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冬虫夏草无性繁殖研究及其产物对HepG2细胞凋亡的影响
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摘要
冬虫夏草十分珍贵,资源奇缺。为了开发冬虫夏草的替代品,本文开展了冬虫夏草无性型菌株的研究及其人工培植。通过野外调查掌握了冬虫夏草寄主昆虫的生物学特性。冬虫夏草寄主昆虫整个变态周期内呈幼虫、蛹、成虫、卵四种形态;幼虫常年土栖;独住,三龄以上有互咬的习性;植食性且食谱广泛;对温度敏感;各龄虫对虫草菌敏感,病虫害严重。通过人工模拟实验证实,幼虫以休眠状态在冻土层越冬,身体皱缩、发黄。通过病理切片、显微观察发现,虫草僵虫体内菌丝通过毛囊薄弱处成簇穿出体外,通过包裹身体周围的土壤而形成膜皮;有些皮肤毛囊增厚的僵虫没有膜皮,
     通过子囊孢子的单孢子培养,发现菌落早期形成穿透钉结构。
     甘肃天祝虫草海拔较低,体型较小,采用PCR及DNA测序的方法,对其分离株的rDNA ITS和5.8S RNA全序列进行分析,结果表明分离株与中国被毛孢相似性为98%以上。
     冬虫夏草菌生长速度极慢,实验研究发现,通过人工断裂菌丝增加菌丝生长点和浅层培养技术能极大地提高冬虫夏草无性型菌丝的产量,产业化生产的结果也对此结论做出了进一步证实。
     用结晶紫染色法检测细胞存活率结果表明,冬虫夏草菌丝液可以显著抑制HepG2细胞的生长,并呈浓度-效应关系;用AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况并经流式细胞仪测定,结果表明冬虫夏草菌丝液可诱导HepG2细胞的凋亡,也呈浓度-效应关系。采用DHE荧光探针进行检测,冬虫夏草菌丝液确实可以诱导细胞产生ROS, ROS抑制剂NAC对冬虫夏草诱导细胞凋亡有明显的保护作用;采用蛋白免疫印迹法对HepG2细胞中的蛋白表达进行分析,随着浓度的增加,p-JNK的蛋白表达量明显上升,Bcl-2的表达量逐渐下降;揭示ROS的促凋亡作用可能与激活JNK通路和下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关,其相关性有待进一步研究。
     通过人工养殖对比试验表明,琼脂加水溶化凝固后,可代替土壤养殖冬虫夏草寄主幼虫,优势明显。
     冬虫夏草寄主幼虫染菌试验结果表明,自然情况下,冬虫夏草菌的感染形式为子囊孢子和分生孢子,感染途径为通过外伤和消化道,其中子囊孢子主要依靠外伤感染,分生孢子主要通过消化道感染。
Ophiocordyceps sinensis is very precious and its resources are scarce.The phorozoon of ophiocordyceps sinensis and its artificial cultivation were tesed in this study to develop cordyceps substitute. The biological characteristics of host insect includes worm-shaped sclerotium and weed-like stroma of ophiocordyceps sinensis was mastered through field investigation. The whole metamorphosis cycles of host insect of ophiocordyceps sinensis were four morpha included larva, pupa, adult and egg; larvae perch in soil perennially; it lived alone with habit of biting each other after3instar; it was phytophagous with wide recipe and sensitive to temperature; each age's insect was sensitive to Hirsutella sinensis, plant diseases and insect pests were serious. Artificial simulated experiment confirmed that larvae overwintered in a dormant state with its body shrinked, and its body became yellow. Hypha in body of bombys batryticatus went through in clumps via the weak point of hair follicle, and formed membrane by packing surrounding soil detected by pathological section and microscope; some bombys batryticatus have no membrane due to the skin in hair follies became more solid and thick so that hyphae couldn't get through.
     We found the penetration pegs in the early time of colony through the monospore culture of ascospore.
     Tianzhu ophiocordyceps sinensis in Gansu had lower altitude and smaller size, the complete sequence of isolate rDNA ITS and5.8S RNA was analyzed by the methods of PCR and DNA sequencing, the result showed that the isolates had similar characteristics with Hirsutella sinensis over98%.
