中肝合剂抗肿瘤的药效及机理研究
|
摘要
目的研究中肝合剂抗肿瘤的药效及作用机理。
方法采用H22肝癌、S180实体瘤模型,观察中肝合剂对ICR小鼠肿瘤生长的抑制作用；采用H22肝癌腹水瘤小鼠模型,观察中肝合剂对ICR小鼠的生命延长率；采用荧光定量RT-PCR法测定中肝合剂对H22肝癌移植瘤小鼠肿瘤组织TGF-β1RⅡ、NF-κB、VEGF、CyclinD1表达的影响；探索其可能的作用机理。
结果①中肝合剂低、中、高剂量组和CTX阳性对照组对H22肝癌、S180肉瘤荷瘤小鼠肿瘤生长抑制率分别为(17.72%、33.99%、23.73%、43.95%)和(29.59%、31.34%、11.17%、53.92%)。
②中肝合剂低、中、高剂量组和CTX阳性对照组对荷H22肝癌腹水瘤ICR小鼠生命延长率分别为(4.60%、16.70%、9.10%、17.24%)。
③中肝合剂能上调TGF-β1RⅡ表达水平,以中剂量组最明显,与生理盐水组相比有显著性差异(P<0.01)。
④中肝合剂各给药组均能明显下调荷H22肝癌实体瘤小鼠肿瘤组织中NF-κB的表达水平,与生理盐水组相比均有显著性差异(P<0.01)。
⑤中肝合剂中、高剂量组能明显降低ICR小鼠H22肝癌肿瘤组织中VEGF的表达水平,以高剂量组最明显,中、高剂量组与生理盐水组均有显著差异(P<0.01)。
⑥中肝合剂各给药组均能明显下调小鼠H22肝癌肿瘤组织CyclinD1的表达水平,以高剂量组较显著,与生理盐水组相比有显著性差异(P<0.01)。
结论中肝合剂在体内具有明显的抗肿瘤作用。其作用机理可能是通过下调荷瘤小鼠肿瘤组织NF-κB、VEGF、cyclinD1表达,并上调TGF-β1RⅡ的表达水平,从而抑制肿瘤组织新生血管生成,抑制肿瘤细胞增殖,实现其抗肿瘤作用。
Objective To investigate the anti-tumor effect of Zhonggan Mixture and its mechanism.
Methods Hepatoma H22 and S180 tumor-bearing ICR mice were established to evaluate the tumor inhibition effect of Zhonggan Mixture. Further,. ICR mice of S180 ascites carcinoma model was established to evaluate the life prolonging effect of Zhonggan Mixture. The expression of TGF-β,RⅡ, NF-κB, CyclinDl and VEGF mRNA were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (QRT-PCR) in tumor tissues.
Results①Zhonggan Mixture significantly inhibited tumor growth in the mice bearing hepatoma H22 and S180, and the inhibitory rate of the low, mid and high-dose groups and Cyclophosphamide (CTX) group were 17.72%,33.99%,23.73%,43.95% and 29.59%,31.34%,1 1.17%,3.92% respectively. The mid-dose group displayed the most potent anti-tumor effect.
②The life prolonging rate of the low, mid and high-dose groups and CTX group were 6.35%,16.95%,7.43%,17.46%.The mid-dose group displayed the most potent anti-tumor effect.
③Zhonggan Mixture could up-regulate the expression levels of TGF-β1RⅡmRNA in tumor tissues from the mice bearing hepatoma H22. Compared with saline control group, the effects of the mid dose groups were the most prominent and showed significantly different in statistics(P<0.01).
④Zhonggan Mixture could down-regulate the expression levels of NF-κB mRNA in tumor tissues from the mice bearing hepatoma H22. Compared with saline control group, the effects of the high dose groups were the most prominent and showed significantly different in statistics (p<0.01).
⑤Zhonggan Mixture could down-regulate the expression levels of VEGF mRNA in tumor tissues from the mice bearing Hepatoma H22. Compared with saline control group, the effect of the mid and high-dose group was the most prominent and showed significantly different in statistics (P<0.01).
⑥Zhonggan Mixture could down-regulate the expression levels of cyclinD1 mRNA in tumor tissues from the mice bearing hepatoma H22. Compared with saline control group, the effects of the high dose groups were the most prominent and showed significantly different in statistics (P<0.01).
Conclunsion Our results indicate that Zhonggan Mixture has notable anti-tumor effects, and the possible mechanism of Zhonggan Mixture inhibiting proliferation and inducing apoptosis were associated with down-regulating the expression levels of NF-κB, CyclinD1 and VEGF m RNA and up-regulating the expression levels of TGF-β1RⅡmRNA in tumor tissues.
方法采用H22肝癌、S180实体瘤模型,观察中肝合剂对ICR小鼠肿瘤生长的抑制作用；采用H22肝癌腹水瘤小鼠模型,观察中肝合剂对ICR小鼠的生命延长率；采用荧光定量RT-PCR法测定中肝合剂对H22肝癌移植瘤小鼠肿瘤组织TGF-β1RⅡ、NF-κB、VEGF、CyclinD1表达的影响；探索其可能的作用机理。
结果①中肝合剂低、中、高剂量组和CTX阳性对照组对H22肝癌、S180肉瘤荷瘤小鼠肿瘤生长抑制率分别为(17.72%、33.99%、23.73%、43.95%)和(29.59%、31.34%、11.17%、53.92%)。
②中肝合剂低、中、高剂量组和CTX阳性对照组对荷H22肝癌腹水瘤ICR小鼠生命延长率分别为(4.60%、16.70%、9.10%、17.24%)。
③中肝合剂能上调TGF-β1RⅡ表达水平,以中剂量组最明显,与生理盐水组相比有显著性差异(P<0.01)。
④中肝合剂各给药组均能明显下调荷H22肝癌实体瘤小鼠肿瘤组织中NF-κB的表达水平,与生理盐水组相比均有显著性差异(P<0.01)。
⑤中肝合剂中、高剂量组能明显降低ICR小鼠H22肝癌肿瘤组织中VEGF的表达水平,以高剂量组最明显,中、高剂量组与生理盐水组均有显著差异(P<0.01)。
⑥中肝合剂各给药组均能明显下调小鼠H22肝癌肿瘤组织CyclinD1的表达水平,以高剂量组较显著,与生理盐水组相比有显著性差异(P<0.01)。
结论中肝合剂在体内具有明显的抗肿瘤作用。其作用机理可能是通过下调荷瘤小鼠肿瘤组织NF-κB、VEGF、cyclinD1表达,并上调TGF-β1RⅡ的表达水平,从而抑制肿瘤组织新生血管生成,抑制肿瘤细胞增殖,实现其抗肿瘤作用。
Objective To investigate the anti-tumor effect of Zhonggan Mixture and its mechanism.
