产紫青霉G59的新霉素抗性突变株4-30的新产抗肿瘤活性产物

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• 作者：易乐李长伟吴长景崔承彬
• 会议时间：2013-10-18
• 关键词：产紫青霉 ; 新霉素抗性突变株 ; 抗肿瘤活性 ; 次级代谢产物
• 作者单位：军事医学科学院 毒物药物研究所,北京 100850
• 母体文献：中国药学会海洋药物专业委员会第十一届海洋药物学术年会论文集
• 会议名称：中国药学会海洋药物专业委员会第十一届海洋药物学术年会
• 会议地点：海口
• 主办单位：中国药学会
• 语种：chi
• 分类号：TQ9;S15

摘要

在微生物次级代谢产物的研究中,通常通过直接筛选得到活性野生菌株而对其进行活性次级代谢产物研究。然而绝大多数的野生菌株并不具有相关生物活性而被闲置,从而造成了严重的资源浪费.在前期研究中,本课题组成功的将无抗肿瘤活性的产紫青霉G59经化学诱变转化为具有抗肿瘤活性的突变株,并从部分活性突变株中分离得到了新产抗肿瘤活性化合物.同时,还对产紫青霉G59进行了DMSO介导的新霉素抗性筛选,得到了数十株抗肿瘤活性突变株。其中,突变株菌4-30是在50% DMSO介导的6.7mg/mL新霉素条件下筛选得到的,其发酵产物的乙酸乙酯萃取物对K562细胞呈一定的抑制作用,100pg/ml该样品对K562细胞的抑制率为48.8%.该菌经液体发酵12天,共得到发酵液20L,并经提取和萃取等操作,得到乙酸乙酯萃取物13.07g.综合利用各种色谱技术,对其发酵产物进行分离纯化,共得到了6个具有抗肿瘤活性的化合物并分别鉴定为过氧化麦角甾醇(1),22E-7α-methoxy 5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-lien-3β-o1(2),threo-23-O-methylneocyclocitrinol(3)、citrinin(4),penicitrinone A(5)和curvularin(6).MTT法抗肿瘤活性测试结果表明,化合物2~6在100μg/ml浓度下对人肿瘤K562.HeLa,HL-60和BGC-823细胞均显示出一定的抑制活性.HPLC指纹图谱分析结果表明,化合物2~6分别在突变株4-30的粗浸膏指纹图谱的相应位1找到了化合物2~6的吸收峰,而在原始菌G59的粗浸膏指纹图谱的相应位置没有化合物2~6的色谱峰出现,上述结果表明化合物2~6均为突变株新产次级代谢产物。上述结果也进一步说明,DMSO介导的新霉素抗性筛选技术是一种简便有效的获取活性突变株新的技术方法。