     Ophiocordyceps sinensis grew very slow,.However,the current study indicated that breaking hypha artificially increased growth point and shallow cultivation could vastly improve the production of agamotype hypha. Furthermore, industrialization result confirmed the conclusion.
     Crystal violet staining assay was used to observe the cell viability, which indicated that HepG2cells could be inhibited obviously by ophiocordyceps sinensis hyphae solution with a dose-dependent manner. Then apoptosis of HepG2cell were assessed by Annexin V-FITC/PI staining and flow cytometry analysis, the results showed that HepG2cells could be induced to apoptosis by ophiocordyceps sinensis hyphae solution, also with a dose-dependent manner. Further conformation detected by fluorescent chemosensors was that ophiocordyceps sinensis hyphae solution could induce HepG2cell to produce ROS, meanwhile ROS inhibitor NAC could significantly prevent the cell from apoptosis mediated by ophiocordyceps sinensis, and subsequently, western-blot was used to analyse the expression of p-JNK. and Bcl-2proteins. With ascending concentrations,, the expression of p-JNK increased, while Bcl-2decreased. It revealed that the pro-apoptosis of ROS may be due to the activation of JNK pathway and down-regulation of Bcl-2expression, and their correlation needed further research.
     According to the result of artificial cultivation contrast test, agar can replace the soil to cultivate the host larva of ophiocordyceps sinensis and it had an advantage over the soil.
     The result of the host larva of ophiocordyceps sinensis infection test showed that the infection form of ophiocordyceps sinensis included ascospore and conidium. The routes of infection of ascospore and conidium were trauma and digestive tract,respectively.
引文
[1]Alexopoulos CJ.Mims CW,Blackwell M. Introductory Mycology (4th ed).姚一建,李玉,主译北京农业出版社,2002:1--771.
    [2]Kirk.PM,Cannon PF,David JC.et al.Dictionary of the Fungi (9th edition). Wallingford:CAB International,2001:1-655.
    [3]刑来君,李明春.编著普通真菌学.高等教育出版社.北京:2003,327-354.
    [4]张智,谢意珍,李森柱,等.冬虫夏草研究进展.微生物学杂志.2002;22(5):51-62.
    [5]张平.虫草属真菌研究进展.生物学杂志.2003,20(6):43-45.
    [6]薛召东,杨瑞林,易永健.冬虫夏草及其研究与利用.中国麻业.2002,24(3):50-51.
    [7]吴仪洛(清).本草从新.上海:上海科技出版社,1958.36.
    [8]赵学敏(清).本草纲目拾遗.京:人民出版社,1958,130.
    [9]龙綮新.冬虫夏草的研究与利用.昆虫天敌,1992,14(2):96-100.
    [10]国家药典委员会编.中华人民共和国药典一部.北京:化学工业出版社,2000.86.
    [11]Zhu JS,Halpern GM,Jones K. The scientific rediscovery of anancient Chinese herbal medicine:Cordyceps sinensis:part I J Altern Complement Med4.1998, (3):289-303.
    [12]徐锦堂.中国药用真菌学.北京:北京医科大学,中国协和医科大学联合出版社,1997,355-387.
    [13]梁佩琼.中国冬虫夏草.微生物学杂志.1986,12(6):68-72.
    [14]董洪新,吕作舟.冬虫夏草的研究概况.中国食用菌2002,2 1:(2):5-7.
    [15]小林.义雄,清水大典.冬虫夏草菌图普.日本大阪:保育社.1983,1-280.
    [16]向敏.冬虫夏草生物学教学.2004,29(1):56-57.
    [17]Johnso Randall K et al, Biochem Pharmocol 27 (15):1973,1978.
    [18]王家玉.冬虫夏草的研究简介.生物学通报1997.32(4):45-46.
    [19]杨世海,张红兵,赵英.冬虫夏草研究的新进展.中草药1994,25(9):483-492.
    [20]郭宏春,高继全等.冬虫夏草研究进展.微生物学杂志2003,23(1):50-55.
    [21]暴增海.我国的虫草资源及其开发利用现状与展望.昆虫天敌,1994,12(1):49-53.
