海洋嗜杀酵母菌株YF07b嗜杀因子的纯化与基因克隆
- 作者：王祥红池振明岳礼溪李静
- 会议时间：2007-08-01
- 关键词：毕赤酵母 ; 嗜杀因子 ; 蛋白纯化 ; 基因克隆
- 作者单位：中国海洋大学,海洋生命学院,山东,青岛,266003
- 母体文献：2008全国博士生学术论坛——海洋、水产领域论文集
- 会议名称：2008全国博士生学术论坛——海洋、水产领域
- 会议地点：青岛
- 主办单位：国务院学位办
- 语种：chi
- 分类号：TS2;TQ9
摘要
海洋嗜杀酵母YF07b的嗜杀因子经Sephadex G75凝胶过滤和DEAE-Sephorose Fast Flow阴离子交换得到纯化,经SDS-PAGE检测得到分子量为47kDa的单一条带.纯化后的嗜杀因子有β-1,3-葡聚糖酶活性,并且纯化后的嗜杀因子仍具有抑菌活性.根据陆地嗜杀酵母Pichia anomala strain K的嗜杀因子(β-1,3-葡聚糖酶)的基因及相关序列设计引物克隆菌株YF07b的嗜杀因子基因序列,克隆得的基因序列为1589bp,GenBank登录号为EF029071.与其它相关蛋白序列对比分析,确定此嗜杀因子基因的编码区(ORF框)为209 bp到1492bp.克隆基因的推导蛋白为427个氨基酸,推导蛋白与其他酵母菌相关蛋白的氨基酸序列的系统发育分析比对,与异常毕赤酵母(Pichia anomala Strain K)的亲缘关系最近.信号肽分析结果表明,推导蛋白的前17个氨基酸为信号肽.