百合知母汤对癫痫模型幼鼠行为学和海马神经发生及AMPK/mTOR水平的影响
|
摘要
目的探讨百合知母汤水提物对戊四氮(PTZ)诱导癫痫幼鼠行为学和海马齿状回神经发生及神经元AMPK、mTOR水平的影响。方法实验动物分为5组:正常组,模型组和百合知母汤水提物低、中、高剂量组。PTZ诱导建立癫痫模型幼鼠,分别尾静脉注射40、80和120 mg/ml百合知母汤水提物,模型组注射同等剂量生理盐水。正常组幼鼠注射同等剂量生理盐水,测定各组幼鼠行为学、海马齿状回神经发生和海马神经元AMPK、mTOR mRNA及蛋白水平。结果百合知母汤水提物低、中和高剂量组幼鼠发生II级以上惊厥次数、潜伏期时间和游泳距离明显低于模型组幼鼠(P<0.05)。随百合知母汤水提物剂量的增加,癫痫幼鼠发生II级以上惊厥次数逐渐下降(P<0.05),潜伏期时间和游泳距离逐渐上升(P<0.05)。免疫组化结果显示,模型组幼鼠海马BrdU免疫阳性细胞呈现大片丛集性分布,百合知母汤水提物剂量组幼鼠海马BrdU免疫阳性细胞逐渐减少。百合知母汤水提物高剂量组幼鼠AMPK mRNA及蛋白和p-AMPK表达低于模型组幼鼠(P<0.05),而mTOR mRNA及蛋白和p-mTOR表达高于正常组幼鼠(P<0.05),且存在一定的剂量-效应关系。结论百合知母汤能够降低癫痫幼鼠海马神经元AMPK表达,提升海马神经元mTOR表达,改善癫痫幼鼠行为学改变及症状。
引文
[1] Fong CY, Kong AN, Poh BK, et al. Vitamin D deficiency and its risk factors in Malaysian children with epilepsy[J]. Epilepsia, 2016, 57(8): 1271-1279.
[2] 秦炯. 导言:中国儿童癫痫诊治现状与专家共识[J]. 医学与哲学(B), 2010,31(8): 5.
[3] Hirsch E, Schmitz B, Carreňo M. Epilepsy, antiepileptic drugs (AEDs) and cognition[J]. Acta Neurol Scand Suppl, 2003, 180: 23-32.
[4] Lunn J, Lewis C, Sherlock C. Impaired performance on advanced theory of mind tasks in children with epilepsy is related to poor communication and increased attention problems[J]. Epi Behavi, 2015, 43(11): 109-116.
[5] 方前波, 秦昆明, 潘扬,等. 百合知母汤的化学成分研究(Ⅰ)[J]. 中草药, 2010, 41(4): 517-520.
[6] 袁丽, 刘奇, 范喆, 等. 百合知母汤对抑郁症大鼠海马组织钙调蛋白信号通路中关键分子水平的影响及其抗抑郁机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(4):704-710.
[7] 陈琅, 陈巧彬, 方琼, 等. 戊四氮致痫幼鼠不同脑区脑损伤研究[J]. 福建医科大学学报, 2014,56(3):147-150.
[8] 刘楠楠. 基于光纤光度检测法的癫痫样小鼠海马、内嗅皮层钙信号的研究[D]. 天津:天津医科大学, 2017.
[9] Vezzani A, Fujinami RS, White HS, et al. Infections, inflammation and epilepsy[J]. Acta Neuro, 2016, 131(2): 211-234.
[10] Lossin C, Wang DW, Rhodes TH, et al. Molecular basis of an inherited epilepsy[J]. Neuron, 2002, 34(6): 877-884.
[11] Sgobio C, Ghiglieri V, Costa C, et al. Hippocampal synaptic plasticity, memory, and epilepsy: effects of long-term valproic acid treatment[J]. Bio Psychia, 2010, 67(6): 567-574.
[12] Reeta Kh, Prabhakar P, Gupta YK. Anticonvulsant activity of the antidepressant drug, tianeptine, against pentylenetetrazole-induced seizures mitigates cognitive impairment in rats[J]. Behavi Pharma, 2016, 27(7):623-632.