    [22]李志超,杨姗姗.食药用菌生产与消费指南.北京:中国农业出版社,1997,289-295
    [23]严林.影响贵德蝠蛾种群数量变动的主导因素分析.江苏草业科学,2001,(5):66-68.
    [24]周兴民.冬虫夏草.植物杂志.1978,(1):14
    [25]罗玉秀.冬虫夏草的研究现状.青海大学学报(自然科学版).2003,21(2):38-40.
    [26]陆龙喜,刘淑梅,时连根.冬虫夏草研究的新进展.生物学通报,2002,37(6):4-6.
    [27]刘飞,伍晓丽,陈仕江,尹定华,曾纬,钟国跃,.冬虫夏草人工培殖的研究概况[J].中草药,2007,(2).2001-2006
    [28]曾纬,尹定华,李泉森,李黎,.冬虫夏草菌侵染及寄生阶段的生长发育研究[J].菌物学报,2006,(4):464-450.
    [29]杨跃雄,杨大荣等.1989.虫草菌感染虫草蝠蛾幼虫的研究.动物学研究,10(3):225-229.(CSCD)
    [30]涂永勤,张德利,曾纬,陈仕江,尹定华,.蝠蛾属幼虫感染冬虫夏草菌的实验研究[J].食用菌,2010,(3):16-17.
    [31]王忠,马启龙等.冬虫夏草全人工感染试验结果.甘肃农业科技,2001,(7):40-41
    [32]杨跃雄,陆源等.氨基酸和微量元素在虫草菌感染虫草蝠蛾幼虫中的影响.动物学研究,1990,11(3):237-242
    (33]刁治民.青海冬虫夏草资源及生物学特性的初步研究.生物学杂志,1996,13(2):20-22.
    [34]朱斗锡.冬虫夏草栽培技术.江苏,食用菌.1993,14(4):36-37.
    [35]藏穆,虫草菌.自然杂志1979,2(7):429.
    [36]张三元,胡丽云,万战国.冬虫夏草生长条件的初步研究.微生物学报,1986,13(2):56-58
    [37]沈南英等.冬虫夏草的初步研究.中草药1980,11(6):273-275
    [38]何道珍,张显耻.冬虫夏草的显微观察.青海畜牧兽医杂志,2000,30(1)6-7.
    [39]李延宝,肖志明等.关于虫草的研究.中草药,1981,12(11);45-48,31.
    [40]尹定华,唐雪梅.冬虫夏草人工培殖研究的进展.中国中药杂志,1995,20(12):707-709.封三
    [41]陈仕江,尹定华,钟国跃.冬虫夏草寄主比如蝠蛾卵的生物学研究[J].中国中药杂志,2003,(11):1102-1103.
    [42]刘飞,伍晓丽等.自然干燥对冬虫夏草寄主蝠蛾卵孵化的影响[J].昆虫知识,2008,(2):293-297.
    [43]涂永勤,张德利等.温度对小金蝠蛾卵孵化率的影响[J].时珍国医国药,2010,(7):1776-1777.
    [44]陈健,高祖紃,余虹.斜脉蝠蛾卵的形态及卵壳超微结构的观察.浙江大学学报(农业与生命科学版),1994,(1):174-177.
    [45]夏邦颖;试论昆虫卵的分类特征;昆虫分类学报;1980年04期:160-163.
    [46]陈仕江,黄天福等;贡嘎蝠蛾卵的扫描电镜和生物学观察;四川动物;1997,(3):110-113.
    [47]张宗毫,李玉玲等.青海拉脊蝠蛾受精卵孵化率试验.特产研究,2009,(1):19-21.
    [48]曾纬,银福军.贡嘎蝠蛾初孵幼虫迁移行为观察[J].昆虫知识,2004,(3):265-267.
    [49]杨跃雄,何远辉,杨大荣等.1992.微量元素对虫草蝠蛾幼虫生长发育的影响.动物学研究,13(2):145~151.(CSCD)
    [50]刘飞,伍晓丽等.冬虫夏草寄主幼虫人工饲养初期的成活率研究[J].中国中药杂志,2008,(6):699-701.
