摘要
目的:探索美洲大蠊抗肺纤维化活性部位ML-HB对肺纤维化大鼠肺组织中HYP、TGF-β_1、TNF-α含量的影响及抑制HEL细胞增殖与其HPLC-ELSD指纹图谱的相关性。方法:采用气管切开注入法注入博来霉素生理盐水溶液建立博来霉素致大鼠肺纤维化模型。采用紫外分光光度法测定肺组织匀浆中HYP的含量;ELISA法测定肺组织匀浆中TGF-β_1、TNF-α的含量。采用MTT法对不同批次美洲大蠊抗肺纤维化活性部位ML-HB作用下HEL细胞进行活性检测,以IC_(50)作为观测指标,结合ML-HB指纹图谱峰面积值,利用偏最小二乘法(PLS)构建谱效关系回归方程。结果:与模型组比较,地塞米松和ML-HB组HYP、TGF-β_1、TNF-α含量显著降低(P<0.05)。检测10批美洲大蠊抗肺纤维化活性部位对HEL细胞增殖的影响,在24、48、72 h时其对HEL细胞均有较好抑制作用;确定了美洲大蠊抗肺纤维化活性部位的HPLC-ELSD色谱条件,并完成相应的方法学考察;通过建立偏最小二乘法的回归方程,得到X_1、X_6、X_8、X_9、X_(12)峰对抗肺纤维化活性部位抑制HEL细胞增长呈正相关,X_2、X_3、X_4、X_5、X_7、X_(10)、X_(11)峰与其药理活性呈负相关。结论:ML-HB能通过抑制HYP、TGF-β_1、TNF-α的表达,发挥延缓大鼠肺纤维化的作用。本研究建立了美洲大蠊抗肺纤维化活性部位的谱效关系,并找到与其药理活性相关的共有峰。
引文
[1] 孙星衍.神农本草经[M].北京:商务印书馆,1955.
[2] 李时珍.本草纲目[M].北京:人民卫生出版社,1982.
[3] 肖小芹,汪世平,徐绍锐,等.美洲大蠊提取物抗炎、镇痛作用的实验研究[J].中国病原生物学杂志,2007,2(2):140-143.
[4] 王艳荣,王利娜,张秋瓒,等.美洲大蠊提取物对实验性肝纤维化大鼠的保护作用[J].天津医药,2013,41(12):1195-1198.
[5] Jiang LY,Liu X,Xia CL,et al.Research advances on chemical constituents and anti-tumor effects of Periplaneta americana L[J].Medicinal Plant,2012,(3),95-97.
[6] 洪战英,罗国安,王义名,等.中药药动学的研究方法及其相关理论[J].中国中药杂志,2005,30(9):649-652.
[7] 张颖.中药谱效关系在中药研究中的现状与展望[J].黑龙江医药,2010,23(5):755-758.
[8] 王惠文.偏最小二乘回归方法及其应用[M].北京:国防工业出版社,1996.
[9] Rosipal R.Kernel partial least squares for nonlinear regression and discrimination[J].Neural Network World,2003,13(3):291-300.
[10] 徐晶晶.基于抗氧化谱效关系分析的薄荷药材质量控制和评价方法研究[D].北京:北京中医药大学,2014.
[11] 何开锋,钱炜琪,张勇,等.偏最小二乘法在气动数据建模中的应用[J].宇航学报,2014,35(3):278-282.