基因宏阵列和荧光定量PCR方法对西瓜枯萎病害土壤中尖孢镰刀茵的快速检测和定量

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• 出版年：2010
• 作者：赵爽；罗佳；凌宁；徐大兵；朗娇娇；胡江；沈其荣
• 单位1：南京农业大学资源与环境科学学院
• 单位2：江苏省固体有机废弃物资源化高技术研究重点实验室
• 出生年：1981
• 学历：博士研究生
• 语种：中文
• 作者关键词：尖孢镰刀菌；基因宏阵列；实时荧光定量PCR；SYBR Green I
• 起始页：703
• 总页数：6
• 经费资助：国家自然科学基金项目(40871126)资助
• 刊名：土壤学报
• 是否内版：否
• 刊频：双月刊
• 创刊时间：1948
• 主管单位：中国科学院
• 主办单位：中国土壤学会
• 主编：蔡祖聪
• 电子信箱：actapedo@issas.ac.cn；journal@mail.sciencep.com
• 卷：47
• 期：4
• 期刊索取号：P390.66107

摘要

采用基因宏阵列(Macroarray)和荧光定量PCR(Real-time PCR)的方法，对引起西瓜枯萎病害的病原菌尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)进行了快速监测和快速绝对定量，并且对实验条件进行了优化和摸索。结果显示，在西瓜枯萎病害发病较为严重的处理N^-+P^-和N^-+P⁺的根际土壤中，Macroarray检测到强烈的阳性信号，表明尖孢镰刀菌的大量存在，同时荧光定量PCR的结果也表明在这两个处理的根际土壤中尖孢镰刀菌数量最多，分别为每g土壤8.89×10⁵和2.24×10⁵个拷贝数；而在未发生枯萎病害的处理N⁺+P^-和N⁺+P⁺中，Macroarray未检测到阳性信号，根际土壤中尖孢镰刀菌数量分别为每g土壤6.23×10³和3.28×10³个拷贝数；而四个处理的土体土壤中尖孢镰刀菌的数量均维持在每g土壤10²～10³个拷贝数，Macroarray未检测到阳性信号。与传统检测方法如病原菌的分离培养、平板稀释计数等相比，上述分子生物学方法对病原真菌的检测和定量更为准确快速、省时省力。