Methods Hepatoma H22 and S180 tumor-bearing ICR mice were established to evaluate the tumor inhibition effect of Zhonggan Mixture. Further,. ICR mice of S180 ascites carcinoma model was established to evaluate the life prolonging effect of Zhonggan Mixture. The expression of TGF-β,RⅡ, NF-κB, CyclinDl and VEGF mRNA were detected by quantitative real-time polymerase chain reaction (QRT-PCR) in tumor tissues.
Results①Zhonggan Mixture significantly inhibited tumor growth in the mice bearing hepatoma H22 and S180, and the inhibitory rate of the low, mid and high-dose groups and Cyclophosphamide (CTX) group were 17.72%,33.99%,23.73%,43.95% and 29.59%,31.34%,1 1.17%,3.92% respectively. The mid-dose group displayed the most potent anti-tumor effect.
②The life prolonging rate of the low, mid and high-dose groups and CTX group were 6.35%,16.95%,7.43%,17.46%.The mid-dose group displayed the most potent anti-tumor effect.
③Zhonggan Mixture could up-regulate the expression levels of TGF-β1RⅡmRNA in tumor tissues from the mice bearing hepatoma H22. Compared with saline control group, the effects of the mid dose groups were the most prominent and showed significantly different in statistics(P<0.01).
④Zhonggan Mixture could down-regulate the expression levels of NF-κB mRNA in tumor tissues from the mice bearing hepatoma H22. Compared with saline control group, the effects of the high dose groups were the most prominent and showed significantly different in statistics (p<0.01).
⑤Zhonggan Mixture could down-regulate the expression levels of VEGF mRNA in tumor tissues from the mice bearing Hepatoma H22. Compared with saline control group, the effect of the mid and high-dose group was the most prominent and showed significantly different in statistics (P<0.01).
⑥Zhonggan Mixture could down-regulate the expression levels of cyclinD1 mRNA in tumor tissues from the mice bearing hepatoma H22. Compared with saline control group, the effects of the high dose groups were the most prominent and showed significantly different in statistics (P<0.01).
Conclunsion Our results indicate that Zhonggan Mixture has notable anti-tumor effects, and the possible mechanism of Zhonggan Mixture inhibiting proliferation and inducing apoptosis were associated with down-regulating the expression levels of NF-κB, CyclinD1 and VEGF m RNA and up-regulating the expression levels of TGF-β1RⅡmRNA in tumor tissues.
引文
[1]Nicole C Tsim, Adam E Frampton, Nagy A Habib, et al. Surgical treatment for liver cancer.World J Gastroenterol:2010,16(8):927-933
[2]Venook AP, Papandreou C, Furuse J, et al.The incidence and epidemiology of hepatocellular carcinoma:a global and regional perspective. Oncologist,2010,15(S 4):5-13
[3]李霞,尤建良.中医药治疗原发性肝癌的临床研究进展.中医学报,2010,25(147)：221-223
[4]马琳.医院中药制剂的开发与进展.中国现代应用药学杂志,2008,25(7)：675-676
[5]何永强.医院制剂现状分析与发展思路.临床和实验医学杂志,2008,7(9)：167-168
[6]吕沅珊,李棣华,刘俊红.加快医院中药制剂向中药新药开发转化,促进中西医结合发展.中国中西医结合外科杂志,2010,16(1)：110-111
[7]陶韬,潘明阳.浅谈医院制剂现状及发展趋势.东南国防医药,2009,11(2)：182-183
[8]何福根,钟海均.中肝合剂预防化疗肝脏损害21例.浙江肿瘤,1998,4(2)：131
[9]程勋,曾莉.原发性肝癌中医药证治探讨.四川中医,2009,27(12)：39-40
[10]姜初明,龚黎燕.中肝合剂治疗中晚期原发性肝癌58例.中国中西医结合杂志,2005,25(9)：848-849
[11]叶丽红,程海波,章永红,等.原发性肝癌的中医治则与治法探讨.南京中医药大学学报,2010,26(1)：10-13
[12]李洁,张岱州,马梅芳.白花蛇舌草对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究.中国中医药科技,2009,16(1)：28-29
