- 作者：G. Gaud<sup>1sup><sup> ; sup><sup>guillaume.gaud@etu.univ-tours.frsup> ; S. Iochmann<sup>1sup> ; B. Brillet<sup>1sup> ; S. petiot<sup>1sup> ; C. Blechet<sup>1sup> ; V. Chabot<sup>2sup> ; N. Heuze-Vourc’ ; h<sup>1sup> ; Y. Gruel<sup>1sup> ; P. Reverdiau<sup>1sup>
- 刊名：Revue des Maladies Respiratoires
- 出版年：2008
- 期刊代码：pca332_07618425
- 类别：med
- 出版时间：November 2008
- 卷：25
- 期：9
- 页码：1167
- 文件大小：115 K
ss="h4">Introduction
Le TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor 2) est un inhibiteur de prot茅ases 脿 s茅rine majoritairement secr茅t茅 vers la matrice extra-cellulaire (MEC). En inhibant la plasmine, le TFPI-2 peut limiter l鈥檃ctivation des m茅talloprot茅ases matricielles (MMP), responsables de la d茅gradation de la MEC, et ainsi r茅duire l鈥檌nvasion tumorale. Le TFPI-2 est, en effet, faiblement synth茅tis茅 par les cellules tumorales, particuli猫rement invasives, et tr猫s exprim茅 dans les cellules peu invasives. Nous avons donc 茅valu茅 l鈥檌mpact de l鈥檌nactivation stable du TFPI-2 sur l鈥檌nvasion de cellules tumorales pulmonaires en mettant en 艙uvre une strat茅gie d鈥橝RN interf茅rence bas茅e sur des micros ARN.ss="h4">M茅thodes
Le TFPI-2 a 茅t茅 inactive via l鈥檈xpression de miRNA sp茅cifiques dans des cellules humaines NCI-H460, issues d鈥檜n carcinome pulmonaire 脿 grandes cellules. Plusieurs clones (1b et 2b) ont 茅t茅 retenus pour 茅tudier l鈥檌mpact de cette inhibition sur les fonctions des cellules NCI-H460. Parall猫lement, l鈥檈ffet de cette inhibition sur les interactions cellules tumorales/fibroblastes du stroma a 茅t茅 茅tudi茅. L鈥檈xpression transcriptionnelle des g猫nes du TFPI-2, des MMP-1, -2, - 3, -7, -9, -13, -14 et de l鈥橢MMPRIN a 茅t茅 quantifi茅e par RT-PCR en temps r茅el, dans les clones et les cellules en coculture. Le potentiel invasif des cellules a 茅t茅 mesur茅 par migration 脿 travers la membrane poreuse d鈥檜n insert nu ou recouvert de Matrigel, mimant la MEC. L鈥檃dh茅rence des cellules 脿 diff茅rentes prot茅ines de la MEC a 茅galement 茅t茅 茅valu茅e et la prolif茅ration cellulaire mesur茅e par un test MTT.
ss="h4">R茅sultats
Le pouvoir invasif des clones 1b et 2b, pour lesquels l鈥檈xpression du TFPI-2 a 茅t茅 inactiv茅e de plus de 90%, est augment茅 de 2 脿 3 fois, ce qui pourrait 锚tre expliqu茅 par une augmentation de l鈥檃dh茅rence des cellules aux prot茅ines de la MEC, et notamment 脿 la laminine et au collag猫ne IV. De plus, nous avons montr茅 que les clones 1b et 2b sur-expriment les MMP-1 et -3 et sous-expriment les MMP-2 et -7. En revanche, le niveau d鈥檈xpression du TFPI-2 n鈥檃 eu aucun effet sur la prolif茅ration cellulaire. En condition de coculture, mettant en jeu des fibroblastes et des cellules tumorales, nous avons observ茅 une potentialisation de l鈥檈xpression transcriptionnelle des MMP-1, -3, -7 et -13 lorsque les cellules tumorales sont inactiv茅es pour le TFPI-2.
ss="h4">Conclusions
Cette 茅tude nous a permis de d茅montrer que le TFPI-2 a un impact sur les g猫nes impliqu茅s dans le remodelage de la MEC et pourrait jouer un r么le inhibiteur de la prot茅olyse p茅ricellulaire notamment lors des interactions cellules tumorales/stroma. Ceci sugg猫re un r么le inhibiteur important du TFPI-2 vis-脿-vis de la progression tumorale expliquant l鈥檃gressivit茅 des tumeurs l鈥檈xprimant faiblement.