清开灵有效组分干预缺血性中风细胞粘附机制的研究
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摘要
在临床脑血管病中,70%以上为缺血性脑血管病,缺血性脑卒中的发病率、死亡率和致
残率都很高,已经成为我国主要病死原因之一。人们传统认为中枢神经系统是受血脑屏障保
护的免疫特免器官,随着对缺血、缺氧性脑损伤机制研究的不断深入,发现脑组织也能产生
细胞因子和化学因子,表达粘附分子,引起炎症反应。炎症反应在脑损伤中起着重要作用,
脑缺血后继发炎症损伤,以其预后差,死亡率高,而日益受到人们的关注,已成为该领域的
研究热点。而循环中的白细胞与微血管内皮细胞异常粘附是引发炎症反应的前提条件。
清开灵注射液为安宫牛黄丸的改良剂型,具有清热解毒、化痰通窍的功效,应用于临床
以来,初期广泛用于治疗各种高热、感染以及各类流行性疾病。上世纪八十年代初,开始应
用于以中风急性期为主的脑血管疾病的治疗,取得了较好的临床疗效。清开灵注射液的主要
功效与中风病“毒损脑络”的中医病机学说在一定程度上相吻合,其在缺血性脑血管病中发
挥作用的机制、环节有待明确,进而可望从微观的层面发掘“毒”、“络”、“毒损脑络”病机
及“解毒通络”治法的现代生物学内涵。
本课题为国家重点基础研究发展规划(973) 项目“祛邪扶正方剂的研究--清开灵阻
抑中风病缺血级联反应的药效物质与作用机理”(课题号G1999054404) 的一部分,基于以上
理论,在前面工作的基础上,选择缺血后12h、24h两个时段,以白细胞与内皮细胞的粘附过
程为研究中心,以清开灵有效组分为干预手段,以脑缺血后血管内皮细胞及神经元的损伤程
度为主要药效评价因素,检测相关细胞因子、粘附因子的表达水平。具体包括以下五部分内
容及相关实验:
一、清开灵有效组分对引发炎症及血管内皮细胞损伤始动因子NF-κB的干预作用
胆酸在缺血12h阻抑内皮细胞NF-κB表达;栀子苷在此时段显著阻抑其在神经元表面
的表达,至缺血后24h该作用进一步加强,对其在内皮细胞的表达亦发挥阻抑作用;黄芩苷
在缺血后不同时段均使内皮细胞NF-κB表达减弱,作用持续、稳定;合方对其在内皮细胞、
神经元、胶质细胞上的表达均有阻抑作用。总之除珍珠母外各药物在缺血后不同时段阻抑NF
-κB表达,进而减轻血管内皮细胞损伤及缺血后炎症反应。
二、清开灵有效组分对细胞粘附不同阶段的干预作用
在本部分生化实验中,脑缺血后不同时段不同有效组分发挥作用的程度虽有差异,但总
体来说,除珍珠母外各有效组分均能显著降低MCAO大鼠脑组织中E-selectin水平;珍珠母、
黄芩苷、合方在缺血12h可降低ICAM-1表达水平,至缺血24h栀子苷、胆酸也开始显效,
免疫组化图像也显示了相似的作用趋势,各药物通过以上作用阻抑白细胞与内皮细胞的初级、
牢固粘附。本部分免疫组化结果显示珍珠母、栀子苷、黄芩苷、合方对缺血24h内皮细胞表
面P-selectin表达具有显著抑制作用,胆酸也有一定阻抑作用,从而抑制白细胞与内皮细
胞的初级粘附;除胆酸以外其他药物均可抑制内皮细胞PECAM-1的表达,以栀子苷作用最著,
合方次之,黄芩苷在缺血早期作用显著,至后期开始减弱,珍珠母也有作用,在缺血后不同
时段有效组分发挥了较一致的阻抑作用,抑制白细胞穿越内皮细胞进入脑组织。
清开灵有效组分干预缺血性中风细胞粘附机制的研究
三、清开灵有效组分对脑缺血后微血管挛缩状态的干预作用
脑缺血1 Zh血浆ET一1的水平已明显上升,至24h仍保持高水平,而有效组分中只有桅子
营及合方在缺血后24h才显示了阻抑其表达的作用,且合方的抑制作用优于单用桅子昔,可
以认为除桅子着外其它组分单用在此环节虽无明显治疗作用,但多种有效组分可协同作用而
抑制血浆ET一1的表达;脑缺血1 Zh,除合方外各有效组分均表现为不同程度的抑制血浆TxBZ
表达作用,其中胆酸和黄答普还有升高血浆6一ket。一PGF,Q趋势,从而在此时段表现为除珍珠
母外各组分能显著阳氏TxBZ/6一keto一PGF:Q比值,发挥较理想的舒张微血管、保护内皮的作
用;至缺血24h,黄答昔、合方仍能抑制血浆TXBZ高表达及降低TxBZ/6一ket。一PGF,a比值,
而珍珠母及胆酸则有升高血浆6一keto一PGF:Q趋势。从以上两个时段三个紧密相关指标的变化
规律及有效组分的干预作用可以看出,有效组分对TxBZ/6一ket。一PGF,Q比值影响与对血浆
TXBZ影响趋势大体一致,提示血浆TxBZ的升高是引发微血管痉挛的主要因素,药物主要通过
抑制血浆TxBZ高表达从而降低TXBZ/6一ket。一GFIQ比值,使微血管痉挛状态得以改善。
四、清开灵有效组分对脑缺血后血小板活化的干预作用
脑缺血不同时段毗A0大鼠血清P一5 electin水平均显著升高,桅子普、胆酸、合方在缺
血1 Zh时段可以降低血清可溶性P一selectin的浓度,至缺血24h,桅子昔、胆酸作用不著,
而珍珠母、黄答昔开始显效,合方则仍继续阳氏血清可溶性P一se lectin浓度,从而抑制血小