[13]杨培民,代龙,刘英,等.白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究.西北药学杂志,2010,25(1)：33-34
[14]杨连梅,胡荣,卜平.半枝莲提取物及黄酮成分抗肿瘤药理研究进展.中华中医药学 刊,2010,28(4)：751-753
[15]代志军,刘小旭,汤薇,等.半枝莲提取物对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用.南方医科大学学报,2008,28(10)：1835-1836
[16]李洁.半枝莲对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究.辽宁中医药大学学报：2008,10(7),139-140
[17]李学臣,张涛,魏晓东.三棱提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用.黑龙江医药科学,2010,33(5)：78
[18]王长安,高颖,张冬青,等.CM36抗肿瘤的实验研究.中华免疫杂志,1995,11(2)：109～113
[19]梁朝晖,张维彬,胡少为.莪术油对小鼠原位移植HepA肝癌细胞影响的研究.陕西中医,2009,30(1)：107-109
[20]李红枝,黄清松,陈伟强,等.仙鹤草抗突变和抑制肿瘤作用实验研究.数理医药学杂志,2005,18(5)：471-473
[21]马壵,李伟.中药剂量选择及对临床疗效的影响探讨.中医中药,2010,15：141
[22]段金廒,范欣生,宿树兰,等.中药及方剂量效关系的研究进展与思考.南京中医药大学学报,2009,25(4)：241-145
[23]Dai ZJ, Liu XX, Ji ZZ, et al. The Effect-enhancing and Toxicity-reducing Action of the Extract of Herba Scutellariae Barbatae for Chemotherapy in Hepatoma H22 Tumor-bearing Mice. J Trad Chin Med,2008,28(3):205-210
[24]胡玲,王洪琦,崔娜娟,等.白花蛇舌草对小鼠腹水H22肝癌细胞及T细胞的影响.现代消化及介入诊疗,2007,12：78-79
[25]郑同宝.扶正补虚方药治疗肝癌的实验及临床研究.广州中医药大学,2009
[26]沈毅,罗春梅.转化生长因子β1及其受体在非酒精性脂肪肝组织中表达的临床意义.校验医学与临床,2009,6(17)：1431-1432
[27]郭新珍,李怀斌,杨玉秀,等.TGF-β1、TβRⅡ及cyclinD1在大肠癌的表达及其意义.肿瘤防治研究,2005,32(1)：33-39
[28]张旭辉,付晓光,张志安,等.TGF-β1, VEGF蛋白在大肠癌组织中的表达及与大肠癌侵袭转移的关系.锦州医学院学报,2006,27(2)：7-10
[29]肖震宇,陈孝平,黄志勇. TGF-β1及其Ⅱ型受体在原发性肝癌中表达的研究.腹部外科,2005,18(2)：116-118
[30]李中华,赵晓芳.半枝莲水煎液对肝纤维化模型大鼠间质胶原和TGF-β1的影响.山东中医杂志,2010,29(1)：41-43
[31]刘军凯,牛丽红,安莲英.郁金药材中姜黄素类成分含量测定方法研究.广东微量元素科学,2009,16(12)：41-44
[32]何航,徐宏平,华海婴.姜黄素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1及Caspase-3表达的影响.第四军医大学学报,2009,30(2)：100-103
[33]孟召伟,谭健. NF-κB在肿瘤发生机制和增敏治疗中的作用.山东医药,2010,50(1)：100-103
[34]胡晓东,张吉翔.NF-κB信号转导通路对细胞周期的调控.细胞生物学杂志,2004,26：495-498
[35]宋祖军,王少波,王琦,等.NF-κB的研究进展.世界急危重病医学杂志,2007,4(1)：1693-1696
[36]梁帅.NF-κB在肝细胞癌组织中的表达及意义.中南大学,2007
[37]邬林泉,戈华平,吴金宝.NF-κB在肝细胞肝癌组织中的表达及其意义.中国临床医学,2007,14(1)：17-18
[38]梁英健.姜黄素通过抑制NF-κB信号通路增敏阿霉素的抗肝癌作用.黑龙江医学,2010,34(10)：726-728
[39]莫莉,唐发清.细胞周期素CyclinD1异常与肿瘤.实用预防医学,2006,13(5)：1386-1388
[40]董俊峰,吴晓鹏.原发性肝细胞癌Survivin, CyclinD1的表达及其临床意义.普通外科进展,2007,10(2)：156-158
[41]姚忠强,欧超,周波. β-Catenin, cyclinD1及c-myc在肝细胞癌中的表达.肿瘤防治 研究,2006,33(12)：849-852
[42]郑波,张红.芪薏益肝煎对小鼠H22肝癌细胞CyclinD1及Caspase-3表达的影响.中国临床药学杂志,2010,19(3)：156-159
[43]吴滨,张红,霍达.化积益肝煎对小鼠肝癌H22细胞β-catenin和cyclinD1表达的影响.云南中医中药杂志,2009,30(5)：58-59
[44]Folkman J. Tumor angiogenesis, therapeutic implications. N Engl J Med,1971, 285(21):1182-1186
[45]仇玮.抗肿瘤药物抑制肿瘤血管生成的机制.基层医学论坛,2010,14：269-271
[46]唐求,袁昌劲,聂冰,等.中药抗肿瘤血管生成研究进展.肿瘤学杂志,2010,16(2)：155-157
[47]孙屹峰,张超贤,秦咏梅.原发性肝癌患者血清VEGF、TGF-β1表达水平与浸润转移关系的研究.临床肝胆病杂志,2010,26(2)：205-207
[48]郑璐,梁平,李靖,等. HDGF、VEGF在人肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.第三军医大学学报,2010,32(7)：680-683
[49]负可力.半枝莲多糖联合CTX对H22小鼠血清相关细胞因子的影响.黑龙江中医药大学,2009
[50]丁荣杰,唐德才.三棱、莪术对移植性肝癌大鼠VEGF的影响.中华实用中西医杂志,2005,18(18)：1047-1048
[1]王长青,雷久士.中医药治疗原发性肝癌的研究进展.实用临床医学,2010,16(1)：80-83
[2]张宁宁,饶荣生.原发性肝癌的外科治疗现状.实用临床医学,2008,9(1)：129-133
[3]梁超.原发性肝癌的中医药治疗现状.中国医院用药评价与分析,2010,10(1)：95-96
[4]骆丹,叶丽红.中药治疗肝癌在实验研究领域的发展现状及趋势.世界华人消化杂志,2008,16(26)：2964-2968
[5]田春桃,韩丽艳.鸦胆子油对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.现代肿瘤医学,2010,18(4)：654-656
[6]冯泳,孟庆华,何前松,等.小半夏加茯苓颗粒含药血清体外对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖的影响.中国实验方剂学杂志,2010,16(5)：168-170
[7]张桂芳,吴丽敏,李艳博.徐长卿水提物抗肝癌作用初探.中华中医药学刊,2007,25(8)：1723-1724
[8]陈华,孙宇,崔晓楠.华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ的影响.中国癌症杂志,2010,20(3)：197-2
