鸡粪中氨氮降解菌的分离鉴定及除氨适宜条件研究

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• 论文作者：刘志云 ; 刘国华 ; 蔡辉益 ; 张姝 ; 常文环 ; 谢庆 ; 司彦培
• 年：2016
• 作者机构：重庆市畜牧科学院农业部养猪科学重点实验室养猪科学重庆市市级重点实验室;中国农业科学院饲料研究所;
• 论文关键词：分离鉴定 ; 克柔假丝酵母 ; 氨氮 ; 鸡粪
• 会议召开时间：2016-05-25
• 会议录名称：第七届中国畜牧科技论坛论文集
• 英文会议录名称：Proceeding of the 7th China Animal Husbandry Sci-tech Forum
• 语种：中文
• 分类号：X713;S852.6
• 学会代码：ZGXJ
• 会议名称：第七届中国畜牧科技论坛
• 会议地点：中国重庆
• 主办单位：中国畜牧兽医学会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会
• 页数：2
• 文件大小：137k
• 原文格式：O
• 会议级别：全国

摘要

(目的)氨气是畜禽养殖业中最常见、危害最大的有害气体之一。为了获得用于治理畜禽粪便氨气污染的微生物,从发酵3天的鸡粪中分离筛选高效氨氮降解菌,研究其对鸡粪的除氨效果。(方法)以硫酸铵为唯一氮源,对鸡粪中具有氨氮降解能力的微生物进行连续10代的富集培养,将获得的富集培养液按10~(-1)梯度稀释后进行分离纯化。分离得到的单菌落接种至富集培养基中,培养24h后,测定培养基中剩余的氨氮含量,比较各菌株之间的氨氮降解率,筛选出具有高效氨氮降解能力的菌株。通过形态观察、分子生物学以及生物化学的方法进行菌株鉴定。研究不同温度和pH对菌株生长的影响,探索不同碳源、C/N以及初始氨氮浓度对菌株氨氮降解性能的影响。最后将得到的目标菌株,按10%的接种量接种到鸡粪中,同时以等量无菌生理盐水作为对照组,分别培养24 h、48 h、72 h和96 h,测定鸡粪的氨气散发量以及不同形态氮素的变化情况,评价目的菌株对鸡粪的除氨效果。(结果)通过富集培养,从鸡粪中共分离出15株能够降解氨氮的菌株,进一步筛选得到1株氨氮高效降解菌LSA,经鉴定为克柔假丝酵母(Candida krusei),与Candida krusei isolate EM12(JF274497.1)的相似性达到99%,GenBank中的登录号为KT025851。该菌株的对数生长期为6~12h,可在pH3~7、20~40℃条件下生长,能够分别利川葡萄糖、乙酸钠、淀粉、柠檬酸钠、甘露醇作为碳源,不能利用无机碳,当培养基的C/N为20时氨氮去除效果最佳。随着培养基中初始氨氮浓度的升高,菌株LSA对氨氮的降解率呈现下降趋势;与之相反,氨氮降解速率则随着初始浓度的升高呈现升高趋势。当氨氮初始浓度为327.20mg/L时,60h内菌株LSA对氨氮的去除率达到71.88%,菌体含量为OD_(600)2.45;当氨氮初始浓度为1 105.26mg/L时,96h内菌株LSA对氨氮的去除率达到57.44%,菌体含量达到OD_(500)2.96。将其接种到鸡粪中可以显著降低鸡粪中氨氮的含量,最高可降低22.30%;减少粪中氨气的挥发量,最高可降低15.92%;增加粪便总氮含量;降低粪便氨氮占总氮的比重。(结论)克柔似丝酵母(Candida krusei)LSA菌株具有高效氨氮降解能力和较强的环境适应性,可有效减少鸡粪中的氨氮含量,降低氨气的挥发量。

引文