转铁蛋白介导人参皂苷Re脂质体的构建及其对Aβ_(25-35)处理PC12细胞损伤的影响
摘要
目的探讨转铁蛋白(Tf)介导人参皂苷Re脂质体(Tf-LC-Re)的构建及其对Aβ_(25-35)处理PC12细胞损伤的影响。方法采用EDC/NHS水相缩合法构建Tf-LC-Re、人参皂苷Re脂质体(LC-Re)和FITC标记的Tf-LC-Re(FITC-Tf-LC-Re)。取对数生长期PC12细胞随机分为空白对照组,Aβ_(25-35)模型组,人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组、LC-Re+Aβ_(25-35)组、Tf-LC-Re+Aβ_(25-35)组(人参皂苷Re终浓度为0.1、1、10、100μmol/L或5、10、20μmol/L),分别采用MTT法和流式细胞仪检测各组细胞存活率及凋亡率。取对数生长期PC12细胞,分别加入含终浓度为5、10、20μmol/L人参皂苷Re的FITC+Re、FITC-LC-Re、FITC-Tf-LC-Re、FITC-Tf-LC-Re+Tf(20μg/m L),孵育30 min后加入20μmol/L Aβ_(25-35),继续培养24 h,通过胞内药物定量法评价PC12细胞对人参皂苷Re、LC-Re及Tf-LC-Re的摄取行为(荧光强度)。结果含终浓度为0.1、1、10、100μmol/L人参皂苷Re的人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组、LC-Re+Aβ_(25-35)组、Tf-LC-Re+Aβ_(25-35)组细胞存活率均高于Aβ_(25-35)模型组(P<0.05或<0.01),且含相同终浓度人参皂苷Re的Tf-LCRe+Aβ_(25-35)组均高于人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组和LC-Re+Aβ_(25-35)组(P均<0.01)。Aβ_(25-35)模型组细胞凋亡率高于空白对照组(P<0.01),含相同终浓度人参皂苷Re的Tf-LC-Re+Aβ_(25-35)组细胞凋亡率均低于人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组及LC-Re+Aβ_(25-35)组(P均<0.01)。含相同终浓度人参皂苷Re的FITC-Tf-LC-Re组荧光强度均高于FITC-LC-Re组及FITC-Tf-LC-Re+Tf组(P<0.05或<0.01)。结论成功构建Tf-LC-Re;人参皂苷Re、LC-Re、Tf-LC-Re均可抑制Aβ_(25-35)对PC12细胞的损伤,且Tf-LC-Re效果最好。
引文
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