[9]王晶,王洪新,李红玉,等.秦皮乙素的制备及对人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖的影响.中国现代应用药学杂志,2009,26(6)：439-442
[10]张微,邹玺,钱晓萍,等.土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用.中药新药与临床药理,2007,18(4)：257-259
[11]叶正青,梁重峰,丁海,等.参麦注射液对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞的作用.江苏医药,2009,35(6)：699-701
[12]戴关海,杨峰,童晔玲,等.虎杖提取物抗人肝癌细胞株HepG-2作用的实验研究.中国中医药科技,2009,16(5)：376-377
[13]王玉亮,吕晶,张磊,等.水龙骨体外抗肝癌作用研究.时珍国医国药,2009,20 (2)：415-416
[14]赵志敏,叶永安,杨先照,等.中药复方抗纤抑癌方和复方鳖甲软肝片不同采血时间点药物血清对HepG-2肝癌细胞增殖活性的影响.时珍国医国药,2010,16(3)：244-246
[15]靳秀芹,陈小囡,孔繁智.中药有效成分诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展.浙江中医杂志,2010,45(7)：540-542
[16]Kerr JER,Wyllie AH, et al.Apoptosis, a basic biological, phenomenon with wider implications in tissue kinetics[J]Br J Cancer,1972,26:239
[17]吉利,郝宏党,蔡玉文.健脾理气方药诱导小鼠Hca-F肝癌细胞凋亡的形态学研究.实用癌症杂志,2009,24(2)：111-113
[18]金艳书,吴学敏,娄金丽.苦参碱对人肝癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响.中国临床康复,2006,10(3)：107-109
[19]丁海玲.蟾蜍水提物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的初步研究.大连医科大学,2008
[20]徐波,朱光辉,夏金堂.中药癌痛克对人肝癌细胞HepG-2增殖、凋亡及Rb基因表达的影响.中国组织工程研究与临床康复,2007,11(12)：2253-2256
[21]晏雪生,李瀚曼,彭亚琴,等.芍药甙诱导人肝癌细胞系HepG-2凋亡的研究.中西医结合肝病杂志,2006,16(1)：18-20
[22]何芳,何黎.三氧化二砷联合人参皂甙Rg3对移植瘤肝癌细胞凋亡的影响J].热带医学杂志,2009,9(1)：29-31
[23]何耿劲,赵慧慧.姜黄素诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡.江苏医药,2010,36(8)：926-928
[24]赵旭林,徐国昌,贺利民,等.槲皮素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的实验研究.实用心脑肺血管病杂志,2010,18(3)：310-311
[25]顾远晖,李一平,李安强.槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制及细胞凋亡的诱导作用.兰州大学学报,2010,36(3)：9-16
[26]冯兵,史传文,郑广娟.罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌TACE后HIF-1a和Bcl-2表达的影响.兰州大学学报,2010,36(3)：9-16
[27]Greider C. W., Blackburn E. H.. Identification of a specific telomere terminal transferase activity in Tetrahymena extracts.Cell,1985,43(2 Pt 1):405 413
[28]刘永仙,刘晓斌,王亚萍.肝癌组织端粒酶的表达.第四军医大学学报,2009,30(16)：1463
[29]许淼淼,李斌,秦成勇.端粒酶与肝癌的关系.中国误诊学杂志,2006,6(23)：4533-4534
[30]何松,左国庆,张燕,等.苦参碱对肝癌细胞HepG2端粒酶活性调控的体外研究.重庆医学,2008,37(3)：291-295
[31]丁向萍,马力,魏书堂,等.虫草素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对端粒酶活性影响的研究.中华肿瘤防治杂志,2008,15(2)：109-113
[32]黄廷荣.膈下逐瘀汤加减方抗肝癌作用的机理研究.湖北中医学院,2008.
[33]骆丹.抗癌扶正方及拆方抗肝癌有效成分的筛选及机制研究.南京中医药大学,2009
[34]赵建雄,郭芙莲,白德成,等.扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响.中西医结合学报,2006,4(3)：271-274
[35]季宇彬,高世勇.龙葵碱诱导HepG-2细胞凋亡的线粒体通路研究.中国药学杂志,2008,43(4)：272-275
[36]赵瑞杰.紫草素诱导肝癌细胞凋亡及其机制的初步探讨.西北农林科技大学,2010
[37]陈龙飞,陈涛.中药诱导肝癌细胞分化的研究概况.中华实用中西医杂志,2003,3(16)：2123-2125
[38]幕晓艳,赵爱光.中药诱导肝癌细胞分化的研究进展.中西医结合学报,2007,5(1)：92-96
[39]万旭英,罗明,贺平,等.苦参碱及氧化苦参碱体外对人肝癌细胞的诱导分化作用.中国药理学通报,2009,25(7)：977-979
[40]郭霞,郭昱.黄芩甙体外对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化作用.世界华人消化杂志,2008,16(10)：1119-1123
[41]赵海磊,刘成,赵爱光.中药复方胃肠安血清诱导肝癌SMMC-7721细胞分化.世界华人消化杂志,2003,11(9)：1345-1348
[42]杨金霞,王学美.中药抗肝癌免疫调节的研究进展.中国中药杂志,2007,32(4)：281-284
[43]许杜鹃,陈敏珠.黄芪多糖的抑瘤作用及其机制.中国医院药学杂志,2005,25(10)：923-925
[44]张燕,沈成义.大蒜素抗肝癌的免疫机制研究.中国病理生理杂志,2009,25(2)：392-395
[45]韦翠屏,汤琪云,梁中琴.沙苑子黄酮抗肝癌生长作用及对免疫功能的影响.肿瘤,2009,29(12)：1112-1115
[46]于赫,李冀,齐彦.五味子多糖对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其免疫学机理初探.中医药信息,2010,27(2)：26-27
[47]于赫,李冀,李淑莲.五味子多糖对H22荷瘤小鼠血清Zn、Se水平变化的干预作用研究.中医药信息,2010,27(3)：25-26
[48]叶义标,陈涛.肝癌血管生成与抗血管生成治疗的研究进展.中国普外基础与临床杂志,2009,16(10)：861-865
[49]刘少杰,沈文律,刘晓珑.中药扶正抗癌汤抗肿瘤血管形成治疗肝癌的实验研究.世界华人消化杂志,2005,13(7)：908-910
[50]雒琳.新加良附方抑制小鼠移植性肝癌效应与机制研究.北京中医药大学,2008.