    [51]刘飞,伍晓丽等.不同饲养方式对冬虫夏草寄主幼虫初期成活的影响[J].时珍国医国药,2009,(6):1329-1330.
    [52]杨大荣等.冬虫夏草寄主昆虫的饲养方法.资源昆虫.1987.2(4):32-34.
    [53]龙勇诚,杨大荣等.虫草蝠蛾幼虫空间分布型的研究.动物学研究,1987.8(1):47-54.(CSCD)
    [54]沈发荣,杨大荣等.白马蝠蛾幼虫食性的观察.昆虫知识,1990,27(1):36-37.
    [55]李梨,陈仕江等.西藏那曲冬虫夏草寄主昆虫幼虫饲养研究.重庆中草药研究,2011,(2):27-29
    [56]刘飞,伍晓丽等.病虫害综合防治技术对冬虫夏草寄主幼虫生长发育的影响.中国中药杂志,2008,(23):56-59.
    [57]马少丽,李玉玲等.冬虫夏草寄主蝙蝠蛾幼虫肠道菌群分析.中国草地学报,2010,3(z1)
    [58]尹定华,傅善全.贡嘎蝠蛾蛹的生物学特性.特产研究,1993,(1):34-39.
    [59]杨大荣等.云南虫草蝠蛾生态学研究Ⅰ.区域分布和生态地理分布.动物学研究,1987,8(1):1~11.(CSCD)
    [60]刘飞,张德利等.自繁第1代冬虫夏草寄主蝠蛾的生物学特性研究[J].时珍国医国药,2010,(11):98-100.
    [61]涂永勤,张德利等,.四川小金蝠蛾生物学特性研究[J].应用昆虫学报,2011,(4):67-70.
    [62]刘飞,伍晓丽等.引种云南产冬虫夏草寄主蝠蛾的生物学特性研究[J].中国中药杂志,2009,(4):34-39.
    [63]刘飞,伍晓丽等.冬虫夏草寄主昆虫的生物学特性研究[J].时珍国医国药,2008,(12):24-27.
    [64]尹定华,陈仕江等.西藏冬虫夏草寄主比如蝠蛾生物学特性的研究[J].特产研究,2004,(2):33-37.
    [65]马开森,刘飞等.冬虫夏草寄主蝠蛾成虫的生活习性研究[J].中国中药杂志,2007,(16):65-67.
    [66]杨大荣等.中国蝠蛾属昆虫的种类和地理分布研究.昆虫学报,1996,39(4):413-423。(CSCD)
    [67]杨大荣等.白马蝠蛾生殖习性的研究.动物学研究,1991,12(4):361-366.(CSCD)
    [68]杨大荣等.云南虫草蝠蛾生态学研究Ⅰ.区域分布和生态地理分布.动物学研究,1987,(CSCD)
    [69]张永杰.冬虫夏草菌的生物学研究.科学出版社,2012-04-01,ISBN:9787030340726
    [70]李泉森,曾伟.冬虫夏草菌世代交替的初步研究
    [71]罗信昌.冬虫夏草研究进展.中国食用菌,13(4):3-5.
    [72]沈南英,曾璐等.冬虫夏草真菌的分离.食用菌,1983,(5)1-3.
    [73]王忠,马启龙,乔正强.甘肃冬虫夏草菌分离培养研究.甘肃农业科技,2001,(7):43-44.
    [74]刘锡进,郭英兰等.冬虫夏草菌无性阶段的分离和鉴定.真菌学报,1989,8(1)35-40.
    [75]刘彦威,苏敬良等.冬虫夏草无性型的分离培养和菌丝显微结构的观察.黑龙江畜牧兽医,2005,(10):67-69.
    [76]舒畅,杨大荣等. 阔孢虫草生活史的研究.北京:中国农业科技出版社.中国虫生真菌研究与应用(第三卷).1993.103-106.
    [77]蒋毅,姚一建.冬虫夏草无性型研究慨况.菌物系统,2003,2 2(1):161:176.
    [78]梁佩琼,陆大京.冬虫夏草生物学研究新进展.中国食用菌,1992,11(2):2-3.
