氯霉素单克隆抗体的研制及其特性分析

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• 出版年：2010
• 作者：方伟；姜有声；黄宣运；胡鲲；杨先乐
• 单位1：上海海洋大学国家水生动植物病原库，上海海洋大学水产品药物残留监控检测中心
• 单位2：广东省水生动物疫病预防控制中心
• 出生年：1982
• 学历：硕士生
• 语种：中文
• 作者关键词：氯霉素；单克隆抗体；检测
• 起始页：90
• 总页数：5
• 经费资助：十一五国家科技支撑计划(2006BAD03804)；上海市科技兴农重点攻关项目(6660106477)；上海市重点学科建设项目(Yll01)；现代 农业产业技术体系建设专项资金；现代农业产业技术体系专项(nycytx-49-17)；公益性行业（农业）科硕专项经费——对虾现代产业技 术体系研究与建立(nyhyzx07-042)资助
• 刊名：中国海洋大学学报
• 是否内版：否
• 刊频：月刊
• 创刊时间：1959
• 主管单位：中华人民共和国教育部
• 主办单位：中国海洋大学
• 主编：管华诗
• 地址：中国海洋大学学报编辑部
• 邮编：266003
• 卷：40
• 期：3
• 期刊索取号：P226.066110-1
• 数据库收录：CA美国《化学文摘》 AJ俄罗期《文摘杂志》ZR美国《动物学记录》MR美国《数学评论》ZM德国《数学文摘》
• 核心期刊：中国科学技术信息研究所核心期刊　中国科学院文献情报中心核心期刊　北京大学图书馆核心期刊

摘要

为了研制氯霉素单克隆抗体，建立氯霉素的简便有效的检测方法。采用碳二亚胺(EDC)方法制备氯霉素免疫抗原和包被抗原，经SDS-PAGE凝胶电泳，三硝基苯磺酸(TNBS)法鉴定表明偶联成功。采用制备的抗原CAP-HS-BSA(CAP-HS，氯霉素琥珀酸酯；BSA，牛血清白蛋白)免疫Balb/c小鼠，通过杂交瘤技术获得了2株抗氯霉素的杂交瘤细胞株，细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定。经体内诱生法产生腹水，ELISA检测纯化腹水的效价为1:10⁶。抗体的亲和常数分别为：1.13×10¹⁰L/mol，1.41×10¹⁰L/mol。ELISA检测显示这2株单克隆抗体与氯霉素琥珀酸交叉反应率为300%，与其他抗生素及结构类似物的交叉反应小，表明该单抗可满足建立免疫学检测方法的需要和开发应用的要求。