[51]盛庆寿.青蒿琥酯对H22肝癌小鼠的抑瘤作用即对肿瘤组织VEGF、FasL的影响.广州中医药大学：2008
[52]石颖.中药复方益气活血方抗肝癌作用及机理研究.成都中医药大学,2004
[53]黄修燕,黄自丽,汤钊猷,等.中药复方“松友饮”对高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤的抑制作用.中华中医药杂志,2010,25(2)：234-237
[54]王郁金,苏衍进.白术挥发油对小鼠H22肝癌血道转移的抑制作用及机理研究.陕西中医,2009,30(6)：735-736
[55]张栋,孙静.益气养阴方对小鼠肝癌血道转移的影响.时珍国医国药,2009,20(10)：2446-2447
[56]樊讯,成肇仁,李家庚,等.麝黄消瘤方对小鼠肝癌血管生成的抑制作用.中西医结合肝病杂志,2008,18(6)：352-354
[57]王宏婷.灵芪胶囊对肿瘤新生血管及相关细胞因子表达水平的实验研究.黑龙江中医药大学,2007
[58]董立华.大黄素抗人肝癌HCCLM3细胞的作用及相关机制的研究.四川大学,2007.
[59]张晓,刘青光.细胞黏附分子在肝癌复发转移中的作用研究进展.现代肿瘤医学,2000,17(7)：1386-1389
[60]郑东升,郑小伟,张永军.健脾疏肝活血方对H22肝癌小鼠ICAM-1基因表达的影响.中华中医药杂志,2010,25(1)：138-140
[61]梁智勇,史景泉.缝隙连接细胞间通讯与肿瘤的关系.临床与实验病理学杂志,2001,17(5)：432-434
[62]黄凤婷,林春颖,范艳冰,等.虎杖对大鼠肝癌细胞CX43蛋白表达的影响.四川中医,2010,28(1)：49-51
[63]郭芙莲,赵健雄,白德成,等.扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22细胞间通讯的影响.四川中医,2008,26(10)：9-11
[64]李学东,尚西亮,刘锡文,等.三七总皂甙对人肝癌细胞缝隙连接细胞间通讯的调节机制.中国组织工程研究与临床康复,2007,11(38)：7609-7612
[65]郭晓林,姜雅秋,金清龙.多药耐药相关蛋白-3表达与肝癌耐药的相关性.中国老年学杂志,2010,30(11)：1539-1540
[66]杨盛力,彭静,陈孝平.中药逆转肝癌多药耐药的研究进展.肝胆外科杂志,2008,16(6)：477-479
[67]魏民,张阳德,何剪太.姜黄素逆转肝癌耐药性实验研究.中国现代医学杂志, 2008,18(7)：2442-2448
[68]胥雄阳,何松.苦参碱逆转人肝癌细胞株QGY/CDDP多药耐药性的实验研究.重庆医科大学学报,2008,33(4)：411-415
[69]李远航,朱科伦,曾文铤.三氧化二砷对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402作用相关机制的研究.临床医学工程,2009,16(6)：8-10
[70]黄宏思,黄卫彤,韦鹏涯.黄芪多糖联合顺铂治疗H22肝癌的实验研究.广西医科大学学报,2009,26(1)：19-21
[71]华海清,姜子瑜,杨爱珍.复方苦参注射液联合奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖与凋亡的影响.临床肿瘤学杂志,2010,15(1)：10-15
[72]陈鹊汀,刘智勤,蒋玉凤.当归补血汤对化疗药物5-Fu增效减毒的实验研究.北京中医药大学学报,2007,30(11)：757-760
[73]邓文英,罗素霞,周孟强.粉防己碱联合奈达铂抗人肝癌7402细胞作用的实验研究.中药材,2008,31(10)：1522-1525
[74]杜标炎,王慧峰,谭宇蕙.六味地黄丸对小鼠移植性肝癌自杀基因治疗的增效作用.广州中医药大学学报,2007,24(1)：132-137
[2]Venook AP, Papandreou C, Furuse J, et al.The incidence and epidemiology of hepatocellular carcinoma:a global and regional perspective. Oncologist,2010,15(S 4):5-13
[3]李霞,尤建良.中医药治疗原发性肝癌的临床研究进展.中医学报,2010,25(147)：221-223
[4]马琳.医院中药制剂的开发与进展.中国现代应用药学杂志,2008,25(7)：675-676
[5]何永强.医院制剂现状分析与发展思路.临床和实验医学杂志,2008,7(9)：167-168
[6]吕沅珊,李棣华,刘俊红.加快医院中药制剂向中药新药开发转化,促进中西医结合发展.中国中西医结合外科杂志,2010,16(1)：110-111
[7]陶韬,潘明阳.浅谈医院制剂现状及发展趋势.东南国防医药,2009,11(2)：182-183
[8]何福根,钟海均.中肝合剂预防化疗肝脏损害21例.浙江肿瘤,1998,4(2)：131
[9]程勋,曾莉.原发性肝癌中医药证治探讨.四川中医,2009,27(12)：39-40
[10]姜初明,龚黎燕.中肝合剂治疗中晚期原发性肝癌58例.中国中西医结合杂志,2005,25(9)：848-849
[11]叶丽红,程海波,章永红,等.原发性肝癌的中医治则与治法探讨.南京中医药大学学报,2010,26(1)：10-13
[12]李洁,张岱州,马梅芳.白花蛇舌草对肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的研究.中国中医药科技,2009,16(1)：28-29
[13]杨培民,代龙,刘英,等.白花蛇舌草多糖对S180和H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究.西北药学杂志,2010,25(1)：33-34
[14]杨连梅,胡荣,卜平.半枝莲提取物及黄酮成分抗肿瘤药理研究进展.中华中医药学 刊,2010,28(4)：751-753
