营养限饲对妊娠期山羊胎盘发育及蛋白质表达谱的影响
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摘要
本试验旨在研究山羊妊娠后期采食量限制条件下山羊胎盘发育相关指标和蛋白质表达谱的变化,探寻母山羊日粮采食量限制导致胎盘生理功能异常的标志性分子和可能的药物靶标,进一步揭示胎羊宫内发育迟缓的日粮调控机制。将同一胎次、体重相近的浏阳黑山羊母羊随机分成营养正常组(n=4)和营养缺乏组(n=5)两组。试验从妊娠第95天开始,135天结束,为期40天。营养正常组母羊自由采食,营养缺乏组母羊进行40%采食量限制,日粮精粗比60:40。第134天从母羊颈静脉采集血液,制备血清,测定表皮生长因子(VEGF),胆汁酸,NO,NOS和精氨酸(Arg)的含量。妊娠第136天所有母羊进行屠宰,记录整个胎盘的重量和绒毛叶的数量,分离绒毛叶和子宫肉阜,称重并采集样本,测定NO含量、VEGFR2、NOS1和NOS2基因的相对表达量。同时采集胎盘组织块用于后续的总蛋白提取和Itraq标记。结果表明,与营养正常组相比,营养缺乏组母羊的绒毛叶重量显著增加(P<0.05),血清VEGF含量显著下降(P<0.05),胆汁酸含量呈现下降趋势(P<0.1),子宫肉阜VEGFR2基因的相对表达量显著上升。而其他指标无显著影响(P>0.05)。蛋白质表达谱结果显示,共鉴定出149个差异蛋白,其中上调蛋白70个,下调蛋白79个。这些差异蛋白主要参与翻译后修饰、蛋白周转、分子伴侣、翻译、核糖体结构与生物转化、氨基酸转运与代谢、能量产生与转换等生物学过程。涉及多糖合成与代谢、脂类代谢、抗生素合成、氨酰基tRNA合成、氨基酸合成、嘌呤代谢等信号通路。营养缺乏导致嘌呤合成双功能酶PURH、精氨琥珀酸裂解酶ASL、酮戊二酸脱氢酶OGDH的抑制和丝氨酸羟甲基转移酶SHMT1的激活。以上研究结果表明,妊娠后期采食量限制抑制了胎盘块毛细管构建和血流灌注,促进胎儿与母体之间的血液交换,以及胎儿胰腺的内分泌。胎盘PURH、ASL、OGDH和SHMT1蛋白可作为缓解胎羊宫内发育迟缓的药物靶标。
引文