板活化;脑缺血1 Zh,模型组血浆TX残含量高于正常组,除合方外的有效组分能阻抑缺血1 Zh
毗AO大鼠血浆TxBZ高表达,其中珍珠母作用尤为显著;缺血24h,黄答昔、合方仍可阻抑其
表达。各有效组分通过阻抑血小板的活化及其内容物的释放来减轻缺血后内皮细胞损伤、缺
血程度及炎症反应。
五、清开灵有效组分对脑缺血损伤的干预作用
脑?
More than 70% cerebrovascular diseases are caused by ischemia in clinic. The incident rate, death rate and mutilate rate of cerebral arterial thrombosis are very high. It has been one of mainly cause for death. Central nervous system, according to traditional concept, is except from immune system for the protection of blood brain barrier. With progresses in mechanism of brain damage, more accumulating evidences show that cytokines, adhesion molecules exist in brain tissues and cause inflammation. Inflammatory reaction plays a key role in brain damage. A new hot spot is coming in this field and more and more scholars pay attentions to it. The precondition of inflammation is abnormally adhesion between leucocytes and vascular endothelia cells in circulation.QINGKAILING parenteral solution is the improved dose derived from Angongniuhuang pills. The effects of QINGKAILING include removing fever, detoxication, expectorant and purging aperture. In the early days, it widespread in treating hyperpyrexia, infection and epidemic diseases, and it was extensively used to treat acute stroke since 1980s. This therapy is successful in clinic for the main mechanism partly coinciding with the new rising hypothesis of 'toxin damage brain veins'. The mechanism, the target points of QINGKAILING parenteral solution are not clear and more evidences are required to verify its effects in treating cerebrovascular diseases caused by ischemia. Thus, it is necessary to explore the molecular evens of 'toxin', 'meridian' and 'toxin damage brain veins'.This study was supported by a grant(G1999054404) from The National Program For Key Bisic Reasearch Projects(973)-'The effective components and mechanisms of QingKaiLing in depress ing cascade reaction of ischemic stroke'. Two time points, 12 hours and 24hours, are defined according to previous researches. For these progresses,this study focuses on the process of adhesion between endothelia cells and leucocytes. The level of neuronal