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基于天然生物材料的唾液酸化糖肽富集新策略
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摘要
糖蛋白的唾液酸化是常见的蛋白翻译后修饰,在蛋白质折叠、蛋白质稳定性和蛋白质功能中发挥非常重要的作用~([1])。唾液酸通常位于糖链末端,参与许多生物学活动,如细胞-细胞相互作用、炎症、免疫应答和肿瘤代谢~([2])。然而,唾液酸化糖蛋白的全面唾液酸化分析仍存在挑战。本研究中,利用一种天然生物材料,制作成新型的富集微柱,并利用胎球蛋白作为标准糖蛋白,进行富集方法研究。与其它三种人造材料的富集方法相比,天然材料的富集效果(Fig.1D)明显最好,尤其是在高m/z区,可获得大量唾液酸化糖肽峰。如Fig.2所示,胎球蛋白胰蛋白酶酶解原液(Fig.2A)和穿透液(Fig.2B)的质谱图中无唾液酸化糖肽峰,而胎球蛋白先胰蛋白酶酶解后磷酸酶酶解(Fig.2E)的富集效果明显优于单胰蛋白酶(Fig.2C)酶解和先磷酸酶酶解后胰蛋白酶酶解富集(Fig.2D),表明不同酶解顺序和组合会影响富集效果。总的来说,该天然材料所制成的富集微柱可简便高效地富集唾液酸化糖肽,并且富集效果明显优于利用人造材料所进行的研究。
引文
[1]Moremen K W,Tiemeyer M,Nairn A V.Nat Rev Mol Cell Bio,2012,13(7):448-62.
    [2]Cohen M,Varki A.Omics,2010,14(4):455-64.

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