    [79]赵锦,王宁,陈月琴,等.冬虫夏草无性型的分子鉴别.中山大学学报(自然科学版),1999,38(1):1121-123.
    [80]Chen Y Q, Wang N, Qu L H, et al. Determination of the anamorph of Cordyceps sinensis i nferred from the analysis of the ribosomal DNA internal transcribed spacers and 5.8S rDNA. Biochemical Systematics and Ecology,200129:597-607.
    [81]Yue-Qin C, Ning W, Hui Z, Liang-Hu Q. Differentiation of medicinal Cordyceps species by rDNA ITS sequence analysis. Planta Med.2002 Jul;68(7):635-9.
    [82]KANG Ji-Chuan,LIANG Zong-Qi,LIU Ai-Yang et al Molecular Evidnce of Polymorphism in Cordyceps Based on 5.8SrDNA and ITS2Sequences.Mycosystema.2000;19(4):492-497.
    [83]章卫民,李泰辉,陈月琴等.西藏冬虫夏草无性型的分子生物学研究.微生物学通报.2002; 29(3)54-58.
    [84]张云武,陈永久,沈发荣等.滇西北冬虫夏草和阔孢虫草的遗传分化研究.菌物系统.1999;18(2):176-183.
    [85]李增智,黄勃,李春如等.确证冬虫夏草无性型的分子生物学证据Ⅰ.中国被毛孢与冬虫夏草之间的关系.菌物系统,2000,19:60-64.
    [86]Y. Ito, T. Hirano. The determination of the partial 18 S ribosomal DNA sequences of Cordyceps species. Letters in Applied Microbiology.1997,25:239-242
    [87]K T Cheng, C H Su, H C Chang, J Y Huang. Differentiation of genuines and counterfeits of Cordyceps species using random amplified polymorphic DNA.Planta Med.1998,64
    [88]徐丽,王小平,张雪峰.冬虫夏草与其他品系虫草及其混伪品的18S rRNA基因测序鉴别研究.中国医药指南,2012,10(12):413-415
    [89]朱佳石,郭英兰等.冬虫夏草成熟过程中中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉DNA共存及竞争增殖力-化学成分变化.菌物研究,2007,5(4):214-224.
    [90]杨金玲,肖薇.蝙蝠蛾拟青霉与冬虫夏草关系的分子系统学研究.药物学报,2008,43(4):421-426.
    [91]Xiao Wei, Yang Jin-Ling, Zhu Ping*, Cheng Ke-Di, He Hui-Xia, Zhu Hui-Xin, Non-support of species complex hypothesis of Cordyceps sinensis by targeted rDNA-1TS sequence analysis. Mycosystema.(菌物学报英文专辑)2009,28(5):724-730.
    [92]刘作易,梁宗琦,刘爱英.冬虫夏草子囊孢子萌发及其无性型观察.贵州农业科学,2003,31(1):3-8
    [93]李黎,尹定华,陈仕江.康定冬虫夏草子囊孢子的生长发育[J].中国中药杂志,2000,(8):501-502
    [94]李黎,尹定华,陈仕江,扎西,孙建华,小扎西.冬虫夏草子囊孢子的弹射[J].中药材,2000,(9);515-517
    [95]李玉玲.冬虫夏草子囊孢子的初步研究.中国食用菌,2002,21(4):9-10
    [96]乔正强,张忠广等.冬虫夏草菌子囊孢子萌发试验结果初报.甘肃农业科技,2003,(4):51-52
    [97]宁美英,李青山.冬虫夏草的化学成分分析测定方法.山西医科大学学报,2000,32(6):548-560。
    [98]张显科,王玉柱,刘文霞。蛹虫草的研究Ⅰ Ⅴ蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较.辽宁大学学报,1996,23(4): 80-83.
    [99]沈晓云,李兆兰,田军.冬虫夏草与虫草菌丝有效成分分析比较.山西大学学报,1998,21(1):80-85.
    [100]李楠,宋健国等.蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较。吉林农业大学学报,1995,17(增刊):80-83.
    [101]马冰如,何玲等,蛹虫草与冬虫夏草化学成分的比较.中国食用菌,1994,13(1):34-36.