and endothelia cell injury are evaluated and the expression levels of cytokines and adhesion molecules are detected after the cerebral ischemia model rat treated with QINGKAILING Our studies are performed as follows in five parts:Part one : The intervention effects of effective components of QINGKAILING on NE- κB - the initiation factor of vascular endothelia injury.The expression level of NF— κB are depressed by cholalic acid on endothelia after 12h ischemia. Jasminoidin obviously depress the expression level of NF—κB on both neur and endothelia after 12h and more stronger after 24h on neur. The depressed level of NF—κB was observed on endothelia in different periods in baicalin treating rats. The same effects on NF—κB are observed on endothelia, neur and glial cells when rats are treated with HeFang. In a word, these components can depress inflammation reaction by decreasing the expression of NF —κB. Part two : The intervention effects of effective components of QINGKAILING on expression of adhesion molecules in different period.Although the depress level is different in different time points in this part, the results show us
that the effective components of QINGKAILING can obviously decrease the level of E-selectin in cerebral tissues of MCAO rats except nacre. Nacre, HeFang and baicalin significantly reduced the expression of ICAM-1 after ischemia 12 hrs. After ischemia 24hrs, jasminoidin and cholalic acid begin to show their effects on depressing the expression of ICAM-1. The same tendency can be seen in the results of immunochemistry. These mechanisms contribute to the effects on depressing the primary and substance adhesion between leukocytes and endothelia.The results of immunochemistry show us that the expression levels of P-selectin are obviously decreased by nacre, jasminoidin, baicalin and HeFang on endothelia, and in a way, cholalic acid depress too. All components except cholalic acid depress the expression of PECAM-1 on endothelia, the strongest one is jasminoidin and HeFang takes the second place. Baicalin is more effective in the early period and
残率都很高,已经成为我国主要病死原因之一。人们传统认为中枢神经系统是受血脑屏障保
