新型鸭呼肠孤病毒P18基因的表达与鉴定

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• 论文作者：吴巧梅 ; 李传峰 ; 朱杰 ; 谭永贵 ; 李琦 ; 刘光清 ; 陈宗艳
• 年：2016
• 作者机构：中国农业科学院上海兽医研究所;
• 论文关键词：新型鸭呼肠孤病毒 ; P18蛋白 ; 表达 ; 鉴定 ; 多克隆抗体 ; 表达时相
• 会议召开时间：2016-07-20
• 会议录名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会论文集
• 语种：中文
• 分类号：S852.65
• 学会代码：SYGW
• 会议名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第五次学术研讨会
• 会议地点：中国内蒙古通辽
• 主办单位：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
• 学会名称：中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会
• 页数：9
• 文件大小：1076k
• 原文格式：D
• 会议级别：全国

摘要

为鉴定序列推导的新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)P18基因是否存在,本研究采用RT-PCR扩增获得NDRV TH11株推导的P18基因,将其亚克隆至原核表达载体p Cold-TF,表达并纯化获得P18重组蛋白。以此重组蛋白为免疫原,制备抗P18的多克隆抗体。Western-blot结果显示,该抗体具有良好的免疫原性。以此制备的抗体为第一抗体,利用IFA和激光共聚焦检测NDRV TH11株感染细胞后,P18蛋白亚细胞定位及动态分布。结果显示,在病毒感染后6h,P18蛋白在细胞浆和细胞核中均能检测到,之后P18蛋白的分布以细胞核为主,在感染后30h,P18蛋白在细胞核检测到,而细胞浆里未能检测到;随后细胞崩解。本研究结果证实NDRV第二个ORF编码P18蛋白,为深入探讨P18蛋白入核分子机理提供线索,为临床早期诊断提供依据。

引文

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