[13] 张颖, 陈朝, 陈宇霞, 等. 知母及含知母复方的抗抑郁研究现状[J]. 环球中医药, 2016, 9(3):377-380.
[14] 孟如. 金匮要略选读[M]. 上海:上海科学技术出版社, 1997.
[15] 张丽萍, 贺娟, 翟双庆. 草果知母汤在阻断PTZ点燃癫痫模型中对大鼠脑内c-fos、c-jun mRNA表达的影响[J]. 中国中西医结合杂志, 2000, 20(8): 52-54.
[16] 张丽萍, 夏猛. 草果知母汤对癫痫大鼠海马神经元凋亡及基因表达的影响[J]. 医学研究杂志, 2009, 38(2):28-30.
[17] 张丽萍, 方卓, 刘泰,等. 草果知母汤对癫痫大鼠海马神经元超微结构的影响[J]. 中国组织工程研究, 2006, 10(23):10-12.
[18] 刘奇, 袁丽, 李德顺, 等. 百合知母汤对抑郁症大鼠行为及单胺递质的影响[J]. 中华中医药学刊, 2016,35(7):1729-1732.
[19] 井蓉琳, 张喜莲. 马融教授运用百合麦冬汤治疗儿童难治性癫痫验案举隅[J]. 四川中医, 2015,34(2):155-156.
[20] 杨萍. 5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT对癫痫合并抑郁神经可塑性影响的研究[D]. 太原:山西医科大学, 2011.
[21] 张永华, 胡霖霖. 百合地黄汤对创伤后应激障碍大鼠海马5-HT水平的影响[J]. 中华中医药学刊, 2013,32(12):2672-2674.
[22] 高菲. 癫痫持续状态后海马齿状回正常迁移成熟新生颗粒细胞的研究[D]. 济南:山东大学, 2016.
[23] 袁博, 朱坤, 胡明,等. Pilocarpine诱导的小鼠癫痫持续状态导致齿状回未成熟新生神经元形成异常整合[J]. 西安交通大学学报(医学版), 2017, 38(6):785-789.
[24] Liu H, Zhang Y, Wu H, et al. Beneficial role of erythrocyte adenosine A2B receptor-mediated AMP-activated protein kinase activation in high-altitude hypoxia [J]. Circulation, 2016, 134(5): 405-421.
[25] Li Y, Su J, Sun W, et al. AMP-activated protein kinase stimulates osteoblast differentiation and mineralization through autophagy induction[J]. Inter J Mol Med, 2018, 41(5): 2535-2544.
[26] 李园园, 王明山, 时飞, 等. 电针预处理对小鼠脑缺血再灌注时海马神经元AMPK活性的影响[J]. 中华麻醉学杂志, 2015, 35(1): 44-47.
[27] Powell JD, Pollizzi KN, Heikamp EB, et al. Regulation of immune responses by mTOR[J]. Annual R Immu, 2012, 30(1): 39-68.
[28] 潘玉纯, 吴维青, 谢建生, 等. 结节性硬化症的两个TSC2基因新发框移突变[J]. 中国当代儿科杂志, 2017, 19(3): 308-312.
[2] 秦炯. 导言:中国儿童癫痫诊治现状与专家共识[J]. 医学与哲学(B), 2010,31(8): 5.
[3] Hirsch E, Schmitz B, Carreňo M. Epilepsy, antiepileptic drugs (AEDs) and cognition[J]. Acta Neurol Scand Suppl, 2003, 180: 23-32.
[4] Lunn J, Lewis C, Sherlock C. Impaired performance on advanced theory of mind tasks in children with epilepsy is related to poor communication and increased attention problems[J]. Epi Behavi, 2015, 43(11): 109-116.
[5] 方前波, 秦昆明, 潘扬,等. 百合知母汤的化学成分研究(Ⅰ)[J]. 中草药, 2010, 41(4): 517-520.
[6] 袁丽, 刘奇, 范喆, 等. 百合知母汤对抑郁症大鼠海马组织钙调蛋白信号通路中关键分子水平的影响及其抗抑郁机制[J]. 吉林大学学报(医学版), 2016, 42(4):704-710.
[7] 陈琅, 陈巧彬, 方琼, 等. 戊四氮致痫幼鼠不同脑区脑损伤研究[J]. 福建医科大学学报, 2014,56(3):147-150.
