云南松ISSR-PCR反应体系建立及优化
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摘要
为建立和优化云南松ISSR-PCR反应体系,运用正交实验分析了模板DNA、TagDNA聚合酶、引物、Mg~(2+)和dNTPs 5个因子对云南松ISSR-PCR反应的影响。结果表明:云南松ISSR-PCR 25μL反应体系中5个因子最佳水平为:DNA模板为3.6 ng、TagDNA聚合酶为2.0 U、引物浓度为0.8 mmol/L、dNTPs浓度为0.20 mmol/L、Mg~(2+)浓度为2.0 mmol/L。
Effect for ISSR-PCR reaction of Pinus yunnanensis on five factors(DNA template,Tag DNA,primer,Mg~(2+) and dNTPs) were analysed by orthogonal design for establishing and optimizing ISSR - PCR reaction system of Pinus yunnanensis Franch.The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction system(25μL) mixture contained 3.6 ng DNA template,2.0 U Tag DNA,0.8 mmol/L primer,2.0 mmol/L Mg~(2+) and 0.20 mmol/L dNTPs.
Effect for ISSR-PCR reaction of Pinus yunnanensis on five factors(DNA template,Tag DNA,primer,Mg~(2+) and dNTPs) were analysed by orthogonal design for establishing and optimizing ISSR - PCR reaction system of Pinus yunnanensis Franch.The results showed that the optimal ISSR-PCR reaction system(25μL) mixture contained 3.6 ng DNA template,2.0 U Tag DNA,0.8 mmol/L primer,2.0 mmol/L Mg~(2+) and 0.20 mmol/L dNTPs.
引文
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