- 作者：G. Margarit ; gmargarit@hsp.santpau.es ; J. Belda ; P. Casan ; J. Sanchis
- 关键词：Cultivos primarios ; Cé ; lulas epiteliales bronquiales ; Amplificació ; n ; Explantes ; Citoqueratina 7
- 刊名：Archivos de Bronconeumolog¨ªa
- 出版年：2005
- 出版时间：September 2005
- 年：2005
- 卷：41
- 期：9
- 页码：524-527
- 全文大小：76 K
Objetivo
Los cultivos celulares son un buen modelo para el estudio de las enfermedades pulmonares, pero son dif¨ªciles de reproducir y producen un n¨²mero limitado de c¨¦lulas. El objetivo de este estudio ha sido desarrollar un m¨¦todo que incrementase la producci¨®n de c¨¦lulas epiteliales bronquiales (CEB) humanas en cultivos primarios.Material y m¨¦todos
Se proces¨® un total de 12 muestras (9 procedentes de muestras quir¨²rgicas y 3 de biopsias endosc¨®picas) en placas recubiertas de col¨¢geno tipo I con medio suplementado para CEB. Al iniciarse la proliferaci¨®n celular a su alrededor, los explantes se extrajeron y subcultivaron sucesivamente. Las c¨¦lulas restantes se dejaron proliferar y se tripsinizaron tras alcanzar m¨¢s del 50 % de confluencia. Se valoraron el n¨²mero de c¨¦lulas obtenidas, la viabilidad y la citoqueratina 7.
Resultados
El n¨²mero total de c¨¦lulas obtenidas con este m¨¦todo super¨® en una media de 3 veces el n¨²mero de CEB humanas obtenidas en cultivos primarios simples. El n¨²mero m¨¢ximo de subcultivos fue de 5, la viabilidad media (¡À desviaci¨®n est¨¢ndar) fue de 91,9 ¡À 11,7 % y el porcentaje de c¨¦lulas positivas para la citoqueratina 7 del 30,71 ¡À 10,68 % .
Conclusiones
El m¨¦todo descrito para amplificar cultivos primarios de CEB permite incrementar la producci¨®n de c¨¦lulas obtenidas.