链霉菌F-1013的种类鉴定及其生理活性分析
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摘要
对分离自海洋虾壳的菌株链霉菌F-1013进行形态学特征、培养性状、生理生化特征分析及16S rDNA序列分析，该菌株的孢子丝呈螺旋状，孢子圆形、长圆形或卵圆形，表面光滑；基丝较直，平缓，有较多细小分枝；在察氏培养基、PSA培养基、黄豆粉培养基和S培养基上气丝丰富，在CMA培养基上生长一般，在甘油精氨酸琼脂培养基上生长弱；该菌能分解纤维素、水解淀粉、使牛奶凝固及胨化、能产生硫化氢、不能利用酪氨酸产生色素，能较好地利用α-乳糖、麦芽糖、D-果糖和肌醇、D-木糖、甘油、甘露醇和葡萄糖等，不利用蔗糖和乙酸钠。链霉菌F-1013的上述特征与玫瑰黄链霉菌(Streptomyces roseoflavus Arai，1951)的特征相吻合。对菌株F-1013 16S rDNA测序并进行聚类分析，结果表明该菌与玫瑰黄链霉菌16S rDNA序列的相似性达到了99.93％，二者的120bp-γ可变区序列完全相同。根据形态学特征、培养性状、生理生化分析及16S rDNA序列测定结果，将链霉菌F-1013鉴定为玫瑰黄链霉菌F-1013(Streptomyces roseoflavus F-1013)。
链霉菌F-1013在pH8-9、5％的虾壳粉培养液中发酵5-7d，甲壳低聚糖含量达到0.3mg／ml，产菌量优于其它基质的培养基。利用链霉菌F-1013虾壳发酵液进行抑菌实验，该菌对炭疽菌(Colletotrichum sp．)、水稻纹枯病菌(Rhizoctoniasolani)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f．sp．)等植物病原真菌有明显的抑制作用，平板测定结果表明，对以上3种植物病原真菌的抑菌率分别达到100％、96.3％、94.7％。
用链霉菌F-1013虾粉发酵液处理黄瓜种子，对黄瓜幼苗具有促生和诱导几丁质酶活力的能力。与对照相比，发芽率、平均幼苗长度分别提高了28.5％、83.3％，幼苗总鲜重达到对照的2.3倍；几丁质酶活力达到70.0U，为对照的9.8倍。
The morphological, cultural, physiological and biochemical characteristics of the strain Streptomyces F-1013 which was isolated from the shell of shrimp were analyzed, the result indicated that the aerial hyphae of Streptomyces F-1013 presented spiral form, the spore was round or ellipse and its surface was smooth; the substrate mycelia was straight and had many divarication. The strain F-1013 grew bloom on Czapek's medium, PSA, soybean medium and S medium, grew generally on CMA and feebly on glycerol arginine agar medium. Streptomyces F-1013 could utilize cellulose, hydrolyze of starch, coagulate and peptonize milk and produce H_2S etc, but could not produce pigments by making use of tyrosine. Streptomyces F-1013 could utilize α-Lactose, maltose, D-fructose, L-inositol, D-xylose, Glycerol, D-mannitol and Glucose, but could not utilize sucrose and sodium. All these characteristics were very similar to those of Streptomyces roseoflavus Arai,1951. In addition, 16S rDNA sequence indicated that Streptomyces F-1013 and Streptomyces roseoflavus has the identity of 99.93% and of 100% between the 120bp-γ regions of 16S rDNA of the two strains. Accordingly, Streptomyces F-1013 identified as Streptomyces roseoflavus F-1013.
Contrasting with other fermentation liquor, by adjusting pH8-9 and fermenting 5-7 days, the shrimp fermentation liquor was the best of all in the ability of producing germ and chitosan, the soluble chitosan concentration could reach 0.3mg/mL. The experiment of antagonistic effect against plant pathogenic fungi indicated that shrimp fermentation of Streptomyces roseoflavus F-1013 had distinct antagonistic effect against plant pathogenic fungi such as Colletotrichum sp., Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum f.sp.. The antagonistic rate could reach 100%, 96.3% and 94.7%
链霉菌F-1013在pH8-9、5％的虾壳粉培养液中发酵5-7d，甲壳低聚糖含量达到0.3mg／ml，产菌量优于其它基质的培养基。利用链霉菌F-1013虾壳发酵液进行抑菌实验，该菌对炭疽菌(Colletotrichum sp．)、水稻纹枯病菌(Rhizoctoniasolani)、香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f．sp．)等植物病原真菌有明显的抑制作用，平板测定结果表明，对以上3种植物病原真菌的抑菌率分别达到100％、96.3％、94.7％。
用链霉菌F-1013虾粉发酵液处理黄瓜种子，对黄瓜幼苗具有促生和诱导几丁质酶活力的能力。与对照相比，发芽率、平均幼苗长度分别提高了28.5％、83.3％，幼苗总鲜重达到对照的2.3倍；几丁质酶活力达到70.0U，为对照的9.8倍。
The morphological, cultural, physiological and biochemical characteristics of the strain Streptomyces F-1013 which was isolated from the shell of shrimp were analyzed, the result indicated that the aerial hyphae of Streptomyces F-1013 presented spiral form, the spore was round or ellipse and its surface was smooth; the substrate mycelia was straight and had many divarication. The strain F-1013 grew bloom on Czapek's medium, PSA, soybean medium and S medium, grew generally on CMA and feebly on glycerol arginine agar medium. Streptomyces F-1013 could utilize cellulose, hydrolyze of starch, coagulate and peptonize milk and produce H_2S etc, but could not produce pigments by making use of tyrosine. Streptomyces F-1013 could utilize α-Lactose, maltose, D-fructose, L-inositol, D-xylose, Glycerol, D-mannitol and Glucose, but could not utilize sucrose and sodium. All these characteristics were very similar to those of Streptomyces roseoflavus Arai,1951. In addition, 16S rDNA sequence indicated that Streptomyces F-1013 and Streptomyces roseoflavus has the identity of 99.93% and of 100% between the 120bp-γ regions of 16S rDNA of the two strains. Accordingly, Streptomyces F-1013 identified as Streptomyces roseoflavus F-1013.
Contrasting with other fermentation liquor, by adjusting pH8-9 and fermenting 5-7 days, the shrimp fermentation liquor was the best of all in the ability of producing germ and chitosan, the soluble chitosan concentration could reach 0.3mg/mL. The experiment of antagonistic effect against plant pathogenic fungi indicated that shrimp fermentation of Streptomyces roseoflavus F-1013 had distinct antagonistic effect against plant pathogenic fungi such as Colletotrichum sp., Rhizoctonia solani, Fusarium oxysporum f.sp.. The antagonistic rate could reach 100%, 96.3% and 94.7%
引文
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