[15]代志军,刘小旭,汤薇,等.半枝莲提取物对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响及其抑瘤作用.南方医科大学学报,2008,28(10)：1835-1836
[16]李洁.半枝莲对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究.辽宁中医药大学学报：2008,10(7),139-140
[17]李学臣,张涛,魏晓东.三棱提取物对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用.黑龙江医药科学,2010,33(5)：78
[18]王长安,高颖,张冬青,等.CM36抗肿瘤的实验研究.中华免疫杂志,1995,11(2)：109～113
[19]梁朝晖,张维彬,胡少为.莪术油对小鼠原位移植HepA肝癌细胞影响的研究.陕西中医,2009,30(1)：107-109
[20]李红枝,黄清松,陈伟强,等.仙鹤草抗突变和抑制肿瘤作用实验研究.数理医药学杂志,2005,18(5)：471-473
[21]马壵,李伟.中药剂量选择及对临床疗效的影响探讨.中医中药,2010,15：141
[22]段金廒,范欣生,宿树兰,等.中药及方剂量效关系的研究进展与思考.南京中医药大学学报,2009,25(4)：241-145
[23]Dai ZJ, Liu XX, Ji ZZ, et al. The Effect-enhancing and Toxicity-reducing Action of the Extract of Herba Scutellariae Barbatae for Chemotherapy in Hepatoma H22 Tumor-bearing Mice. J Trad Chin Med,2008,28(3):205-210
[24]胡玲,王洪琦,崔娜娟,等.白花蛇舌草对小鼠腹水H22肝癌细胞及T细胞的影响.现代消化及介入诊疗,2007,12：78-79
[25]郑同宝.扶正补虚方药治疗肝癌的实验及临床研究.广州中医药大学,2009
[26]沈毅,罗春梅.转化生长因子β1及其受体在非酒精性脂肪肝组织中表达的临床意义.校验医学与临床,2009,6(17)：1431-1432
[27]郭新珍,李怀斌,杨玉秀,等.TGF-β1、TβRⅡ及cyclinD1在大肠癌的表达及其意义.肿瘤防治研究,2005,32(1)：33-39
[28]张旭辉,付晓光,张志安,等.TGF-β1, VEGF蛋白在大肠癌组织中的表达及与大肠癌侵袭转移的关系.锦州医学院学报,2006,27(2)：7-10
[29]肖震宇,陈孝平,黄志勇. TGF-β1及其Ⅱ型受体在原发性肝癌中表达的研究.腹部外科,2005,18(2)：116-118
[30]李中华,赵晓芳.半枝莲水煎液对肝纤维化模型大鼠间质胶原和TGF-β1的影响.山东中医杂志,2010,29(1)：41-43
[31]刘军凯,牛丽红,安莲英.郁金药材中姜黄素类成分含量测定方法研究.广东微量元素科学,2009,16(12)：41-44
[32]何航,徐宏平,华海婴.姜黄素对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠肝组织TGF-β1及Caspase-3表达的影响.第四军医大学学报,2009,30(2)：100-103
[33]孟召伟,谭健. NF-κB在肿瘤发生机制和增敏治疗中的作用.山东医药,2010,50(1)：100-103
[34]胡晓东,张吉翔.NF-κB信号转导通路对细胞周期的调控.细胞生物学杂志,2004,26：495-498
[35]宋祖军,王少波,王琦,等.NF-κB的研究进展.世界急危重病医学杂志,2007,4(1)：1693-1696
[36]梁帅.NF-κB在肝细胞癌组织中的表达及意义.中南大学,2007
[37]邬林泉,戈华平,吴金宝.NF-κB在肝细胞肝癌组织中的表达及其意义.中国临床医学,2007,14(1)：17-18
[38]梁英健.姜黄素通过抑制NF-κB信号通路增敏阿霉素的抗肝癌作用.黑龙江医学,2010,34(10)：726-728
[39]莫莉,唐发清.细胞周期素CyclinD1异常与肿瘤.实用预防医学,2006,13(5)：1386-1388
[40]董俊峰,吴晓鹏.原发性肝细胞癌Survivin, CyclinD1的表达及其临床意义.普通外科进展,2007,10(2)：156-158
[41]姚忠强,欧超,周波. β-Catenin, cyclinD1及c-myc在肝细胞癌中的表达.肿瘤防治 研究,2006,33(12)：849-852
[42]郑波,张红.芪薏益肝煎对小鼠H22肝癌细胞CyclinD1及Caspase-3表达的影响.中国临床药学杂志,2010,19(3)：156-159
[43]吴滨,张红,霍达.化积益肝煎对小鼠肝癌H22细胞β-catenin和cyclinD1表达的影响.云南中医中药杂志,2009,30(5)：58-59
[44]Folkman J. Tumor angiogenesis, therapeutic implications. N Engl J Med,1971, 285(21):1182-1186
[45]仇玮.抗肿瘤药物抑制肿瘤血管生成的机制.基层医学论坛,2010,14：269-271
[46]唐求,袁昌劲,聂冰,等.中药抗肿瘤血管生成研究进展.肿瘤学杂志,2010,16(2)：155-157
[47]孙屹峰,张超贤,秦咏梅.原发性肝癌患者血清VEGF、TGF-β1表达水平与浸润转移关系的研究.临床肝胆病杂志,2010,26(2)：205-207
[48]郑璐,梁平,李靖,等. HDGF、VEGF在人肝细胞癌中的表达及其与肿瘤血管生成的关系.第三军医大学学报,2010,32(7)：680-683
[49]负可力.半枝莲多糖联合CTX对H22小鼠血清相关细胞因子的影响.黑龙江中医药大学,2009
