Déficience en PATCHED1 : une signature de radiosensibilité chez les patients atteints du syndrome de Gorlin ?

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• 作者：Adeline Vulin¹ ; ; Sandra Moratille¹ ; Jé ; rô ; me Lamartine² ; Michè ; le Martin¹
• 关键词：PTCH1 ; Radiosensibilité ; Syndrome de Gorlin
• 刊名：Annales de Dermatologie et de Vénéréologie
• 出版年：2016
• 出版时间：December 2016
• 年：2016
• 卷：143
• 期：12_supp_S
• 页码：S434
• 全文大小：48 K
• 卷排序：143

文摘

Le syndrome de Gorlin est une maladie autosomale dominante héréditaire caractérisée par un large panel d’anomalies du développement et une prédisposition aux carcinomes basocellulaires (BCC) ainsi qu’à l’apparition de médulloblastomes dans 5 à 10 % des patients. Dans la majorité des cas, la maladie est causée par des mutations hétérozygotes du gène PTCH1 qui est un récepteur transmembranaire de Sonic Hedgehog (SHH) en amont de la voie SHH impliquée dans la régulation du cycle cellulaire, du développement et la cancérogenèse. À ce jour, il n’y a pas de corrélation génotype-phénotype chez les patients et pourtant, leur prédisposition à développer des BCC est variable et leur sensibilité aux agents génotoxiques est toujours débattue.Matériel et méthodesNous avons caractérisé différentes mutations de fibroblastes PTCH1+/− issus de 7 patients Gorlin par séquençage et analyses cellulaire et moléculaire. Afin de démontrer le lien direct entre l’expression de PATCHED1 et la radiosensibilité, nous avons utilisé une approche siRNA pour mettre en évidence un effet de dosage de PTCH1 sur la radiosensibilité dans des cellules normales. La radiosensibilité (rayons γ) a été définie par des essais de survie cellulaire normalisés après des doses d’irradiation en adéquation avec celles pratiquées en clinique.RésultatsL’analyse de chaque lignée révèle une déficience très variable en PATCHED1 en corrélation avec le type de mutation. Une perte significative d’expression est nécessaire pour observer des altérations de la voie SHH, une capacité proliférative diminuée et des modifications du cycle cellulaire. Suite à différentes doses d’irradiation, seules les lignées avec une quasi totale absence de PATCHED1 présentent une radiosensibilité significative. Les premiers résultats montrent que le traitement de fibroblastes non mutés avec un siRNA ciblant PTCH1 provoque une diminution significative de l’ARN et de la protéine, et que cette diminution provoque une augmentation de la radiosensibilité.DiscussionNos résultats montrent qu’une forte déficience en protéine PATCHED1 est nécessaire pour conférer une radiosensibilité intrinsèque significative aux cellules de patients Gorlin, accompagnée d’altérations des activités du cycle cellulaire et une sénescence réplicative accélérée. Les résultats obtenus avec des siRNA doivent être reproduits et seront complétés par une approche shRNA et l’utilisation du système CRISPR/Cas9. Si le lien direct entre l’expression de PATCHED1 et la radiosensibilité est confirmé, les patients devraient être pris en charge spécifiquement en fonction de leur type de mutation et de l’expression de la protéine lors des protocoles d’imageries ou de radiothérapie.