护的免疫特免器官,随着对缺血、缺氧性脑损伤机制研究的不断深入,发现脑组织也能产生
细胞因子和化学因子,表达粘附分子,引起炎症反应。炎症反应在脑损伤中起着重要作用,
脑缺血后继发炎症损伤,以其预后差,死亡率高,而日益受到人们的关注,已成为该领域的
研究热点。而循环中的白细胞与微血管内皮细胞异常粘附是引发炎症反应的前提条件。
清开灵注射液为安宫牛黄丸的改良剂型,具有清热解毒、化痰通窍的功效,应用于临床
以来,初期广泛用于治疗各种高热、感染以及各类流行性疾病。上世纪八十年代初,开始应
用于以中风急性期为主的脑血管疾病的治疗,取得了较好的临床疗效。清开灵注射液的主要
功效与中风病“毒损脑络”的中医病机学说在一定程度上相吻合,其在缺血性脑血管病中发
挥作用的机制、环节有待明确,进而可望从微观的层面发掘“毒”、“络”、“毒损脑络”病机
及“解毒通络”治法的现代生物学内涵。
本课题为国家重点基础研究发展规划(973) 项目“祛邪扶正方剂的研究--清开灵阻
抑中风病缺血级联反应的药效物质与作用机理”(课题号G1999054404) 的一部分,基于以上
理论,在前面工作的基础上,选择缺血后12h、24h两个时段,以白细胞与内皮细胞的粘附过
程为研究中心,以清开灵有效组分为干预手段,以脑缺血后血管内皮细胞及神经元的损伤程
度为主要药效评价因素,检测相关细胞因子、粘附因子的表达水平。具体包括以下五部分内
容及相关实验:
一、清开灵有效组分对引发炎症及血管内皮细胞损伤始动因子NF-κB的干预作用
胆酸在缺血12h阻抑内皮细胞NF-κB表达;栀子苷在此时段显著阻抑其在神经元表面
的表达,至缺血后24h该作用进一步加强,对其在内皮细胞的表达亦发挥阻抑作用;黄芩苷
在缺血后不同时段均使内皮细胞NF-κB表达减弱,作用持续、稳定;合方对其在内皮细胞、
神经元、胶质细胞上的表达均有阻抑作用。总之除珍珠母外各药物在缺血后不同时段阻抑NF
-κB表达,进而减轻血管内皮细胞损伤及缺血后炎症反应。
二、清开灵有效组分对细胞粘附不同阶段的干预作用
在本部分生化实验中,脑缺血后不同时段不同有效组分发挥作用的程度虽有差异,但总
体来说,除珍珠母外各有效组分均能显著降低MCAO大鼠脑组织中E-selectin水平;珍珠母、
黄芩苷、合方在缺血12h可降低ICAM-1表达水平,至缺血24h栀子苷、胆酸也开始显效,
免疫组化图像也显示了相似的作用趋势,各药物通过以上作用阻抑白细胞与内皮细胞的初级、
牢固粘附。本部分免疫组化结果显示珍珠母、栀子苷、黄芩苷、合方对缺血24h内皮细胞表
面P-selectin表达具有显著抑制作用,胆酸也有一定阻抑作用,从而抑制白细胞与内皮细
胞的初级粘附;除胆酸以外其他药物均可抑制内皮细胞PECAM-1的表达,以栀子苷作用最著,
合方次之,黄芩苷在缺血早期作用显著,至后期开始减弱,珍珠母也有作用,在缺血后不同
时段有效组分发挥了较一致的阻抑作用,抑制白细胞穿越内皮细胞进入脑组织。
清开灵有效组分干预缺血性中风细胞粘附机制的研究
三、清开灵有效组分对脑缺血后微血管挛缩状态的干预作用
脑缺血1 Zh血浆ET一1的水平已明显上升,至24h仍保持高水平,而有效组分中只有桅子
营及合方在缺血后24h才显示了阻抑其表达的作用,且合方的抑制作用优于单用桅子昔,可
以认为除桅子着外其它组分单用在此环节虽无明显治疗作用,但多种有效组分可协同作用而
抑制血浆ET一1的表达;脑缺血1 Zh,除合方外各有效组分均表现为不同程度的抑制血浆TxBZ
表达作用,其中胆酸和黄答普还有升高血浆6一ket。一PGF,Q趋势,从而在此时段表现为除珍珠
母外各组分能显著阳氏TxBZ/6一keto一PGF:Q比值,发挥较理想的舒张微血管、保护内皮的作
用;至缺血24h,黄答昔、合方仍能抑制血浆TXBZ高表达及降低TxBZ/6一ket。一PGF,a比值,
而珍珠母及胆酸则有升高血浆6一keto一PGF:Q趋势。从以上两个时段三个紧密相关指标的变化
规律及有效组分的干预作用可以看出,有效组分对TxBZ/6一ket。一PGF,Q比值影响与对血浆
TXBZ影响趋势大体一致,提示血浆TxBZ的升高是引发微血管痉挛的主要因素,药物主要通过
抑制血浆TxBZ高表达从而降低TXBZ/6一ket。一GFIQ比值,使微血管痉挛状态得以改善。
四、清开灵有效组分对脑缺血后血小板活化的干预作用
脑缺血不同时段毗A0大鼠血清P一5 electin水平均显著升高,桅子普、胆酸、合方在缺
血1 Zh时段可以降低血清可溶性P一selectin的浓度,至缺血24h,桅子昔、胆酸作用不著,
而珍珠母、黄答昔开始显效,合方则仍继续阳氏血清可溶性P一se lectin浓度,从而抑制血小
板活化;脑缺血1 Zh,模型组血浆TX残含量高于正常组,除合方外的有效组分能阻抑缺血1 Zh
毗AO大鼠血浆TxBZ高表达,其中珍珠母作用尤为显著;缺血24h,黄答昔、合方仍可阻抑其
表达。各有效组分通过阻抑血小板的活化及其内容物的释放来减轻缺血后内皮细胞损伤、缺
血程度及炎症反应。
五、清开灵有效组分对脑缺血损伤的干预作用
脑?
