应用巢式逆转录聚合酶链反应检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(VHSV)
- 出版年：2009
- 作者：倪穗；余晓巍；王建平；雷爱莹；曾地刚；吴雄飞
- 单位1：宁波大学生命科学与生物工程学院
- 职称：教授
- 语种：中文
- 作者关键词：病毒性出血性败血症病毒；巢式逆转录聚合酶链反应；检测
- 起始页：489
- 总页数：5
- 刊名：海洋与湖沼
- 是否内版：否
- 刊频：双月刊
- 创刊时间：1957
- 主办单位：中国海洋湖沼学会；中国科学院海洋研究所
- 主编：相建海
- 地址：青岛南海路7号
- 邮编：266071
- 电子信箱：chenpuyuan@yahoo.cn
- 卷：40
- 期：4
- 期刊索取号：P226.06 449
摘要
参照鱼类病毒性出血性败血症病毒序列，根据PCR引物设计的原则，设计巢式PCR引物，采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法，对如何快速检测鱼类病毒性出血性败血症病的方法进行了较为系统的研究，并对RT-PCR的反应条件进行了优化。结果表明，巢式RT-PCR扩增获得279bp的特异性片断，阴性对照无扩增条带。巢式RT-PCR扩增出的特异性片段经测序分析，结果证实与报道的序列完全一致。该方法最低可检测出0.lpg的鱼类病毒性出血性败血症病毒RNA。初步建立了VHSV的巢式RT-PCR检测方法，该方法灵敏、特异，可为VHSV的检测提供一个快速、有效的手段。