水稻成熟胚高频再生体系的建立及其生理生化特性的研究
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摘要
高频再生体系是水稻遗传转化的基础，本实验以水稻成熟胚为外植体，研究细胞分裂素6-BA对愈伤组织诱导和分化的影响，以期建立一个高频再生体系，同时对愈伤组织诱导和分化过程中的生理生化特性进行研究，为探讨愈伤组织分化机理提供理论依据。研究结果如下：
(1) 在含2，4-D的诱导培养基中添加适当浓度的6-BA能显著提高水稻成熟胚的出愈率和愈伤组织质量。253出愈率达到92.9％。此类愈伤组织极易分化，在含不同组成和不同比例植物生长调节剂的分化培养基中均可分化再生，最高分化率达100％，最高成苗率达64.6％，易生根，易成活，再生苗能正常结实。
(2) 对其诱导机理的研究发现，6-BA和2，4-D共同作用诱导产生的愈伤组织过氧化物酶、酯酶、超氧化物歧化酶同工酶均有新酶带出现。这些酶带与愈伤组织分化有关。
(3) 不同基因型水稻愈伤组织分化过程中，过氧化物酶、酸性磷酸酯酶的活性变化与分化有关；过氧化物酶和酯酶同工酶谱均有相对泳动率相同的酶带出现或消失，这两种酶可以作为细胞分化的标志酶。
(4) 分化过程中愈伤组织可溶性蛋白质、细胞壁蛋白质和可溶性总糖的含量均有相应的变化，分化第5天时变化最大。
In this experiment, the effect of 6-Benzyladenine (6-BA) on callus inducement and regeneration from mature embryos of 253 and Bo-B, and the physiological and biochemical characteristics during the callus inducement and differentiation were studied .The results were showed as follows:
(1)Induced medium containing of 6-BA and 2,4-D can remarkably improve the induction rate and the quality and the regeneration rate of callus from mature embryos .Established a high frequency regeneration system.
(2)There were specific bands appeared in the isoenzyme pattern of peroxidase(POD), esterase(EST) and Superoxide Dismutasei(SOD) in the callus which induced by 2,4-D and by 2,4-D with 6-BA . These new bands were high correlated with the gene express during differentiation.
(3)The change of activities of POD and acidic phosphatase (ACP) were similar in different genetic callus. The activities were correlated with callus differentiation. POD and EST isoenzyme pattern analyses showed that the same
bands appeared in different genetic callus during differentiation of callus.
(4) The content of soluble protein, cell wall protein and soluble total sugar of different genetic callus changed accordingly during differentiation .
(1) 在含2，4-D的诱导培养基中添加适当浓度的6-BA能显著提高水稻成熟胚的出愈率和愈伤组织质量。253出愈率达到92.9％。此类愈伤组织极易分化，在含不同组成和不同比例植物生长调节剂的分化培养基中均可分化再生，最高分化率达100％，最高成苗率达64.6％，易生根，易成活，再生苗能正常结实。
(2) 对其诱导机理的研究发现，6-BA和2，4-D共同作用诱导产生的愈伤组织过氧化物酶、酯酶、超氧化物歧化酶同工酶均有新酶带出现。这些酶带与愈伤组织分化有关。
(3) 不同基因型水稻愈伤组织分化过程中，过氧化物酶、酸性磷酸酯酶的活性变化与分化有关；过氧化物酶和酯酶同工酶谱均有相对泳动率相同的酶带出现或消失，这两种酶可以作为细胞分化的标志酶。
(4) 分化过程中愈伤组织可溶性蛋白质、细胞壁蛋白质和可溶性总糖的含量均有相应的变化，分化第5天时变化最大。
In this experiment, the effect of 6-Benzyladenine (6-BA) on callus inducement and regeneration from mature embryos of 253 and Bo-B, and the physiological and biochemical characteristics during the callus inducement and differentiation were studied .The results were showed as follows:
(1)Induced medium containing of 6-BA and 2,4-D can remarkably improve the induction rate and the quality and the regeneration rate of callus from mature embryos .Established a high frequency regeneration system.
(2)There were specific bands appeared in the isoenzyme pattern of peroxidase(POD), esterase(EST) and Superoxide Dismutasei(SOD) in the callus which induced by 2,4-D and by 2,4-D with 6-BA . These new bands were high correlated with the gene express during differentiation.
(3)The change of activities of POD and acidic phosphatase (ACP) were similar in different genetic callus. The activities were correlated with callus differentiation. POD and EST isoenzyme pattern analyses showed that the same
bands appeared in different genetic callus during differentiation of callus.
(4) The content of soluble protein, cell wall protein and soluble total sugar of different genetic callus changed accordingly during differentiation .
引文
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