More than 70% cerebrovascular diseases are caused by ischemia in clinic. The incident rate, death rate and mutilate rate of cerebral arterial thrombosis are very high. It has been one of mainly cause for death. Central nervous system, according to traditional concept, is except from immune system for the protection of blood brain barrier. With progresses in mechanism of brain damage, more accumulating evidences show that cytokines, adhesion molecules exist in brain tissues and cause inflammation. Inflammatory reaction plays a key role in brain damage. A new hot spot is coming in this field and more and more scholars pay attentions to it. The precondition of inflammation is abnormally adhesion between leucocytes and vascular endothelia cells in circulation.QINGKAILING parenteral solution is the improved dose derived from Angongniuhuang pills. The effects of QINGKAILING include removing fever, detoxication, expectorant and purging aperture. In the early days, it widespread in treating hyperpyrexia, infection and epidemic diseases, and it was extensively used to treat acute stroke since 1980s. This therapy is successful in clinic for the main mechanism partly coinciding with the new rising hypothesis of 'toxin damage brain veins'. The mechanism, the target points of QINGKAILING parenteral solution are not clear and more evidences are required to verify its effects in treating cerebrovascular diseases caused by ischemia. Thus, it is necessary to explore the molecular evens of 'toxin', 'meridian' and 'toxin damage brain veins'.This study was supported by a grant(G1999054404) from The National Program For Key Bisic Reasearch Projects(973)-'The effective components and mechanisms of QingKaiLing in depress ing cascade reaction of ischemic stroke'. Two time points, 12 hours and 24hours, are defined according to previous researches. For these progresses,this study focuses on the process of adhesion between endothelia cells and leucocytes. The level of neuronal and endothelia cell injury are evaluated and the expression levels of cytokines and adhesion molecules are detected after the cerebral ischemia model rat treated with QINGKAILING Our studies are performed as follows in five parts:Part one : The intervention effects of effective components of QINGKAILING on NE- κB - the initiation factor of vascular endothelia injury.The expression level of NF— κB are depressed by cholalic acid on endothelia after 12h ischemia. Jasminoidin obviously depress