Thérapie cellulaire de l’infertilité masculine : caractérisation des cellules souches germinales

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• 作者：Ma&euml ; lle Givelet^a ; Virginie Firlej^a ; Bruno Lassalle^b ; Jean-Philippe Wolf^a ; Pierre Fouchet^b ; Virginie Barraud-Lange^a ; ^{virginie.barraud-lange@aphp.fr" class="auth_mail" title="E-mail the corresponding author}
• 关键词：Cellules souches ; Transplantation ; Spermatogen&egrave ; se ; Infertilit&eacute
• 刊名：Morphologie
• 出版年：2016
• 出版时间：September 2016
• 年：2016
• 卷：100
• 期：330
• 页码：178
• 全文大小：51 K

文摘

Dans les pays industrialisés, on estime qu’un couple sur six consulte pour des problèmes de fertilité. L’état actuel des connaissances chez l’animal permet d’envisager le développement de techniques de thérapie cellulaire utilisant les cellules souches germinales (CSG), qui assurent le maintien de la spermatogenèse dans le testicule, dans le but de restaurer une fertilité après transplantation testiculaire. Notre projet vise à caractériser les CSG humaines.

ec_2">Méthodes

Des suspensions cellulaires pr&eacute;par&eacute;es &agrave; partir de biopsies testiculaires humaines ont &eacute;t&eacute; analys&eacute;es par cytom&eacute;trie en flux &agrave; l’aide du fluorochrome sp&eacute;cifique de l’ADN Vybrant pour le marqueur <em>side populationem> (SP) et des marqueurs α6 int&eacute;grine, Thy-1, et β-2 microglobuline. Pour l’&eacute;tude fonctionnelle des CSG humaines, nous avons d&eacute;velopp&eacute; un test in vivo apr&egrave;s transplantation des cellules dans les testicules de souris immunod&eacute;ficientes ‹‹ humanis&eacute;es ›› NSG, permettant d’observer un d&eacute;but de colonisation des tubules s&eacute;minif&egrave;res murins par les CSG humaines.

ec_3">R&eacute;sultats

Ces marqueurs permettent de d&eacute;finir diff&eacute;rentes sous-populations germinales, dont une sous-population SPα6 + Thy-1 + β2M qui contient les prog&eacute;niteurs spermatogoniaux les plus immatures. Le test de fonctionnalit&eacute; apr&egrave;s transplantation montre que les CSG sont pr&eacute;sentes dans la sous-population cellulaire SPα6 + Thy-1 + β2 M⁻. D’autre part, diff&eacute;rentes conditions de culture in vitro ont &eacute;t&eacute; test&eacute;es et permettent la culture des cellules souches ‹‹ spermatogonies immatures ›› sur une p&eacute;riode de 21 jours.

ec_4">Conclusion

Nous avons ainsi d&eacute;velopp&eacute; une m&eacute;thode permettant d’&eacute;tudier la diff&eacute;renciation germinale au cours de la spermatogen&egrave;se adulte humaine, et de purifier une population hautement enrichie en GSG.