Radiothérapie interne vectorisée du mélanome : mécanismes moléculaires au sein de sphéroïdes

详细信息    查看全文

• 作者：Jacques Rouanet¹ ; ² ; Hussein Akil¹ ; Claire Viallard¹ ; Mathilde Bonnet³ ; Sophie Besse¹ ; Tiffany Witkowski¹ ; Eric Debiton¹ ; Jean-Michel Chezal¹ ; Philippe Auzeloux¹ ; Elisabeth Miot-Noirault¹ ; Mercedes Quintana¹ ; Michel D&rsquo ; Incan¹ ; ² ; Franç ; oise Degoul¹
• 关键词：Mé ; lanome ; Radiothé ; rapie interne vectorisé ; e ; Transition é ; pithé ; lio-mé ; senchymateuse
• 刊名：Annales de Dermatologie et de Vénéréologie
• 出版年：2016
• 出版时间：December 2016
• 年：2016
• 卷：143
• 期：12_supp_S
• 页码：S428
• 全文大小：54 K
• 卷排序：143

文摘

L’UMR990 développe des ligands radiomarqués ciblant la mélanine pour le diagnostic et le traitement du mélanome métastatique. Nous avons choisi la molécule [131I]ICF01012 pour la radiothérapie interne du mélanome en raison de ses propriétés pharmacocinétiques favorables chez la souris : rétention tumorale importante (8j) et élimination rapide (24 h) des organes non ciblés. Cette molécule, en injection systémique, réduit la croissance tumorale dans des modèles précliniques murins syngéniques (B16) et xénogreffes de mélanome humain (SK-MEL-3). [131I]ICF01012 diminue également les métastases pulmonaires spontanées et le nombre de colonies pulmonaires dans le modèle B16BL6/C57BL6. Ces résultats ont conduit à un transfert clinique via une étude de phase I avec escalade de dose (MELRIV1). Afin de caractériser, les mécanismes moléculaires induits par [131I]ICF01012 sur différentes lignées humaines de mélanome, nous avons développé un modèle de sphéroïdes, culture cellulaire 3D, afin de mimer in vitro l’architecture cellulaire et moléculaire tumorale.Matériel et méthodesLes cellules SK-MEL-3 (dérivées d’une métastase pigmentée) sont cultivées en présence de méthylcellulose (0,5 %) pour la formation de sphéroïdes. Les plaques 96 puits (1 sphéroïde/puits) sont incubées avec 37 kBq d’[131I]ICF01012 pendant 1 h. Le milieu est retiré et les sphéroïdes récupérés 1 h, 4 h et 24 h après, pour étude de la clonogénicité (colony forming à 24 h), analyse transcriptomique et protéique des voies de signalisation impliquées dans la mélanogénèse, la prolifération et la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM).RésultatsNous avons caractérisé les sphéroïdes en termes de croissance (plateau atteint à j5) et expression protéique des marqueurs de la TEM (présence de N-cadherin et vimentine, absence de E-cadherin). L’étude de clonogénicité a mis en évidence une baisse de 60 % du nombre de colonies après traitement de sphéroïdes SK-MEL-3 par [131I]ICF01012. Nous avons montré une réduction de l’expression de gènes associés à la prolifération tumorale dans les sphéroïdes SK-MEL-3 : diminution de l’expression de Brn2 et Sparc, respectivement de 30 % et 15 %, 1 h après [131I]ICF01012, suivie d’une baisse de 15 % de l’expression de ZEB2 et MITF, 4 h après traitement. Une étude protéique et histologique est en cours pour confirmer ces résultats. Nous étudions aussi une seconde lignée cellulaire de mélanome humain non pigmenté (SK-MEL-28).DiscussionCes premiers résultats confirment les effets antiprolifératifs d’[131I]ICF01012 à l’échelon moléculaire.ConclusionL’étude de l’association d’[131I]ICF01012 avec les traitements médicamenteux du mélanome métastatique est un préalable indispensable pour la poursuite du transfert clinique. Des essais de co-traitements des sphéroïdes avec des inhibiteurs des MAP-Kinases sont planifiés ainsi qu’une étude in vivo de l’impact d’[131I]ICF01012 sur la réponse immunitaire antitumorale (mort immunogénique).