    [102]焦彦朝,梁宗琦,刘爱英.虫草生物活性物质研究概况.贵州农业科学,1990,(3):53-58.
    [103]吴迎春,吴喜民等.不同菌种/菌株发酵虫草菌丝体的化学成分比较。时珍国医国药,2010,21(5):1060-1061.
    [104]王征,刘建利.冬虫夏草化学成分研究进展.中草药,2009,40(7):1157-1160.
    [105]程维蓉,段丽红,郑必胜.冬虫夏草及其多糖的研究与应用进展.现代食品科技,2006,22(4):284-286.
    [104]张建军,徐洪利等.虫草多糖结构及免疫功能研究进展.安徽农业科学,2009,37(6):12542-12544.12594.
    [106]王普,郑明等.虫草多糖的化学结构及药理活性研究进展.浙江工业大学学报,2010,38(2):129-133.172.
    [107]肖建辉.虫草属真菌多糖制备及化学结构的研究现状与思考.中草药,2008,39(3):454-460.
    [108]余晓斌,罗长才,缪静.冬虫夏草多糖提取工艺的优化.中草药,2002,33(12):1086-1087.
    [109]袁建国,程显好,侯永勤,等.冬虫夏草多糖的研究开发.精细与专用化学品,2002,7:15-17.
    [110]白云娥,李青山,王毅,等.冬虫夏草多糖的含量测定.山西医科大学学报,2000,31(2):129-130.
    [111]许周善,周晓燕.冬虫夏草多糖的研究进展.工业微生物,2000,30(1):56-57.
    [112]袁建国,程显好,侯永勤,等.功能因子冬虫夏草多糖的研究开发.中国食品添加剂,1999,2:18-22.
    [113]纪莎,施小兵,易骏.冬虫夏草化学成分研究概况.福建中医学院学报,1999,9(2):46-47
    [114]刘飞,曾纬等.人工冬虫夏草的氨基酸含量及其营养价值评价.氨基酸和生物资然,2009,.(4):56-59
    [115]王丽,宋志峰.HPLC测定不同产地冬虫夏草中氨基酸的含量.中成药,2010,32(6):984-987.
    [116]郭亚东,杨敏.冬虫夏草中甘露醇和氨基酸的含量测定.昆明师范高等专科学校学报,2007,29(4):35-36.
    [117]朱昌烈,新津胜.冬虫夏草中多胺类成分的分析.中草药,1993,24(2):71-72
    [118]方士英,姚宏伟,李俊.冬虫夏草抗炎免疫调节作用的研究进展.安徽医药,2004,8(3):163-166
    [119]张传开,袁盛璐.冬虫夏草及其人工菌丝的免疫药理学研究进展.首都医科大学学报,1997,18(3):287-290.
    [120]朱朝阳,刘高强.冬虫夏草及其产物免疫调节作用研究进展.食品科技,2011,36(11):69-72.
    [121]徐曦,陈国桢;冬虫夏草对免疫及造血功能影响的实验研究;湖南医学;1995,12(4):202-204.
    [122]龚晓健,季晖.人工冬虫夏草对小鼠免疫功能的影.中国药科大学学报,2000,31(1):21.
    [123]魏涛,唐粉芳等.冬虫夏草菌丝体改善肺免疫功能的研究.食品科学,2002,(8):276-279.
    [124]姜平,黄淑光,吴国民,等.冬虫夏草抗动物肿瘤的研究.青海医药,1982;(3):23-24.
    [125]吴德丰,郑志雄,张冀,等.冬虫夏草对体外培养的人子宫颈癌细胞的抑制作用.癌症;1986,5(2):337-340.
    [126]张淑兰,孙云汉,刘小平,等冬虫夏草抗小鼠Lewis肺癌作用的研究.中华肿瘤杂志,1987;(2):53-54.
    [127]杜极德,曾庆田,冉长清,等.冬虫夏草抗肿瘤作用的研究.中药通报,1986,11(7):51-54.
    [128]原志庆,高冀辉,张春光,等.六种中草药阻断食管上皮癌变的实验研究.河南肿瘤,1988,11(5):396-397.
