摘要
目的探讨转铁蛋白(Tf)介导人参皂苷Re脂质体(Tf-LC-Re)的构建及其对Aβ_(25-35)处理PC12细胞损伤的影响。方法采用EDC/NHS水相缩合法构建Tf-LC-Re、人参皂苷Re脂质体(LC-Re)和FITC标记的Tf-LC-Re(FITC-Tf-LC-Re)。取对数生长期PC12细胞随机分为空白对照组,Aβ_(25-35)模型组,人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组、LC-Re+Aβ_(25-35)组、Tf-LC-Re+Aβ_(25-35)组(人参皂苷Re终浓度为0.1、1、10、100μmol/L或5、10、20μmol/L),分别采用MTT法和流式细胞仪检测各组细胞存活率及凋亡率。取对数生长期PC12细胞,分别加入含终浓度为5、10、20μmol/L人参皂苷Re的FITC+Re、FITC-LC-Re、FITC-Tf-LC-Re、FITC-Tf-LC-Re+Tf(20μg/m L),孵育30 min后加入20μmol/L Aβ_(25-35),继续培养24 h,通过胞内药物定量法评价PC12细胞对人参皂苷Re、LC-Re及Tf-LC-Re的摄取行为(荧光强度)。结果含终浓度为0.1、1、10、100μmol/L人参皂苷Re的人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组、LC-Re+Aβ_(25-35)组、Tf-LC-Re+Aβ_(25-35)组细胞存活率均高于Aβ_(25-35)模型组(P<0.05或<0.01),且含相同终浓度人参皂苷Re的Tf-LCRe+Aβ_(25-35)组均高于人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组和LC-Re+Aβ_(25-35)组(P均<0.01)。Aβ_(25-35)模型组细胞凋亡率高于空白对照组(P<0.01),含相同终浓度人参皂苷Re的Tf-LC-Re+Aβ_(25-35)组细胞凋亡率均低于人参皂苷Re+Aβ_(25-35)组及LC-Re+Aβ_(25-35)组(P均<0.01)。含相同终浓度人参皂苷Re的FITC-Tf-LC-Re组荧光强度均高于FITC-LC-Re组及FITC-Tf-LC-Re+Tf组(P<0.05或<0.01)。结论成功构建Tf-LC-Re;人参皂苷Re、LC-Re、Tf-LC-Re均可抑制Aβ_(25-35)对PC12细胞的损伤,且Tf-LC-Re效果最好。
引文
[1]张峻颖,刁劲夫,吕青林,等.药物跨血脑屏障转运的体外模型及其研究进展[J].中国新药杂志,2015,24(21):2453-2458.
[2]刘云云,刘中霖,温小军,等.纳米递药系统治疗阿尔茨海默病的研究进展[J].中国神经精神疾病杂志,2012,38(9):561-564.
[3]邵云,俞向荣,吴一平,等.转铁蛋白与RGD共修饰脂质体用于脑胶质瘤靶向性研究[J].第三军医大学学报,2014,36(6):592-595.
[4]魏志方,毕丽丽,鲍春媛.转铁蛋白修饰共载紫杉醇和人参皂苷Rg3脂质体制备及其靶向性研究[J].中华肿瘤防治杂志,2014,21(16):1227-1231.
[5]董翔,常庚.Angiopep-2与转铁蛋白共修饰脂质体跨血脑屏障的研究[J].第二军医大学学报,2014,35(10):1083-1087.
[6]赵浩,马建华,李运军,等.转铁蛋白靶向脂质体转导SDF-1治疗大鼠缺血性脑卒中[J].医学研究杂志,2013,42(8):26-31.
[7]Sharma G,Lakkadwala S,Modgil A,et al.The role of cell-penetrating peptide and transferrin on enhanced delivery of drug to brain[J].Int J Mol Sci,2016,17(6):806.
[8]唐慧娴,张振海,赵志英,等.乳铁蛋白作为药物载体的研究进展[J].药学学报,2015,50(6):675-681.
[9]马一星,叶青.突破血脑屏障纳米药物递送系统的研究进展[J].中国药事,2016,30(2):141-149.
[10]徐琲琲,刘纯青,马涛,等.人参皂苷Re对MPTP致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用[J].沈阳药科大学学报,2005,22(1):36-44.
[11]涟漪.人参皂苷Re的降血糖作用[J].国外医药:植物药分册,2003,18(1):29-30.
[12]赵莹,刘金平,卢丹,等.人参皂苷Re促进自然衰老大鼠学习记忆作用及其机理的研究[J].中药新药与临床药理,2007,18(1):20-22.
[13]姜红柳,杨振,孟勤,等.人参皂苷Re对小鼠学习记忆障碍的作用[J].中国药理学通报,2008,24(10):1399-1400.
[14]嵇源源,楚小晶,王剑文.应用PC12细胞损伤模型筛选中药活性成分的研究进展[J].中成药,2013,35(6):1282-1288.