[50]丁荣杰,唐德才.三棱、莪术对移植性肝癌大鼠VEGF的影响.中华实用中西医杂志,2005,18(18)：1047-1048
[1]王长青,雷久士.中医药治疗原发性肝癌的研究进展.实用临床医学,2010,16(1)：80-83
[2]张宁宁,饶荣生.原发性肝癌的外科治疗现状.实用临床医学,2008,9(1)：129-133
[3]梁超.原发性肝癌的中医药治疗现状.中国医院用药评价与分析,2010,10(1)：95-96
[4]骆丹,叶丽红.中药治疗肝癌在实验研究领域的发展现状及趋势.世界华人消化杂志,2008,16(26)：2964-2968
[5]田春桃,韩丽艳.鸦胆子油对肝癌细胞SMMC-7721增殖的抑制作用.现代肿瘤医学,2010,18(4)：654-656
[6]冯泳,孟庆华,何前松,等.小半夏加茯苓颗粒含药血清体外对肝癌细胞SMMC-7721生长增殖的影响.中国实验方剂学杂志,2010,16(5)：168-170
[7]张桂芳,吴丽敏,李艳博.徐长卿水提物抗肝癌作用初探.中华中医药学刊,2007,25(8)：1723-1724
[8]陈华,孙宇,崔晓楠.华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ的影响.中国癌症杂志,2010,20(3)：197-2
[9]王晶,王洪新,李红玉,等.秦皮乙素的制备及对人肝癌细胞SMMC-7721体外增殖的影响.中国现代应用药学杂志,2009,26(6)：439-442
[10]张微,邹玺,钱晓萍,等.土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用.中药新药与临床药理,2007,18(4)：257-259
[11]叶正青,梁重峰,丁海,等.参麦注射液对人肝癌SMMC-7721肿瘤细胞的作用.江苏医药,2009,35(6)：699-701
[12]戴关海,杨峰,童晔玲,等.虎杖提取物抗人肝癌细胞株HepG-2作用的实验研究.中国中医药科技,2009,16(5)：376-377
[13]王玉亮,吕晶,张磊,等.水龙骨体外抗肝癌作用研究.时珍国医国药,2009,20 (2)：415-416
[14]赵志敏,叶永安,杨先照,等.中药复方抗纤抑癌方和复方鳖甲软肝片不同采血时间点药物血清对HepG-2肝癌细胞增殖活性的影响.时珍国医国药,2010,16(3)：244-246
[15]靳秀芹,陈小囡,孔繁智.中药有效成分诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展.浙江中医杂志,2010,45(7)：540-542
[16]Kerr JER,Wyllie AH, et al.Apoptosis, a basic biological, phenomenon with wider implications in tissue kinetics[J]Br J Cancer,1972,26:239
[17]吉利,郝宏党,蔡玉文.健脾理气方药诱导小鼠Hca-F肝癌细胞凋亡的形态学研究.实用癌症杂志,2009,24(2)：111-113
[18]金艳书,吴学敏,娄金丽.苦参碱对人肝癌细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响.中国临床康复,2006,10(3)：107-109
[19]丁海玲.蟾蜍水提物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的初步研究.大连医科大学,2008
[20]徐波,朱光辉,夏金堂.中药癌痛克对人肝癌细胞HepG-2增殖、凋亡及Rb基因表达的影响.中国组织工程研究与临床康复,2007,11(12)：2253-2256
[21]晏雪生,李瀚曼,彭亚琴,等.芍药甙诱导人肝癌细胞系HepG-2凋亡的研究.中西医结合肝病杂志,2006,16(1)：18-20
[22]何芳,何黎.三氧化二砷联合人参皂甙Rg3对移植瘤肝癌细胞凋亡的影响J].热带医学杂志,2009,9(1)：29-31
[23]何耿劲,赵慧慧.姜黄素诱导人肝癌细胞株Bel-7402凋亡.江苏医药,2010,36(8)：926-928
[24]赵旭林,徐国昌,贺利民,等.槲皮素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的实验研究.实用心脑肺血管病杂志,2010,18(3)：310-311
[25]顾远晖,李一平,李安强.槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制及细胞凋亡的诱导作用.兰州大学学报,2010,36(3)：9-16
[26]冯兵,史传文,郑广娟.罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌TACE后HIF-1a和Bcl-2表达的影响.兰州大学学报,2010,36(3)：9-16
[27]Greider C. W., Blackburn E. H.. Identification of a specific telomere terminal transferase activity in Tetrahymena extracts.Cell,1985,43(2 Pt 1):405 413
[28]刘永仙,刘晓斌,王亚萍.肝癌组织端粒酶的表达.第四军医大学学报,2009,30(16)：1463
[29]许淼淼,李斌,秦成勇.端粒酶与肝癌的关系.中国误诊学杂志,2006,6(23)：4533-4534
[30]何松,左国庆,张燕,等.苦参碱对肝癌细胞HepG2端粒酶活性调控的体外研究.重庆医学,2008,37(3)：291-295
[31]丁向萍,马力,魏书堂,等.虫草素诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡及对端粒酶活性影响的研究.中华肿瘤防治杂志,2008,15(2)：109-113
[32]黄廷荣.膈下逐瘀汤加减方抗肝癌作用的机理研究.湖北中医学院,2008.
