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稳定下调PH~+急性淋巴细胞白血病细胞VE-cadherin的表达可增加其化疗药物敏感性
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摘要
目的:探讨下调Sup-B15细胞VE-cadherin表达对白血病细胞化疗药物敏感性的影响,并初步探索其可能的作用机制。方法:稳定下调VE-cadherin表达的白血病细胞Sup-B15命名为Sup-B15/sh VEC,使用以下方法检测白血病细胞生物学行为的变化:(1)使用不同浓度的甲磺酸伊马替尼处理各实验组白血病细胞,CCK8法检测白血病细胞增殖率的改变;(2)使用20mmol/L终浓度的甲磺酸伊马替尼处理各株白血病细胞,AnnexinⅤ/7-AAD标记细胞,流式细胞术检测细胞凋亡;(3)流式细胞术检测白血病细胞CD34+CD38-细胞比例变化;(4)荧光定量PCR检测白血病细胞ALDH1的转录水平;(5)Western-Blot方法检测白血病细胞VE-cadherin、CD133、Bcr-abl、β-catenin表达水平。结果:稳定下调Sup-B15细胞VE-cadherin表达后,相同药物浓度压力下白血病细胞增殖率降低、凋亡率升高,CD34+CD38-细胞比例下降,CD133蛋白水平降低,ALDH1转录水平降低,Bcr-abl融合蛋白表达水平无明显变化,总β-catenin蛋白表达水平下降,细胞核β-catenin蛋白水平亦下降。结论:稳定下调Sup-B15细胞VE-cadherin蛋白的表达可使白血病细胞药物敏感性增高,该结果可能是通过降低β-catenin蛋白的稳定性,减少β-catenin蛋白的核转位实现的。
引文

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