摘要
中医中药是我国传统文化的宝贵遗产,复方中药烧伤涂膜是由中药黄芩及虎杖的提取液为原料,加入其他辅料,以壳聚糖为成膜材料制成均匀半透明、黏度适中的涂膜剂。黄芩为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi.的干燥根,药理学研究表明黄芩及其有效成分黄芩苷不但具有抗炎、抗菌、解热、镇静、利尿、利胆、保肝以及调节免疫等作用,而且具有良好的抗真菌作用。虎杖为蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的干燥根茎及根,其有效成分具有活血化淤、止痛、收敛的功效;用于烧伤有明显的止痛消炎、收敛、防腐、促进上皮生长、减少烧伤后疤痕增生的特点。
复方中药烧伤涂膜采用甲壳素的衍生物壳聚糖为成膜材料,甲壳素广泛存在于甲壳纲动物如蟹、虾、昆虫及真菌中,是一种维持和保护甲壳动物和微生物躯体的线性氨基多糖,是自然界产量仅次于纤维素的第二大类高分子化合物。壳聚糖是甲壳素脱乙酰化的产物,它具有良好的吸附性、成膜性、通透性、成纤性、吸湿性和保湿性,并具有良好的生物相容性,不与体液、组织和细胞产生异物反应,具有生物可降解性,在生物体内可被溶菌酶降解为对人体无毒的N—乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖。不溶血、无刺激性、无热源性、无致突变性,因而是一种安全可靠的天然生物活性多糖,可广泛应用于医药领域。
1.中药提取液抑菌作用研究
黄芩和虎杖两种中药材分别考察95%乙醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、丙酮和蒸馏水五种提取液对五种菌的抑菌作用,五种菌分别为代表革兰氏阳性菌的金黄色葡萄球菌,代表革兰氏阴性菌的大肠埃希菌,代表药品中常见污染菌的枯草芽孢杆菌,代表酵母菌的白色念珠菌,代表霉菌的黑曲霉。首先应用滤纸片法对上述提取液抑菌效力进行测定,经过比较选择95%乙醇为中药材最佳提取溶剂。95%乙醇比三氯甲烷等毒性小,经95%乙醇提取后的溶液制成的制剂与蒸馏水提取液相比,不会有沉淀或混浊等现象,适合于制剂生产。其次应用固体稀释法测定各提取液对五种菌的最小抑菌浓度(MIC),结果表明:在相同的作用时间内,同一种提取液的浓度越高,其抑菌作用越大。对照有大量菌生长,表明各提取液的抑菌效力来自于本身的活性成分。经MIC确定黄芩提取液的最小抑菌浓度为20%,虎杖提取液的最小抑菌浓度为25%。
2.复方中药烧伤涂膜的制备、质量考察及稳定性研究
通过正交试验考察浸泡时间、提取时间、提取液浓度三因素对中药有效成分得率的影响,结果表明中药的最优提取条件是应用95%的乙醇提取2小时,为使其有效成分提取完全,实际生产中采用95%乙醇提取2次,每次2小时。
制剂的质量考察首先是黄芩和虎杖的鉴别,样品经提取制得的供试品溶液,与对照品溶液、对照药材溶液及阴性对照溶液,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上,以适宜的展开剂展开,取出晾干后观察,供试品与对照药材溶液及对照品溶液色谱在相应位置上有相同颜色的斑点,而阴性对照溶液则无,证明中药成分的存在。其次应用反相高效液相梯度洗脱法测定复方中药烧伤涂膜中黄芩苷和大黄素的含量,试验采用Lichrospher C18(150mm×4.6mm)柱,以甲醇-0.2%磷酸为流动相,梯度洗脱,检测波长λ=280nm,流速为1.0ml/min。结果表明:黄芩苷在0.712～3.00 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.989692,平均加样回收率为97.74%,RSD为2.37%(n=9)。大黄素在0.212～0.895 mg/mL范围内线性关系良好,r=0.992528,平均加样回收率为97.67%,RSD为1.92%(n=9)。结论:RP-HPLC梯度洗脱法可用于本制剂质量控制,操作简便,结果可靠,重现性好。
将制剂按上市包装,通过加速试验和长期试验考察制剂的稳定性,结果在考察时间内制剂的外观性状、鉴别、含量指标基本不变。为确保安全用药,暂定有效期为1年。
3.复方中药烧伤涂膜体外经皮渗透性的研究
透皮吸收实验中最理想的方法是对人皮进行实验研究,因为它阐述透皮吸收机制和求得的参数最接近临床实际,但是人皮难于得到,参考了相关文献本试验采用Wistar大鼠作为实验动物。
文献报道过的透皮吸收促进剂种类繁多,考虑推广到大生产,本文选择了符合药用标准并且使用最为广泛的氮酮、薄荷脑和吐温-80组合比较累积渗透释放量,考察对样品经离体鼠皮的渗透促进作用。结果表明氮酮与薄荷脑合用时对复方中药涂膜透皮促渗作用最强,提示二者具较强的协同作用;氮酮、薄荷脑与吐温80混合使用时促渗效果比氮酮加薄荷脑反有所下降,即无协同作用。我们最终选择氮酮和薄荷脑联用作为复方中药涂膜的渗透促进剂,且薄荷脑有芳香气味,处方中加之味辛、凉,尤其适用于外用药物。
4.复方中药烧伤涂膜皮肤刺激性试验
选择家兔为试验动物,考察本制剂对完整皮肤和对破损皮肤的刺激性,经皮肤刺激性反应的评分标准及刺激性强度评分标准评价,并经HE染色后,显微镜下观察皮肤有无炎性细胞浸润、出血、坏死等情况。结果表明复方中药烧伤涂膜多次给药对家兔完整和破损皮肤均无刺激性。显微镜下观察显示:完整皮肤和破损皮肤给药后表皮、真皮内均未见充血、出血、坏死及炎性细胞。
复方中药烧伤涂膜优点在于(1)能覆盖并封闭皮肤缺损创面,与创面有良好的亲合性;(2)与受体组织相容性好,无抗原性;(3)保持、促进肉芽和上皮组织正常生长,促进愈合;(4)抵御细菌入侵,能防止创面感染及体液流失;(5)适合应用于不规则伤口创面;(6)不会促进瘢痕生长;(7)容易转移和运输,适用于战时烧伤创面的救治。
引文
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