引起奶牛隐性乳房炎的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌的多重PCR检测

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	作者：邓凯伟 ; 马德青 ; 赵云焕 关键词：奶牛隐性乳房炎 ; 多重PCR ; 金黄色葡萄球菌 ; 大肠杆菌 ; 沙雷氏菌 中文刊名：HLJX 英文刊名：Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine 机构：信阳农林学院/河南省大别山区生态畜禽健康生产工程研究中心; 出版日期：2019-04-20 出版单位：黑龙江畜牧兽医 年：2019 期：No.572 基金：河南省科技厅科技攻关项目(172102110190) 语种：中文; 页：HLJX201908025 页数：3 CN：08 ISSN：23-1205/S 分类号：96-98

摘要

为了能同时检测奶牛隐性乳房炎中金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌三种病原菌,试验设计了3对不同的特异性引物,在金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌单重PCR的基础上进行多重PCR扩增。结果表明:扩增体系(50μL)为DNA Polymerase 1μL,金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌上、下游引物各1μL,混匀后取混合物5μL,2×Multiplex Buffer 25μL,DNA模板各2μL, ddH_2O 13μL。扩增程序为95℃5 min;95℃30 s, 60℃90 s, 72℃1 min,35个循环;72℃10 min。设计的多重PCR方法可同时扩增出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙雷氏菌的目的基因片段。说明用设计的3对特异性引物进行的多重PCR扩增特异性强,可用于临床。
        

引文

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