沼泽红假单胞菌phbC-hupL双突变株构建及产氢测定
- 出版年：2010
- 作者：王中康；田远明；廖强；张宝鹏；殷幼平
- 单位1：重庆大学生物工程学院，重庆市功能基因及调控技术重点实验室
- 出生年：1956
- 职称：教授
- 语种：中文
- 作者关键词：沼泽红假单胞菌；自杀载体；基因敲除；生物产氢；吸氢酶；聚羟基丁酸酯合成酶
- 起始页：1395
- 总页数：7
- 经费资助：国家自然科学基金资助项目（90510020）
- 刊名：中国环境科学
- 是否内版：否
- 刊频：月刊
- 创刊时间：1981
- 主管单位：中国科学技术学会
- 主办单位：中国环境科学学会
- 主编：王文兴
- 地址：北京市海淀区红联南村54号
- 邮编：100082
- 卷：30
- 期：10
- 期刊索取号：P875.06 141-1
- 数据库收录：中文核心期刊；第三届国家期刊奖百种重点期刊；中国科协优秀科技期刊一等奖
- 核心期刊：中文核心期刊
摘要
利用湖底淤泥分离的沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）CQU01和该菌株的吸氢酶基因hupL缺失菌株CQU012作为出发菌株，分别构建聚羟基丁酸酯合成酶基因phbC单突变株及聚羟基丁酸酯合成酶基因phbC与吸氢酶基因hupL双突变株，以提高其在光照培养条件下的产氢量。以同源重组双交换方法构建含有Em抗性基因的自杀载体，通过接合转移转化R.palustris CQU01菌株，经PCR扩增以及测序验证，成功获得了沼泽红假单胞菌phbC单突变株R.palustris CQU013及phbC-hupL双突变株Rpalustris CQU014.相同条件下测定突变菌株与野生菌株的生长和产氢特性，结果显示，突变菌株生长曲线与野生菌株有明显差异，两株突变菌株的产氢量分别是原始菌株的1.31和1.76倍，达到454mL/L和604mL/L.双突变菌株产氢能力较phbC基因和hupL基因单突变菌株的产氢能力有明显提高，说明phbC和hupL基因对菌株R.palustris的产氢代谢有着显著的影响。