the expression level of NF—κB on both neur and endothelia after 12h and more stronger after 24h on neur. The depressed level of NF—κB was observed on endothelia in different periods in baicalin treating rats. The same effects on NF—κB are observed on endothelia, neur and glial cells when rats are treated with HeFang. In a word, these components can depress inflammation reaction by decreasing the expression of NF —κB. Part two : The intervention effects of effective components of QINGKAILING on expression of adhesion molecules in different period.Although the depress level is different in different time points in this part, the results show us
that the effective components of QINGKAILING can obviously decrease the level of E-selectin in cerebral tissues of MCAO rats except nacre. Nacre, HeFang and baicalin significantly reduced the expression of ICAM-1 after ischemia 12 hrs. After ischemia 24hrs, jasminoidin and cholalic acid begin to show their effects on depressing the expression of ICAM-1. The same tendency can be seen in the results of immunochemistry. These mechanisms contribute to the effects on depressing the primary and substance adhesion between leukocytes and endothelia.The results of immunochemistry show us that the expression levels of P-selectin are obviously decreased by nacre, jasminoidin, baicalin and HeFang on endothelia, and in a way, cholalic acid depress too. All components except cholalic acid depress the expression of PECAM-1 on endothelia, the strongest one is jasminoidin and HeFang takes the second place. Baicalin is more effective in the early period and
引文
1. 《黄帝内经素问校释》人民卫生出版社 1982年2月第一版
2. 《灵枢经校释》人民卫生出版社 1982年5月第一版
3. 《诸病源候论》 [隋]巢元方等著 人民卫生出版社 1955年第一版
4. 《济生方》 [宋]严用和撰 人民卫生出版社 1956年第一版
5. 《千金方》 [唐]孙思邈撰 华夏出版社 1993年
6. 《素问玄机原病式》 刘完素著 江苏科学技术出版社 1985年
7. 《儒门事亲》 [金]张从正原著 天津科学技术出版社 1999年
8. 《丹溪心法》 [元]朱震亨撰 辽宁科学技术出版社 1997年
9. 《医学发明》 [金]李皋著 中国古籍出版社 1987年
10. 《景岳全书》 [明]张景岳著 重庆大学出版社 1988年7月第一版
11. 《临证指南医案》 [清]叶天士著 上海科学技术出版社 1959年
12. 《金匮要略心典》 [清]尤在泾撰注 上海人民出版社 1975年
13. 《医林改错》 [清]王清任著 中国中医药出版社 1995年
14. 《医学衷中参西录》 张锡纯著 河北人民出版社 1974年
15. 《医学纲目》 [明]楼英编撰 人民卫生出版社 1987年
16. 《医学正传》 [明]虞抟原著 中国古籍出版社 2002年
17. 《金匮要略》 [汉]张仲景撰 中国古籍出版社 1997年
1. 包祖晓,赵国平。试论缺血性中风气虚血瘀病机学说。中医药研究 2001 Vol17No.5 14-16
2. 陈召。养阴法是防治缺血性中风的重要法则。中医药研究 1998 Vol 14 No.6 28-30
3. 祝维峰。缺血性中风痰瘀互结机制的探讨。浙江中医学院学报 2000 Vol24No.3 57-59
4. 周迎春,邵念芳。急性缺血性中风病因病机探讨。湖北中医学院学报 1999 Vol1No.2 19-21
5. 常富业。浅谈中风病正衰积损学说。山东中医杂志 2000 Vol21No.4 195-197
6. 任志云。试论形神失调与中风病。山东中医杂志 2000 Vol19No.5 263-264
