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猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗(JS-2012-△gI/gE株)的制备及免疫效力评价
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摘要
猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的高死亡率的急性传染病。该病的防控与净化最有效的手段是接种基因缺失疫苗并配合血清学检测来完成。我国自上世纪使用伪狂犬病活疫苗Bartha k61株以来,猪伪狂犬病得到了很好的控制。但自2011年以来,由伪狂犬病毒变异株引起的猪伪狂犬病在我国爆发,造成母猪繁殖障碍和初生乳猪死亡,给我国养猪业造成了巨大的经济损失。研究表明,伪狂犬病毒变异株对仔猪的致病力明显强于经典伪狂犬病毒强毒株,且以Bartha k61株为代表的传统疫苗免疫的猪群已不能有效的抵抗伪狂犬病毒变异株的攻击。目前,猪伪狂犬病毒变异株已经在全国范围内流行,疫病防控形势严峻。因此急需研制针对猪伪狂犬病毒变异株的基因缺失疫苗来控制新发猪伪狂犬病的流行。本实验室以伪狂犬病毒变异株(JS-2012株)为母本,运用同源重组的方法成功构建了g E和g I双基因缺失的毒株(JS-2012-△g I/g E株),该毒株对仔猪不致病,且具有良好的免疫原性,是一株良好的疫苗候选毒株。同时缺失的g E基因能作为分子标记,用来区分野毒感染动物与疫苗接种动物,从而净化伪狂犬病毒。我们以该弱毒株为毒种开展了猪伪狂犬病基因缺失灭活疫苗的研究工作。即将猪伪狂犬病毒双基因缺失毒株(JS-2012-△g I/g E株)用0.15%的甲醛灭活后,与赛彼科公司MONTANIDE ISA 201VG佐剂进行乳化,制备成猪伪狂犬病灭活疫苗。为了确定灭活疫苗的免疫次数,评价灭活疫苗的安全性及免疫效力,我们进行了一系列的动物实验。实验结果表明:灭活疫苗免疫两次的试验猪血清中PRV g B抗体水平明显高于免疫一次组,而且,免疫两次组试验猪也获得了更好的保护效力。同时灭活疫苗对哺乳仔猪及妊娠母猪均非常安全,且试验仔猪经两次免疫灭活疫苗后能有效的抵抗伪狂犬病毒变异株(JS-2012株)及经典伪狂犬病毒强毒株(SC株)的攻击;妊娠母猪经两次免疫该灭活疫苗后,所生的仔猪在一定时间内也能有效的抵抗伪狂犬病毒变异株(JS-2012株)及经典伪狂犬病毒强毒株(SC株)的攻击。
引文

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