    [129]Lin CY, Ku FM, Kuo YC, et al Inhibition of activated human mesangial cell proliferation by the natural product of Cordyceps sinensis (H1-A):an implication for treatment of IgA mesangial nephropathy. J Lab Clin Med.1999;133(1):55-63.
    [130]Yang LY, Huang WJ, Hsieh HG,et al H1-A extracted from Cordyceps sinensis suppresses the proliferation of human mesangial cells and promotes apoptosis, probably by inhibiting the tyrosine phosphorylation of Bcl-2 and Bcl-XL. J Lab Clin Med.2003 Jan;141(1):74-83.
    [131]俞宙.冬虫夏草水提液抗心肌细胞脂质过氧化的影响.第一军医大学学报,1988,18(2):110.
    [132]蔡久英,孙宇.黄芪和冬虫夏草对心脏病左心室舒张功能及血脂的影响.中国中西医结合急救杂志,2002,9(3):174.
    [133]韩俊侠,苗庆峰等.冬虫夏草治疗心血管疾病的研究进展.河北医科大学学报,2006,27(1):77-78.
    [134]李国平.虫草制剂治疗心血管病的临床及实验研究进展.中国中医药科技,2010年1月4日。
    [135]吴秀香,马克玲等.冬虫夏草降压作用实验研究.锦州医学院学报,2001,22(2):10-11.
    [136]刘高强,王晓玲.冬虫夏草化学成分及其药理活性的研究.食品科技,2007,(1):202-205.
    [137]武蓉;周巧玲;林书典;敖翔;成小苗;杨敬华;冬虫夏草制剂对自发性高血压大鼠肾组织ICAM-1和VCAM-1表达的影响[J];中南大学学报(医学版);20]0,(2):
    [138]周巧玲,刘抗寒等.冬虫夏草对糖尿病肾病模型鼠肾组织转化生长因子β_1、结缔组织生长因子表达的影响.中国中西医结合肾病杂志,2002,(3):443-446.
    [139]高玉梅,刘国平.冬虫夏草对肾脏保护作用的研究进展.医学综述,2002,(2),289-291.
    [140]李中和,刘章锁,侯秀芳;虫草菌丝治疗慢性肾脏疾病作用机理探讨[J];中国中西医结合肾病杂志;2001,(3):76-79.
    [141]周兴磊,冯志刚,张本祥;冬虫夏草治疗糖尿病肾病90例临床分析[J];临床医学;2000年0]期
    [142]林瑞琦,程虹等.冬虫夏草及其制剂在肾脏病中的应用及机制探讨(下).中国中西医结合肾病杂志,2009,10(1]);10]6-1018.
    [143]戴春笋,刘志红等.冬虫夏草防治环孢素A肾毒性的体内与体外实验研究.肾脏病与透析肾移植杂志,2000,9(4):176-179.
    [144]郑丰,黎磊石.冬虫夏草治疗肾毒性急性肾功能衰竭的疗效机制探讨.中华肾脏病杂志,1993,9(6):354-354。
    [145]屈统友,金小辉.冬虫夏草在呼吸系统疾病中的应用.海峡药学,2005,(6):140-141.
    [146]魏涛,魏威凛等;冬虫夏草菌丝体镇咳、祛痰及抗菌消炎作用的研究[J];食品科学;2002年03期
    [147]管彩虹,刘进.冬虫夏草对COPD模型大鼠肺功能及Th_1/Th_2的影响.浙江中西医结合杂志,2008,18(6):334-337
    [148]魏涛,唐粉芳.冬虫夏草菌丝体改善肺免疫功能的研究.食品科学,2002,23(8):276-279.
    [149]戎耀方,包鸿俊,沈丽琳.冬虫夏草雄激素样作用的研究.南京农业大学学报,1984,(1):64-67.
    [150]杨文质,邓小安,胡伟.冬虫夏草菌治疗性功能低下的临床研究.江西中医药,1985,(5):46-47.
    [151]李玉玲.冬虫夏草研究进展慨况.青海畜牧兽医杂志,1996,26(6):37-38.
    [152]李春如,彭凡,樊美珍,等.中国被毛孢RCEF0273培养工艺的研究.安徽农业大学学报,2004,31(4):460-465.