[8] 刘楠楠. 基于光纤光度检测法的癫痫样小鼠海马、内嗅皮层钙信号的研究[D]. 天津:天津医科大学, 2017.
[9] Vezzani A, Fujinami RS, White HS, et al. Infections, inflammation and epilepsy[J]. Acta Neuro, 2016, 131(2): 211-234.
[10] Lossin C, Wang DW, Rhodes TH, et al. Molecular basis of an inherited epilepsy[J]. Neuron, 2002, 34(6): 877-884.
[11] Sgobio C, Ghiglieri V, Costa C, et al. Hippocampal synaptic plasticity, memory, and epilepsy: effects of long-term valproic acid treatment[J]. Bio Psychia, 2010, 67(6): 567-574.
[12] Reeta Kh, Prabhakar P, Gupta YK. Anticonvulsant activity of the antidepressant drug, tianeptine, against pentylenetetrazole-induced seizures mitigates cognitive impairment in rats[J]. Behavi Pharma, 2016, 27(7):623-632.
[13] 张颖, 陈朝, 陈宇霞, 等. 知母及含知母复方的抗抑郁研究现状[J]. 环球中医药, 2016, 9(3):377-380.
[14] 孟如. 金匮要略选读[M]. 上海:上海科学技术出版社, 1997.
[15] 张丽萍, 贺娟, 翟双庆. 草果知母汤在阻断PTZ点燃癫痫模型中对大鼠脑内c-fos、c-jun mRNA表达的影响[J]. 中国中西医结合杂志, 2000, 20(8): 52-54.
[16] 张丽萍, 夏猛. 草果知母汤对癫痫大鼠海马神经元凋亡及基因表达的影响[J]. 医学研究杂志, 2009, 38(2):28-30.
[17] 张丽萍, 方卓, 刘泰,等. 草果知母汤对癫痫大鼠海马神经元超微结构的影响[J]. 中国组织工程研究, 2006, 10(23):10-12.
[18] 刘奇, 袁丽, 李德顺, 等. 百合知母汤对抑郁症大鼠行为及单胺递质的影响[J]. 中华中医药学刊, 2016,35(7):1729-1732.
[19] 井蓉琳, 张喜莲. 马融教授运用百合麦冬汤治疗儿童难治性癫痫验案举隅[J]. 四川中医, 2015,34(2):155-156.
[20] 杨萍. 5-HT1A受体激动剂8-OH-DPAT对癫痫合并抑郁神经可塑性影响的研究[D]. 太原:山西医科大学, 2011.
[21] 张永华, 胡霖霖. 百合地黄汤对创伤后应激障碍大鼠海马5-HT水平的影响[J]. 中华中医药学刊, 2013,32(12):2672-2674.
[22] 高菲. 癫痫持续状态后海马齿状回正常迁移成熟新生颗粒细胞的研究[D]. 济南:山东大学, 2016.
[23] 袁博, 朱坤, 胡明,等. Pilocarpine诱导的小鼠癫痫持续状态导致齿状回未成熟新生神经元形成异常整合[J]. 西安交通大学学报(医学版), 2017, 38(6):785-789.
[24] Liu H, Zhang Y, Wu H, et al. Beneficial role of erythrocyte adenosine A2B receptor-mediated AMP-activated protein kinase activation in high-altitude hypoxia [J]. Circulation, 2016, 134(5): 405-421.
[25] Li Y, Su J, Sun W, et al. AMP-activated protein kinase stimulates osteoblast differentiation and mineralization through autophagy induction[J]. Inter J Mol Med, 2018, 41(5): 2535-2544.
[26] 李园园, 王明山, 时飞, 等. 电针预处理对小鼠脑缺血再灌注时海马神经元AMPK活性的影响[J]. 中华麻醉学杂志, 2015, 35(1): 44-47.
[27] Powell JD, Pollizzi KN, Heikamp EB, et al. Regulation of immune responses by mTOR[J]. Annual R Immu, 2012, 30(1): 39-68.
[28] 潘玉纯, 吴维青, 谢建生, 等. 结节性硬化症的两个TSC2基因新发框移突变[J]. 中国当代儿科杂志, 2017, 19(3): 308-312.