-25。
[24]Bertani T,Abbate M,Zoja C,et a1.Tumor necrosis factor induced glomernlar damage in the rabbit. Am J Pathol,1989,134(2):419-430。
[25]韩婷,井源,董砚虎.肿瘤坏死因子-α与糖尿病肾病[J].国际内科学杂志.2009,36(7):392-394。
[26]McCarthy E,Sharma R,Sharma M,et a1.TNF-a increases albumin permeability of isolated rat glomernli through the generation of superoxide.J Am Soc Nephrol,1998,9(3):433-438。
[27]孙致连,叶山东.炎症因子与糖尿病肾病关系的研究进展[J].国际病理科学与临床杂志.2008,28(4):366-369。
[28]段顺元,蒋汉茂.生脉注射液对2型糖尿病肾病患者血液TNF-α、IL一6的影响[J].中医原刊.2004,31(14):2-4。
[29]唐成玉,朱章志,陈利平.温肾健脾、祛毒活血法对早期糖尿病肾病及IL-6、TNF-α的影响[J].中药新药与临床药理.2009,20(2):175-177。
[30]孙新宇,武西芳,南征.肾络与糖尿病肾病机理探微[J].国医论坛,2007,22(3):15-16
[31]许华.毒损肾络与糖尿病慢性微血管并发症相关性探讨[J].现代中西医结合杂志,2010,19(11):1364-1365
[32]于敏,张波,史耀勋等.南征教授“毒损肾络"理论学说探析及临床运用[J].中华中医药学刊,2010,28(2):243-246
[33]于敏,史耀勋,田谧等.南征教授从毒损肾络立论治疗糖尿病肾病经验[J].中国中医急症,2009,18(1):74-75
[34]林兰,郭力.糖微康对糖尿病肾病患者血液流变学的影响[J].2003,4(4)∶215。
[35]钱荣立.加强对糖尿病慢性并发症的防治研究[J].中国糖尿病杂志,2003,11(4):231。
[36]封翠云.糖尿病肾病的中医病名探讨[J].国医论坛.2007,22(2): 22。
[37]周仲瑛.中医内科学[M].北京:中国中医药出版社.2005:427-433。
[38]陈艳,张燕,刘东玉.加味参芪地黄汤对糖尿病肾病尿蛋白含量的影响[J].中医杂志.1995,36(6):347.
[39]李青,张国娟,冯蓉等.糖安康治疗糖尿病肾病临床研究[J].成都中医药大学学报.1999,22(1):23-25。
[40]黄翠玲,李才,邓义斌等.济肾汤对糖尿病大鼠肾脏病变的影响[J].中国中西医结合杂志.1997,17(1):676。
[41]程汉桥,赵兴兰.中西医结合治疗早期糖尿病肾病13例[J].中国中西医结合杂志.1996,16(6):364-365。
[42]孙万森,吴喜利,乔成林等.通络胶囊治疗糖尿病肾病慢性肾衰的临床研究[J].中国中西医结合杂志.2004,24(8):704-706。
[43]刘宏伟.益气养阴活血清利法治疗晚期糖尿病肾病[J].辽宁中医杂志.1993,20(10):18-20。
[44]王洪忠.益气活血、健脾利湿治疗糖尿病肾病26例[J].北京中医学院学报.1992,15(1):59-60。
[45]赵华云,刘学耀.补阳还五汤对糖尿病微量蛋白尿的影响[J].湖北中医.2O01,23(7):17。
[46]刘冰.益气养阴调中法治疗糖尿病肾病24例[J].中医药研究.1992,8(4):37-38。
[47]侯卫国,朱燕俐.自拟活血益肾汤治疗糖尿病肾病35例[J].上海中医药杂志.1996,(4):18-19。
[48]屠伯言.糖尿病肾病用补肾活血法治疗的临床和实验研究[J].上海中医药杂志.1991,25(1):1-4。
[49]刘其刚.中西医结合治疗糖尿病肾病的临床研究[J].上海中医药杂志.2005,39(2):29-30。
[50]张国山,陆连莽.益肾活血方治疗糖尿病肾病100例临床研究[J].天津中医.2000,17(3):17-18。
[51]魏连波,陈旭红,马志刚等.氯沙坦配合加味六味地黄丸对老年糖尿病肾病早期尿微量白蛋白排泄率的影响[J].中国中西医结合肾病杂志.2000,1(2):85-87。
[52]苗桂珍.活血化痰方治疗2型糖尿病26例[J].中国中西医结合杂志.2001,21(2):144-145。
[53]万云莉.血府逐瘀胶囊配合西药治疗糖尿病肾病3O例临床疗效观察[J].北京中医.2005,24(1):65。
[54]刘洪陆,郭惠芳.从痰瘀论治临床期糖尿病肾病[J].国医论坛.1999,14(3):22-23.
