Estandarización y validación en Colombia de una metodología basada en HPLC para la determinación de la concentración sérica de posaconazol

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• 作者：Diego H. Cá ; ceres^a ; Juan David Zapata^a ; Sinar D. Granada^b ; Luz E. Cano^a ; ^c ; Tonny W. Naranjo^a ; ^d ; ^{tnaranjo@cib.org.co} ; ^{tonny.naranjo@upb.edu.co}
• 关键词：Antifú ; ngicos ; Posaconazol ; Cromatografí ; a lí ; quida de alta eficiencia ; Monitorizació ; n terapé ; utica de medicamentos
• 刊名：Revista Iberoamericana de Micología
• 出版年：2016
• 出版时间：October-December 2016
• 年：2016
• 卷：33
• 期：4
• 页码：230-236
• 全文大小：572 K
• 卷排序：33

文摘

Hasta la fecha, Colombia no cuenta con un servicio especializado de medición de concentraciones séricas de antifúngicos, procedimiento esencial para el adecuado manejo del tratamiento de las infecciones invasivas por hongos.ObjetivosEstandarizar y validar un protocolo simple, sensible y específico, basado en la cromotografía líquida de alta eficiencia, que, cumpliendo con los parámetros recomendados por la Food and Drug Administration, permita detectar y cuantificar concentraciones séricas de posaconazol.MétodosSe usó un equipo de cromotografía líquida de alta eficiencia Agilent, serie 1200, con detector ultravioleta de matriz de diodos y columna analítica Eclipse-XDB-C18. Como estándar primario se utilizó posaconazol SCH56592 (lote IRQ-PAZ-10-X-103), y como control interno, itraconazol (lote ZR051211PUC921). La validación se hizo teniendo en cuenta los parámetros recomendados por la Food and Drug Administration (selectividad, curvas de calibración, recuperación, exactitud, precisión, sensibilidad, reproducibilidad y estabilidad de la muestra) para este tipo de métodos.ResultadosLos parámetros cromatográficos más adecuados fueron los siguientes: temperatura de la columna, 25 °C; detección ultravioleta, 261 nm; volumen de inyección, 50 μl; flujo, 0,8 ml/min; tiempo de migración, 10 min; fase móvil, acetonitrilo:agua (70:30). Los tiempos de retención finales fueron de 3,4 y 7,2 min para posaconazol e itraconazol, respectivamente, con un rango de cuantificación amplio y confiable, desde 0,125 hasta 16 μg/ml. Bajo estas condiciones el método fue selectivo, el R2 de las curvas de calibración fue ≥ 0,99 y el porcentaje de recuperación fue del 98,7%, con un porcentaje del coeficiente de variación inferior al 10%. El porcentaje de error relativo en la exactitud, así como el porcentaje del coeficiente de variación en la precisión, fueron inferiores al 15%, cumpliendo así con los criterios de aceptación recomendados por la Food and Drug Administration.ConclusionesLa selectividad y pureza de la señal cromatográfica obtenida, así como los límites de detección y cuantificación estandarizados, hacen de esta metodología una excelente herramienta para el seguimiento terapéutico de los pacientes bajo tratamiento con posaconazol.