蒙古黄芪AFLP分子标记反应体系的建立与优化

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英文篇名：Establishment and optimization of AFLP molecular marker reaction system of Astragalus membranaceus var. mongholicus 作者：姜志艳 ; 杨慧楠 ; 邵学勤 英文作者：Jiang Zhiyan; 关键词：扩增片段长度多态性(AFLP) ; 内蒙古 ; 黄芪 ; 分子标记 ; 反应体系 ; 优化 中文刊名：JSNY 英文刊名：Jiangsu Agricultural Sciences 机构：内蒙古科技大学生命科学与技术学院; 出版日期：2018-10-28 16:57 出版单位：江苏农业科学 年：2018 期：v.46 基金：内蒙古自然科学基金(编号:2015MS0872);; 内蒙古科技大学大学生科技创新基金(编号:2016013) 语种：中文; 页：JSNY201819011 页数：4 CN：19 ISSN：32-1214/S 分类号：48-51

摘要

以内蒙古特色药用植物黄芪为试验材料,建立并优化1套适用于黄芪的扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,简称AFLP)反应体系。对AFLP反应体系的影响因素基因组DNA的提取、内切酶的确定及酶切时间、预扩增、选择性扩增反应等关键因素进行优化,并对AFLP适宜引物进行筛选。结果表明,黄芪基因组DNA的模板以50 ng/μL为宜,采用EcoRⅠ/MseⅠ进行双酶切,酶切连接采用一步法完成;最佳酶连时间为16 h;预扩增反应产物稀释20倍作为选扩模板,筛选出适用于黄芪AFLP分析的引物组合5对:E-AG/M-CGT、E-AT/MCTG、E-GA/M-CAA、E-TC/M-CAA、E-GT/M-CTG,为黄芪的分子标记辅助育种、遗传图谱构建、种质资源研究奠定了基础。
        

引文

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