[55]王长闵,高军,梁桂芳.中西医结合治疗糖尿病肾病肾功能不全[J].中医药研究.2000,16(4):8-9。
[56]盛笑梅.中西医结合治疗糖尿病肾病56例[J].北京中医药大学学报.1999,22(4):65-66。
[57]张琪.消渴益肾汤治疗糖尿病肾病疗效观察[J].河北中医.1994,16(5):8。
[58]李琪,高阳,刘启庭.糖肾康治疗2型糖尿病肾病的临床研究[J].辽宁中医杂志.1998,25(3):114-116。
[59]周兴磊,冯志刚,张本祥.冬虫夏草治疗糖尿病肾病90例临床分析[J].临床医学.2000,20(1):54-55。
[60]王红纲,赵振霄,刘丽秋等.大黄对糖尿病肾病治疗作用的临床研究[J].北京中医药大学学报.1996,19(5):36-37。
[61]罗勇.黄芪联合前列腺素E治疗糖尿病肾病疗效观察[J].中国中西医结合肾病杂志.2004,5(8):485。
[62]占永力.中药三七注射液对显性糖尿病肾病并高凝状态的影响[J].中国中西医结合肾病杂志.2002,3(1):23。
[63]孙建功.雷公藤总甙治疗糖尿病肾病70例临床观察[J].中医研究.1996,9(5):26-27
[64]唐诗伟,朱红倩,晏永惠等.川芎嗪治疗2型糖尿病肾病38例观察[J].实用中医药杂志.1999,15(8):3-4。
[65]张浩军,赵静波,李平.糖尿病肾病动物模型研究进展[J].中国药理学通报.2008,24(7):847-848。
[66]李敬林,乔文军,郑曙琴,等.两种糖尿病肾病大鼠模型的比较[J].辽宁中医杂志.2003,30(11):877-878。
[67]郑学民,乔文军,李敬林等.糖尿病大鼠早期肾病模型的实验研究[J] .中国实验动物学杂志,2002,12(5):288-291。
[68]于敏,张波,史耀勋等.南征教授“毒损肾络”理论学说探析及临床运用[J].中华中医药学刊,2010,28(2):243-246。
[69]李友元,邓洪波,张萍等.黄精多糖对糖尿病模型小鼠糖代谢的影响[J].中国临床康复.2005,9(27):90-91。
[70]王红玲,张渝侯,洪艳等.黄精对哮喘儿红细胞免疫功能影响的体外实验血外究[J].中国当代儿科杂志.2002,4(3):233-235。
[71]吴燊荣，李友元，肖洒．黄精多糖调脂作用的实验研究[J].中华老年心脑血管病杂志.2002,4(6):434-434。
[72]江清林,李延君,辛华等.黄芪甲苷对胰岛素C肽分泌作用研究[J].黑龙江医药科学.1999,22(3):24-27。
[73]祁中华,林善,黄宇峰.黄芪改善糖尿病早期肾血流动力学异常的研究[J].中国糖尿病杂志.1999,7(3):147-148。
[74]汪德清,沈文梅,田亚平等.黄芪总黄酮对羟自由基作用所致的哺乳动物细胞损伤的保护作用[J].中国医药杂志.1995,20(4):240。
[75]赵洪伍.党参黄芪注射液对冠状动脉作用的研究[J].中国医院药学杂志.1989,9(6):162。
[76]将斗发,殷昌好,俞能高等.黄芪总皂甙对老年大鼠血流变性的影响[J].基层中药杂志.2002,16(5):15-16。
[77]施萍,李正.黄芪在糖尿病肾病治疗中降低尿微量白蛋白的作用[J].现代临床医学.2005,31(2):89-90。
[78]熊维建,杨敬,钟锦.黄芪治疗糖尿病肾病的研究近况[J].中国中医急症.2004,13(7):460。
[79]张茜,肖正华,王彤等.黄连素降糖调脂机制的研究[J].中国实验动物学报.2011,19(1):29-33。
[80]吕秋菊.黄连素对胰岛素细胞分泌胰岛素的影响[J].黑龙江中医药.2011,(1):47。
[81]沈忠明,殷建伟,袁海波.虎杖鞣质的降血糖作用研究[J].天然产物研究与开发.2004,16(3):220-221。
[82]董柯.中华医学会第四次全国肾脏病学术会议论文摘要汇报[C]. 1994:131。
[83]谢艳华,王四旺,崔翰明.水蛭对正常及血瘀模型大鼠血液流变的影响[J] .第四军医大学学报.1996, 17(2):52。
[84]殴阳涓,姜傥.肾脏的损伤性诊断[J].中华检验医学杂志.2005,28(8):877-879。
[85]马丽,张伟平,涂斌.血清胱抑素C和血尿β2-微球蛋白对糖尿病早期肾损害的诊断价值[J].实用医药杂志.2011,28(2):116-117。
[86]彭春玲,洪郁芝.脂联素与2型糖尿病肾病的研究进展[J].浙江临床医学.2010,12(5):533-535。
[87]马力,胡婕.自拟糖肾方配合西药治疗糖尿病肾病3 6例临床观察[J].北京中医.2005,24(5):263-265。
[88]张红梅,毛春谱,李小毅,等.益气养阴、补脾益肾法对糖尿病肾病患者血清hs—CRP、尿UAER等指标的影响[J].江苏中医药.2009,41(12):24-25。
[89]陈文钰,徐向进.单核细胞趋化蛋白-1与糖尿病肾病的研究进展[J].福建医药杂志.2010,32(2):57-59。
[90]Kiyici S,Erturk E,Budak F,et al.Serum monocyte che moattractant protein-1 and monocyte adhesion molecules in type 1 diabetic patients with nephropa thy[J].A rch Med Res:2006, 37(8): 998-1003。
[91]Viedt C,Dechend R, Fei J,et al.MCP-1 induces in flammatory activation of human tubular epithelial cells involvement of the transcription factors.nuclear factor-kap-paB and activating protein-1[J].J Am Soc Nephrol:2002,13(6):1534-1547。
[92]韩婷,井源,董砚虎.肿瘤坏死因子-α与糖尿病肾病[J].国际内科学杂志.2009,36(7):392-394。
[93]McCarthy E,Sharma R,Sharma M,et a1.TNF-a increases albumin permeability of isolated rat glomernli through the generation of superoxide[J].J Am Soc Nephrol,1998,9(3):433-438。
[94]孙致连,叶山东.炎症因子与糖尿病肾病关系的研究进展[J].国际病理科学与临床杂志.2008,28(4):366-369。
[95]孙冰,班博.早期糖尿病肾病研究现状[J].山东医药.2009,49(37):104-105。