钝顶螺旋藻基因组质粒文库的构建及其在获得功能基因上的应用

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• 出版年：2008
• 作者：田李；张晓雯；秦松
• 单位1：中国科学院海洋研究所
• 单位2：中国科学院研究生院
• 出生年：1984
• 学历：硕士研究生
• 语种：中文
• 作者关键词：螺旋藻（Spirulina）；质粒文库；STK；克隆
• 起始页：55
• 总页数：6
• 经费资助：国家自然科学基金项目(30671065)；中国科学院知识创新工程项目(KSCX2-YW-G-002，KZCX2-YW-209)
• 刊名：海洋科学
• 是否内版：否
• 刊频：月刊
• 创刊时间：1977
• 主管单位：中国科学院
• 主办单位：中国科学院海洋研究所
• 主编：侯一筠
• 地址：青岛南海路7号
• 邮编：266071
• 电子信箱：MSJ@ms.qdio.ac.cn
• 网址：Http：//msj.qdio.ac.cn
• 卷：32
• 期：6
• 期刊索取号：P226.06 449-22

摘要

利用改良的SDS法提取钝顶螺旋藻基因组DNA，经Sau3AI酶切，回收1-2kb大小的片段，与Bam HI（Sau3AI的同尾酶）酶切并去磷酸化后的pBR322质粒载体相连接，转入大肠杆菌（Escherichia coli）Topl0细胞，构建了螺旋藻基因组质粒文库。根据pBR322载体上多克隆位点两侧序列设计锚定引物，根据丝状蓝藻丝氨酸／苏氨酸激酶(STK)保守序列设计简并引物，以螺旋藻质粒文库为模板，“巢式”扩增出了STK基因部分序列。螺旋藻基因组质粒文库的构建为功能基因研究提供了极大方便。