La premi¨¨re ¨¦tape n¨¦cessaire pour le dosage plasmatique est une d¨¦prot¨¦inisation. L¡¯¨¦lution de la mol¨¦cule est r¨¦alis¨¦e sur des colonnes d¡¯extraction. L¡¯¨¦luant est ¨¦vapor¨¦ puis reconstitu¨¦ dans de la phase mobile lors de l¡¯injection dans le circuit de la CLHP. Nous avons s¨¦lectionn¨¦ les meilleures conditions chromatographiques pour le dosage de la 25-hydroxy-vitamine D3 plasmatique et proc¨¦d¨¦ ¨¤ la validation de la m¨¦thode. Le CV de reproductibilit¨¦ ¨¦tait de 1,08 % ; celui de r¨¦p¨¦tabilit¨¦ ¨¦tait de 1,84 % . La lin¨¦arit¨¦, rapport¨¦e par le coefficient de corr¨¦lation de la courbe de r¨¦gression, ¨¦tait de 0,996 pour des concentrations allant de 10 ¨¤ 150 ng/ml. La limite de quantification ¨¦tait de 0,34 ng/ml et la limite de d¨¦tection de 0,11 ng/ml.