    [153]陈传盈,冯观泉.冬虫夏草工业深层发酵研究.中草药,1992,23(8):409-411 416.
    [154]宋士良,闵三弟等.冬虫夏草液体深层培养试验.食用菌,1988,(5):10-11.
    [155]王祥诚,余有贵.冬虫夏草固态发酵蕨渣生产菌质多糖.食品研究与开发,2010,31(7):148-151.
    [156]葛飞,桂琳等.冬虫夏草无性型—中国被毛孢固态发酵条件的初步研究.生物学杂志,2009, 26(3):22-25.
    [157]李泉森,曹正权.冬虫夏草的生态调查.中药材,1990,13(4):3-7.
    [158]张华,刘灏,李晖.西藏林芝六县冬虫夏草生境调查初探.中国林副特产,2012,116(1):80-81.
    [159]肖生荣,施至用,陈庆涛.虫草的研究Ⅰ.生境考察和形态描述.微生物学通报,1983,(1):5-6.
    [160]陈泰鲁,唐家俊,毛金龙.虫草蝙蝠蛾Hepialus armoricanus Oberthiir生物学的初步研究.昆虫学报,1973,16(3):198-202.
    [161]杨大荣等.白马蝠蛾幼虫的抗寒性研究.昆虫学报,1991,34(1):32-37.(CSCD)
    [162]杨大荣等.虫草蝠蛾生态学研究Ⅲ.幼虫越冬与生理调节.动物学研究(增刊)1988,9:43~49. (CSCD)
    [163]韩宝瑜.浅谈虫生真菌致病机制及昆虫活体防卫功能.华东昆虫学报,1997,6(1):110-111.
    [164]王海川,尤民生.绿僵菌对昆虫的入侵机理.微生物学通报,1999,26(1):71-73.
    [165]王海川,尤民生.绿僵菌分生孢子对寄主附着机制的研究进展.1990,36(3):189-192.
    [166]裘晖,吴振强,梁世中.金龟子绿僵菌及其杀虫机理.农药,2004,43(8):343-344.
    [167]邢来君.普通真菌学.高等教育出版社,出版日期2010.6.1,ISBN:9787040291315
    [168]李玉玲,刘欣等.青海冬虫夏草的研究进展及发展趋势.青海科技,2002,(4):15-17
    [169]Hamby RK,E.A.Zimmer.Ribosomal DNA as a phylogegetic tool in plant systematics.In P.S.Soltis,D.E.Soltis,JJ Doyle. Molecular systematics of plants.1991,304-345.
    [170]王宁.冬虫夏草及相关类群的分子系统学研究.中山大学硕士论文200236-38.
    [171]田向荣,刘彦威,苏敬良等.冬虫夏草无性型的培养和鉴定.动物医学进展,2013,34(2):75-78.
    [172]田向荣,刘彦威等.冬虫夏草的一种仿生学培养方法.发明专利,专利号:CN20072014300.
    [173]Hu H, Chai Y, Wang L, Zhang J, Lee HJ, Kim SH, Lu J. Pentagalloylglucose induces autophagy and caspase-independent programmed deaths in human PC-3 and mouse TRAMP-C2 prostate cancer cells. Mol Cancer Ther.2009;8(10):2833-43.
    [174]Yamaguchi K, Uzzo RG, Pimkina J, Makhov P, Golovine K, Crispen P, Kolenko VM. Methylseleninic acid sensitizes prostate cancer cells to TRAIL-mediated apoptosis. Oncogene. 2005;24(38):5868-77.
    [175]Rothe G, Valet G. Flow cytometric analysis of respiratory burst activity in phagocytes with hydroethidine and 2',7'-dichlorofluorescin. J Leukoc Biol 1990;47:440-8
    [176]Li GX, Hu H, Jiang C, Schuster T, Lu J. Differential involvement of reactive oxygen species in apoptosis induced by two classes of selenium compounds in human prostate cancer cells. Int J Cancer 2007; 120:2034-43.
    [177]Jiang C, Wang Z, Ganther H, Lu J. Caspases as key executors of methyl selenium-induced apoptosis (anoikis) of DU-145 prostate cancer cells. Cancer Res 2001;61:3062-70

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