Rôle majeur du flagelle de Pseudomonas aeruginosa dans l’invasion et l’induction de l’inflammation cutanée

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• 作者：Magali Garcia¹ ; ² ; Martine Garnier² ; Julien Garnier³ ; Christine Barrault³ ; Eric Morello⁴ ; Mustapha Di-Tahar⁴ ; Jean Claude Lecron² ; Fran&ccedil ; ois Xavier Bernard³ ; Charles Bodet²
• 关键词：Inflammation cutan&eacute ; e ; Pseudomonas aeruginosa ; Virulence
• 刊名：Annales de Dermatologie et de Vénéréologie
• 出版年：2016
• 出版时间：December 2016
• 年：2016
• 卷：143
• 期：12_supp_S
• 页码：S425-S426
• 全文大小：63 K
• 卷排序：143

文摘

Pseudomonas aeruginosa est un pathogène opportuniste de l’environnement impliqué dans la survenue d’infections notamment respiratoires et cutanées. Cette bactérie dispose d’un arsenal de facteurs de virulence incluant un flagelle et les systèmes de sécrétion de type II et III (TSS2 et TSS3). Ces trois facteurs de virulence sont impliqués dans l’induction d’une inflammation de l’épithélium pulmonaire lors de pneumonies à P. aeruginosa. Le but de cette étude était d’évaluer le rôle de ces facteurs de virulence dans l’inflammation cutanée lors d’infection de kératinocytes primaires humains.Matériel et méthodesDes kératinocytes primaires humains cultivés en monocouche ou en épiderme reconstruit ont été infectés par une souche de P. aeruginosa sauvage (PAK) ou de mutants délétés des gènes codant le flagelle (ΔfliC), le TSS2 (ΔxcpQ), TSS3 (ΔpscF) ou ces 3 facteurs de virulence (ΔfliCΔxcpQΔpscF). Un anticorps monoclonal bloquant toll-like receptor 5 (TLR5), impliqué dans la reconnaissance du flagelle, a été utilisé afin d’évaluer son implication dans la réponse immunitaire innée induite. Des analyses transcriptomiques, protéomique et immunohistologique des médiateurs de l’inflammation induits par les cellules infectées ont été réalisées.RésultatsEn analyse transcriptomique, l’induction d’un large panel de peptides antimicrobiens, cytokines pro-inflammatoires et chimiokines a été observée après 6 et 16 heures d’infection des kératinocytes et des épidermes reconstruits par la souche PAK. En revanche, lors de leur infection par les souches PAK ΔfliC et PAK ΔfliCΔxcpQΔpscF ainsi que par la souche PAK en présence de l’anticorps anti-TLR5, les niveaux d’expression des gènes étaient significativement réduits. L’absence des TSS2 et TSS3 ne semble pas, à un temps précoce, moduler l’expression des médiateurs inflammatoires induit par P. aeruginosa. Des résultats similaires ont été obtenus en mesurant les quantités de chimiokines dans les surnageants de culture. L’immunohistochimie réalisée sur les épidermes reconstruits a mis en évidence une induction du peptide antimicrobien S100A7 lors de l’infection par la souche PAK, qui est réduite lors de l’infection par les souches PAK ΔfliC et PAK ΔfliCΔxcpQΔpscF. L’utilisation d’un anticorps polyclonal anti-P. aeruginosa sur les épidermes reconstruits infectés montre une invasion tissulaire avec localisation diffuse de la souche PAK jusqu’à la couche basale de kératinocytes, absente lors de l’infection par les souches PAK ΔfliC et PAK ΔfliCΔxcpQΔpscF.DiscussionLes résultats suggèrent que le flagelle constitue le principal facteur de virulence de P. aeruginosa impliqué dans l’induction de l’inflammation lors d’infections cutanées, médiée par le TLR5. Le flagelle joue également un rôle dans l’invasion tissulaire de la bactérie.ConclusionP. aeruginosa a ainsi la capacité de déclencher une inflammation intense au cours des infections cutanées et d’envahir l’épiderme.