O70 Approche pharmacologique ou génique pour la surexpression du VEGF par les îlots pancréatiques au cours de la transplantation?

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• 作者：A. Langlois ; W. Bietiger ; E. Seyfritz ; K. M ; es ; E. Maillard ; A. Belcourt ; M. Pinget ; L. Kessler ; S. Sigrist
• 刊名：Diabetes Metabolism
• 出版年：2008
• 出版时间：March 2008
• 年：2008
• 卷：34
• 期：Supplement 3
• 页码：H31-H32
• 全文大小：128 K

文摘

Introduction

Une revascularisation rapide des îlots pancréatiques transplantés est indispensable à la survie du greffon. Des études réalisées sur des cellules β Rinm5F, ont montré une surexpression du VEGF, un puissant facteur angiogénique, soit par transfert du gène du VEGF avec un adénovirus, soit par incubation en présence de déferoxamine (DFO), un chélateur du fer. Le but de ce travail est d’étudier l’effet de l’infection adénovirale et de la DFOsur la viabilité, la fonctionnalité, l’expression du VEGF sur les îlots pancréatiques in vitro et sur la revascularisation des îlots pancréatiques in vivo.

Matériels et méthodes

L’étude in vitro a été réalisée sur des îlots de Rat Wistar infecté in vivo à l’aide d’un adénovirus de 2^e génération codant pour le gène du VEGF (4 et 8.10⁸pfu/pancréas) ou mis en présence de DFO(10 μm). La viabilité, la fonctionnalité, l’expression du mRNA du VEGF et de l’insuline et la quantité de VEGF sécrétée ont été évalués au cours du temps. Pour l’étude in vivo, des îlots de Rat Lewis infectés ou mis en présence de DFO(10 μm) ont été transplantés par voie intra portale dans le lobe caudé de rats Lewis sains et diabétiques. La revascularisation des îlots a été étudiée sur deux mois par marquage immunohistochimique à la lectine, au trichrome de Masson et de l’insuline.

Résultats

La viabilité des îlots est préservée 1 jour après mise de DFO (101,33 %  ± 5,66 % par rapport au contrôle, n = 7). La fonctionnalité est sti mulée 1 jour après ajout de DFO(IS contrôle : 1,96 ± 0,83, IS DFO : 3,74 ± 0,58, n = 6), contrairement aux îlots infectés où l’adénovirus est toxique dés 4.10⁸pfu. L’expression des mRNA de l’insuline et du VEGF est stimulée en présence de DFO3 jours après culture. L’infection adénovirale et la DFOstimulent la sécrétion de VEGF (3 fois plus importante par rapport au contrôle). Cette surexpression, durable, se maintien environ 10 jours pour l’infection adénovirale alors qu’elle est plus transitoire (environ 3 jours) en présence de DFO. L’étude in vivo confirme les résultats in vitro avec une stimulation de la revascularisation des îlots en présence de DFOdès les premiers jours après transplantation.

Conclusion

L’utilisation de la DFO(10 μm) devrait permettre ainsi d’améliorer la viabilité des îlots au cours de la transplantation par la surexpression transitoire du VEGF.