7. 孔立,陈保廷,徐向青。试论中风病病因病机的层次关系。国医论坛 1999 Vol13No.3 19-20
8. 刘志龙。中风病机探讨。湖南中医学院学报 1995Vol15 No.3 16-19
9. 王体华。辨证分型治疗缺血性中风52例。江苏中医药 2002 Vol 23 No.3 17-19
10. 刘亚敏,张赐安,徐秋英,林培政,彭胜权。芳香开窍法对急性缺血性中风治疗作用的临床观 察。广州中医药大学学报 2002 Vol19No.3 165-168
11. 路翠云,王东辉,苗超荣。200例中风(脑缺血)中医治疗及疗效观察。山西中医学院学 报 2001 Vol2No.4 15-17
12. 万于军。辨证论治活血化瘀法治疗缺血性中风122例。 现代中西医结合杂志2001 Vol10No.20 1926-1928
13. 洪士香。痰瘀同治缺血性中风99例临床观察。天津中医 2000 Vol17No.4 15-16
14. 周琼,窦正元。辨证治疗缺血性中风临床疗效观察。云南中医中药杂志 2001 Vol22No.2 23-25
15. 杨三红。辨证治疗缺血性中风54例。湖南中医药导报 1998 Vol 4No11 22
16. 黄选华。辨证通腑治疗中风病急性期96例疗效观察。广西中医学院学报 2001 Vol18No.1 47-49
17. 周兰坤。 131例中风临床辨证分析。河北中医 1999Vol21No.3 140-141
18. 武继涛。缺血性中风辨证施治思路新探。中医药学刊2001. Vol19 No.3 224-225
19. 谭吉林,何希俊,白伟杰,黄嘉柏。辨证治疗缺血性中风30例观察。中医药学刊2001 Vol18No.1 67-69
20. 王永炎。关于提高脑血管疾病疗效难点的思考。中国中西医结合杂志 1997 Vol17No.2 195-196
21. 唐启盛,王永炎,黄启福。“浊毒痹阻脑络”对老年期痴呆的影响。北京中医药大学学报 1997Vol20No.6 24-25
22. 李澎涛,王永炎,黄启福。“毒损脑络”病机假说的形成及其理论与实践意义。北京中医 药大学学报 2001Vol24No.1 1-6
23. 刘卫红,邵念方。从毒邪论治中风病急性期。辽宁中医杂志 1999 Vol26No.1 14-15
24. 宋福印,王永炎,黄启福。试论毒损脑络与糖尿病性脑病。北京中医药大学学报 2000 Vol23No.5 7-8
25. 赵海滨,沈承玲,胡佩瑛。中风热毒论初探。中医药学报 2002 Vol30No.5 1-4
26. 雷燕,黄启福,王永炎。论瘀毒阻络是络病形成的病理基础。北京中医药大学学报 1999 Vol22No.2 8-10
27. 关少侠,谌剑飞,马雅玲。急性缺血性中风始发状态风证与血浆内皮素的关系研究。 中国 中西医结合急救杂志 2001 Vol8No.1 41-43
28. 熊录,田少霞,范吉平。脑缺血损伤后神经功能重建构想及对中医治疗缺血性中风的启示。 中国中医基础医学杂志 2002 Vol8No.6 403-405
29. 赵瑞祥,周向东,王凤山,郭雪云。脑卒中患者脂质代谢紊乱与中医辨证分型的关系。 中国中西医结合杂志 1998Vol 18 No 6 339-341
30. 谌剑飞,关少侠,丁萍,李创鹏。中风急症证候研究与问题探讨。中国中西医结合急救杂志 2001 Vol8No.3 169-171
31. 张东友,王进,周益群,刘义成,董进。脑功能区病变与中风病证型相关性研究。现代诊断与 治疗 2000 Vol11No.1 8-11
32. 郦永平。中风辨证现代化理论探讨。江苏中医 2001 Vol22No.3 5-7
2. 《灵枢经校释》人民卫生出版社 1982年5月第一版
3. 《诸病源候论》 [隋]巢元方等著 人民卫生出版社 1955年第一版
4. 《济生方》 [宋]严用和撰 人民卫生出版社 1956年第一版
5. 《千金方》 [唐]孙思邈撰 华夏出版社 1993年
6. 《素问玄机原病式》 刘完素著 江苏科学技术出版社 1985年
7. 《儒门事亲》 [金]张从正原著 天津科学技术出版社 1999年
8. 《丹溪心法》 [元]朱震亨撰 辽宁科学技术出版社 1997年
9. 《医学发明》 [金]李皋著 中国古籍出版社 1987年
10. 《景岳全书》 [明]张景岳著 重庆大学出版社 1988年7月第一版
11. 《临证指南医案》 [清]叶天士著 上海科学技术出版社 1959年
12. 《金匮要略心典》 [清]尤在泾撰注 上海人民出版社 1975年
13. 《医林改错》 [清]王清任著 中国中医药出版社 1995年
14. 《医学衷中参西录》 张锡纯著 河北人民出版社 1974年
15. 《医学纲目》 [明]楼英编撰 人民卫生出版社 1987年
16. 《医学正传》 [明]虞抟原著 中国古籍出版社 2002年
17. 《金匮要略》 [汉]张仲景撰 中国古籍出版社 1997年
1. 包祖晓,赵国平。试论缺血性中风气虚血瘀病机学说。中医药研究 2001 Vol17No.5 14-16
2. 陈召。养阴法是防治缺血性中风的重要法则。中医药研究 1998 Vol 14 No.6 28-30
3. 祝维峰。缺血性中风痰瘀互结机制的探讨。浙江中医学院学报 2000 Vol24No.3 57-59
4. 周迎春,邵念芳。急性缺血性中风病因病机探讨。湖北中医学院学报 1999 Vol1No.2 19-21
5. 常富业。浅谈中风病正衰积损学说。山东中医杂志 2000 Vol21No.4 195-197
6. 任志云。试论形神失调与中风病。山东中医杂志 2000 Vol19No.5 263-264
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