摘要
3-酮酯酰-CoA合酶(3-ketoacyl-CoA synthase,简称KCS)是超长链单不饱和脂肪酸生物合成途径的关键酶。依据转录组数据设计特异性引物,使用RT-PCR方法从滇牡丹(Paeonia delavayi)中克隆得到1个KCS基因的cDNA全长序列,命名为PdKCS(Gen Bank登录号KX524949)。生物信息学分析结果表明,PdKCS基因片段序列全长1527 bp,包含完整的cDNA开放阅读框(ORF),编码含有502个氨基酸残基的蛋白质;Blast比对结果显示,该蛋白质属于KCS蛋白家族;系统进化分析结果显示,该蛋白质属于跨膜、亲水性蛋白;RT-PCR结果显示,其在种子中的表达随着种子的成熟出现双峰型的表达量变化。研究结果可为进一步研究该蛋白的调控机制提供理论依据及获得含高不饱和脂肪酸转基因滇牡丹品种奠定理论基础。
引文
[1]潘开玉.芍药科分布格局及其形成的分析[J].植物分类学报,1995,33(4):340-349.
[2]王莲英.中国牡丹品种图志[M].北京:中国林业出版社,1997:2-7.
[3]周海梅,马锦琦,苗春雨,等.牡丹籽油的理化指标和脂肪酸成分分析[J].中国油脂,2009,34(7):72-74.
[4]李奎.滇牡丹保护生物学与遗传多样性研究[D].北京:中国林业科学研究院,2013:1.
[5]龚洵,潘跃芝,杨志云.滇牡丹的多样性和现状评估[J].西北植物学报,2003,23(2):218-223.
[6]中华人民共和国野生植物保护条例[J].河南省人民政府公报,1996(12):14-16.
[7]于永福.中国野生植物保护工作的里程碑——《国家重点保护野生植物名录(第一批)》出台[J].植物杂志,1999(5):3-11.
[8]Murphy D J,Mukherjee K D.Biosynthesis of triacylglycerols containing very long chain acyl moieties in seeds[M]//Biological Role of Plant Lipids,1989:143-146.
[9]倪郁,郭彦军.植物超长链脂肪酸及角质层蜡质生物合成相关酶基因研究现状[J].遗传,2008,30(5):561-567.
[10]Okamoto T,Chimi K,Maruyama T,et al.Nutritional studies of hardened fish oil.Ⅰ:comparisons of the effects of hardened fish oil on fatty acid profiles of tissue lipids with those of soybean oil and hardened soybean oil in rats[J].Journal of Japan Oil Chemists Society,1988,37:177-184.
[11]王性炎,王姝清.神经酸研究现状及应用前景[J].中国油脂,2010,35(3):1-5.
[12]田德雨,王士安,王立昊,等.超长链单不饱和脂肪酸的生物合成和代谢工程[J].生物技术通报,2015,31(12):42-49.
[13]周万平,郎春秀,熊鲜艳,等.油菜籽芥酸含量遗传调控研究进展[J].核农学报,2010,24(3):537-541.
[14]Kunst L,Clemens S.Plant long chain fatty acid biosynthetic enzyme:US,US 6815579 B1[P].2004(9):12-26.
[15]淮东欣.调控超长链脂肪酸合成关键基因对植物种子中脂肪酸组成的影响[D].武汉:华中农业大学,2015:7-12.
[16]Qi Q,Rose P A,Abrams G D,et al.(+)-Abscisic acid metabolism,3-ketoacyl-coenzyme A synthase gene expression,and very-long-chain monounsaturated fatty acid biosynthesis in brassica napus embryos[J].Plant Physiology,1998,117(3):979-987.
[17]Guo Y,Mietkiewska E,Francis T,et al.Increase in nervonic acid content in transformed yeast and transgenic plants by introduction of a Lunaria annua L.3-ketoacyl-Co A synthase(KCS)gene[J].Plant Molecular Biology,2009,69(5):565-575.
[18]王会,刘佳,付丽,等.基因工程技术在油菜油脂中的研究进展[J].中国农学通报,2013(24):131-137.
[19]Cahoon E B,Marillia E F,Stecca K L,et al.Production of fatty acid components of meadowfoam oil in somatic soybean embryos[J].Plant Physiology,2000,124(1):243-51.
[20]赵艳,翟莹,邱增成,等.大豆KCS基因的克隆及结构预测[J].分子植物育种,2013,11(1):72-76.
[21]周俊琴,谭晓风,刘美兰,等.油桐β-酮脂酰-Co A合成酶(KCS)基因的克隆与序列分析[J].经济林研究,2013,31(4):52-57.
[22]李魏.油茶β-酮脂酰-Co A合酶基因的全长c DNA克隆[D].北京:中南林业科技大学,2009:1-12.
[23]中华人民共和国卫生部公告2011年第9号[J].中华人民共和国卫生部公报,2011(2):264.