三种镰刀菌毒素对猪肾细胞凋亡及N-乙酰半胱胺酸保护作用的研究

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• 论文作者：张薇 ; 李建平 ; 单安山
• 年：2016
• 作者机构：东北农业大学动物营养研究所;
• 论文关键词：脱氧雪腐镰刀菌烯醇 ; 玉米赤霉烯酮 ; 伏马菌素B_1 ; N-乙酰半胱氨酸 ; 猪肾细胞 ; 凋亡
• 会议召开时间：2016-10-21
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S858.28
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十二次动物营养学术研讨会
• 会议地点：中国湖北武汉
• 主办单位：中国畜牧兽医学会动物营养学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：1
• 文件大小：63k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)和伏马菌素B1(Fumonisin B1,FB_1)作为毒理学最重要的镰刀菌毒素不仅影响机体的消化吸收,而且诱导细胞脂质过氧化造成细胞衰亡。本试验以猪肾细胞PK15为对象,进行高低两个浓度DON、ZEN和FB_1及其联合染毒处理,探究细胞抗氧化及凋亡相关指标的变化,从而确定DON、ZEN和FB_1毒性及联合染毒的交互作用。用N-乙酰半胱胺酸(N-acetylcysteine,NAC)同时处理,探讨其对氧化损伤和凋亡的保护效果。用不同浓度DON(0.25、0.50、1.0、2.0、4.0、8.0μmol/L),ZEN(5、10、20、40、80、160μmol/L)和FB_1(2.5、5、10、20、40、80μmol/L)对PK15细胞处理6、12、24、48 h检测细胞存活率;在此基础上设计试验,以DON(0.25、1.0μmol/L)、ZEN(20、80μmol/L)、FB_1(10、40μmol/L)单独及联合处理细胞24 h,此外加入0.5 mmol/L NAC,检测单独及联合染毒对PK15细胞的损伤作用机制及NAC的保护效果。结果表明:1)随DON、ZEN、FB_1浓度的增加及处理时间的延长,细胞活性呈剂量依赖性和时间依赖性降低。联合处理间多存在累加作用,仅在较高浓度时ZEN与DON或FB_1两者间存在拮抗作用。2)DON、ZEN、FB_1均可以引起猪肾细胞内GR、SOD、CAT、MDA、ROS等抗氧化功能相关指标改变,当浓度较低时多数联合处理仅存在累加作用,而在高浓度联合处理中,对于GR、SOD、CAT活性多为累加作用,MDA中多为拮抗作用,ROS中多为协同作用。3)DON、ZEN、FB_1影响P53、Bax、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3和Bcl-2表达量,单一及联合染毒均通过线粒体依赖通道诱导细胞凋亡;凋亡率中低浓度时DON-FB_1间及三种毒素联合处理存在协同作用,高浓度时DON与ZEN或FB_1间存在拮抗作用而三种毒素联合处理存在协同作用。4)0.5 mmol/L NAC对霉菌毒素诱导的氧化损伤有保护作用,提高细胞内抗氧化酶活性和Bcl-2 mRNA表达量,降低MDA和ROS含量及P53、Bax、Cyto C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA的表达量,减少细胞凋亡,对细胞有保护作用。综上所述,DON、ZEN、FB_1及联合染毒可引起PK15细胞的氧化应激并引起细胞凋亡,不同浓度联合染毒在不同作用位点上的交互作用不同,添加NAC后能显著降低细胞的氧化损伤,提高细胞活力,减少细胞凋亡。

引文