[33]骆丹.抗癌扶正方及拆方抗肝癌有效成分的筛选及机制研究.南京中医药大学,2009
[34]赵建雄,郭芙莲,白德成,等.扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响.中西医结合学报,2006,4(3)：271-274
[35]季宇彬,高世勇.龙葵碱诱导HepG-2细胞凋亡的线粒体通路研究.中国药学杂志,2008,43(4)：272-275
[36]赵瑞杰.紫草素诱导肝癌细胞凋亡及其机制的初步探讨.西北农林科技大学,2010
[37]陈龙飞,陈涛.中药诱导肝癌细胞分化的研究概况.中华实用中西医杂志,2003,3(16)：2123-2125
[38]幕晓艳,赵爱光.中药诱导肝癌细胞分化的研究进展.中西医结合学报,2007,5(1)：92-96
[39]万旭英,罗明,贺平,等.苦参碱及氧化苦参碱体外对人肝癌细胞的诱导分化作用.中国药理学通报,2009,25(7)：977-979
[40]郭霞,郭昱.黄芩甙体外对人肝癌细胞BEL-7402的诱导分化作用.世界华人消化杂志,2008,16(10)：1119-1123
[41]赵海磊,刘成,赵爱光.中药复方胃肠安血清诱导肝癌SMMC-7721细胞分化.世界华人消化杂志,2003,11(9)：1345-1348
[42]杨金霞,王学美.中药抗肝癌免疫调节的研究进展.中国中药杂志,2007,32(4)：281-284
[43]许杜鹃,陈敏珠.黄芪多糖的抑瘤作用及其机制.中国医院药学杂志,2005,25(10)：923-925
[44]张燕,沈成义.大蒜素抗肝癌的免疫机制研究.中国病理生理杂志,2009,25(2)：392-395
[45]韦翠屏,汤琪云,梁中琴.沙苑子黄酮抗肝癌生长作用及对免疫功能的影响.肿瘤,2009,29(12)：1112-1115
[46]于赫,李冀,齐彦.五味子多糖对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其免疫学机理初探.中医药信息,2010,27(2)：26-27
[47]于赫,李冀,李淑莲.五味子多糖对H22荷瘤小鼠血清Zn、Se水平变化的干预作用研究.中医药信息,2010,27(3)：25-26
[48]叶义标,陈涛.肝癌血管生成与抗血管生成治疗的研究进展.中国普外基础与临床杂志,2009,16(10)：861-865
[49]刘少杰,沈文律,刘晓珑.中药扶正抗癌汤抗肿瘤血管形成治疗肝癌的实验研究.世界华人消化杂志,2005,13(7)：908-910
[50]雒琳.新加良附方抑制小鼠移植性肝癌效应与机制研究.北京中医药大学,2008.
[51]盛庆寿.青蒿琥酯对H22肝癌小鼠的抑瘤作用即对肿瘤组织VEGF、FasL的影响.广州中医药大学：2008
[52]石颖.中药复方益气活血方抗肝癌作用及机理研究.成都中医药大学,2004
[53]黄修燕,黄自丽,汤钊猷,等.中药复方“松友饮”对高转移人肝癌裸鼠原位移植瘤的抑制作用.中华中医药杂志,2010,25(2)：234-237
[54]王郁金,苏衍进.白术挥发油对小鼠H22肝癌血道转移的抑制作用及机理研究.陕西中医,2009,30(6)：735-736
[55]张栋,孙静.益气养阴方对小鼠肝癌血道转移的影响.时珍国医国药,2009,20(10)：2446-2447
[56]樊讯,成肇仁,李家庚,等.麝黄消瘤方对小鼠肝癌血管生成的抑制作用.中西医结合肝病杂志,2008,18(6)：352-354
[57]王宏婷.灵芪胶囊对肿瘤新生血管及相关细胞因子表达水平的实验研究.黑龙江中医药大学,2007
[58]董立华.大黄素抗人肝癌HCCLM3细胞的作用及相关机制的研究.四川大学,2007.
[59]张晓,刘青光.细胞黏附分子在肝癌复发转移中的作用研究进展.现代肿瘤医学,2000,17(7)：1386-1389
[60]郑东升,郑小伟,张永军.健脾疏肝活血方对H22肝癌小鼠ICAM-1基因表达的影响.中华中医药杂志,2010,25(1)：138-140
[61]梁智勇,史景泉.缝隙连接细胞间通讯与肿瘤的关系.临床与实验病理学杂志,2001,17(5)：432-434
[62]黄凤婷,林春颖,范艳冰,等.虎杖对大鼠肝癌细胞CX43蛋白表达的影响.四川中医,2010,28(1)：49-51
[63]郭芙莲,赵健雄,白德成,等.扶正抑瘤颗粒对小鼠肝癌细胞H22细胞间通讯的影响.四川中医,2008,26(10)：9-11
[64]李学东,尚西亮,刘锡文,等.三七总皂甙对人肝癌细胞缝隙连接细胞间通讯的调节机制.中国组织工程研究与临床康复,2007,11(38)：7609-7612
[65]郭晓林,姜雅秋,金清龙.多药耐药相关蛋白-3表达与肝癌耐药的相关性.中国老年学杂志,2010,30(11)：1539-1540
[66]杨盛力,彭静,陈孝平.中药逆转肝癌多药耐药的研究进展.肝胆外科杂志,2008,16(6)：477-479
[67]魏民,张阳德,何剪太.姜黄素逆转肝癌耐药性实验研究.中国现代医学杂志, 2008,18(7)：2442-2448
[68]胥雄阳,何松.苦参碱逆转人肝癌细胞株QGY/CDDP多药耐药性的实验研究.重庆医科大学学报,2008,33(4)：411-415
[69]李远航,朱科伦,曾文铤.三氧化二砷对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402作用相关机制的研究.临床医学工程,2009,16(6)：8-10
[70]黄宏思,黄卫彤,韦鹏涯.黄芪多糖联合顺铂治疗H22肝癌的实验研究.广西医科大学学报,2009,26(1)：19-21
[71]华海清,姜子瑜,杨爱珍.复方苦参注射液联合奥沙利铂对人肝癌细胞株SMMC-7721增殖与凋亡的影响.临床肿瘤学杂志,2010,15(1)：10-15
[72]陈鹊汀,刘智勤,蒋玉凤.当归补血汤对化疗药物5-Fu增效减毒的实验研究.北京中医药大学学报,2007,30(11)：757-760
[73]邓文英,罗素霞,周孟强.粉防己碱联合奈达铂抗人肝癌7402细胞作用的实验研究.中药材,2008,31(10)：1522-1525
[74]杜标炎,王慧峰,谭宇蕙.六味地黄丸对小鼠移植性肝癌自杀基因治疗的增效作用.广州中医药大学学报,2007,24(1)：132-137