猪伪狂犬野毒GD-1406株的分离纯化及其对仔猪致病性研究
详细信息 查看官网全文
- 论文作者：李中圣 ; 伍建敏 ; 何永龙 ; 王凤求 ; 侯月娥 ; 王贵平
- 年：2016
- 作者机构：广东海大畜牧兽医研究院有限公司;
- 论文关键词：猪伪狂犬病毒 ; 纯化 ; 致病性
- 会议召开时间：2016-09-18
- 会议录名称：第六届中国兽药大会论文集
- 英文会议录名称：Proceedings of 2016 the 6th China Congress of Veterinary Medicine
- 语种：中文
- 分类号：S852.651
- 学会代码：ZGXJ
- 会议名称：第六届中国兽药大会
- 会议地点：中国四川成都
- 主办单位：中国兽医药品监察所、中国兽药协会
- 学会名称：中国畜牧兽医学会
- 页数：1
- 文件大小：74k
- 原文格式：O
- 会议级别：全国
摘要
本文针对多份从广东阳江某猪场采集的疑似猪伪狂犬(PRV)感染猪的病变组织进行病毒核酸分析,分别应用PRV gB,gE和TK基因引物进行聚合酶链式反应(PCR)分析,结果显示以上基因均为阳性,结合该猪场发病猪临床表现,确认为PRV野毒感染。将该PRV野毒感染脑组织进行研磨、冻融和过滤除菌,接种健康新西兰兔,实验兔在1-2天后出现明显神经症状,并迅速死亡。取濒死兔脑组织,再次经研磨、冻融和过滤除菌后接种VERO细胞,细胞在12小时内出现病变,对病变细胞进行冻融后再次接种,传代至第5代。利用"蚀斑法"对PCR检测仍为PRV阳性的病毒液进行纯化,经过三次"蚀斑法"纯化筛选后,共得到6株对VERO细胞具有不同感染特性的PRV病毒。选择一株细胞病变较强的毒株(PRV GD-1406)为研究对象进行活体致病性分析。应用等剂量PRV GD-1406病毒分别液肌肉注射和滴鼻接种8日龄仔猪,人工哺乳,连续观察,结果发现,肌肉注射组的仔猪2周内无明显病症;而滴鼻组仔猪出现发抖、扎堆,滴鼻1-3天体温持续升高至42℃,发病仔猪呼吸困难、犬坐、顶撞栏柱、呕吐、虚弱的症状,并且出现角弓反张、划水等典型的猪伪狂犬病毒感染症状。另外,将PRV母源抗体均为阳性(疫苗毒为Bartha-K61株)的仔猪用PRV GD-1406进行攻毒,仔猪均出现类似PRV病症,利用等剂量Bartha-K61株进行攻毒的对照组猪无症状,实验说明PRV Gd-1406血清型与BarthaK61株有显著差异。本实验从PRV阳性病变组织中分离、纯化出一株对VERO细胞具有较强致病性的PRV病毒(命名为:PRV GD-1406),人工感染实验表明,PRV GD-1406对易感动物具有较强的致病作用,较高的PRV母源抗体不能抵抗该病毒滴鼻感染,据此,我们认为PRV GD-1406株可作为PRV疫苗研究的候选毒株。
引文