群体感应淬灭酶LsrK蛋白表达纯化

详细信息    查看全文 | 推荐本文 |

	作者：杨国栋 ; 李志超 ; 吴渊 ; 王骏 ; 赵晶 关键词：群体感应淬灭酶 ; LsrK ; 重组表达 ; 蛋白纯化 中文刊名：GXQG 英文刊名：Light Industry Science and Technology 机构：大连民族大学生命科学学院/大连民族大学生物技术与资源利用教育部重点实验室;大连工业大学生物工程学院; 出版日期：2019-07-29 19:18 出版单位：轻工科技 年：2019 期：v.35;No.249 基金：大连民族大学2018年大学生创新创业训练计划项目(201812026013) 语种：中文; 页：GXQG201908009 页数：2 CN：08 ISSN：45-1385/TS 分类号：25-26

摘要

对群体感应淬灭酶LsrK蛋白进行重组表达及纯化。构建重组工程菌Escherichia coli BL21(DE3)-pET-28a-lsrK,利用乳糖自诱导的方法诱导表达重组蛋白LsrK,并利用亲和层析和凝胶过滤层析进行纯化。LsrK蛋白经凝胶过滤层析后,纯度较高,蛋白浓度达到28.6mg/L发酵液,为进一步进行LsrK蛋白的结构解析及功能研究奠定了基础。
        

引文

[1]程古月,郝海红,戴梦红,等.病原菌的群体感应及其抑制剂的研究进展[J].科学通报,2012,57(21):1964-1977.
    [2]Terwagne M, Mirabella A,Lemaire J,et al.Quorum sensing and self-quorum quenching in the intracellular pathogen Brucella melitensis[J]. PLOS One,2013,8(12):82514.
    [3]Fetzner S.Quorum quenching enzymes[J].Journal of Biotechnology,2015,201:2-14.
    [4]Chen F,Gao Y,Chen X,et al. Quorum quenching enzymes and their application in degrading signal molecules to block quorum sensing-dependent infection[J].International Journal of Molecular Sciences,2013,14:17477-17500.
    [5]邢启凡,柳鹏福,史吉平,等.细菌群体感应信号分子淬灭酶的研究进展[J].生物技术通报,2015,31(10):48-55.
    [6]Roy V,Fernandes R,Tsao CY,et al.Cross species quorum quenching using a native AI-2 processing enzyme[J].ACS Chemical Biology,2010,5(2):223-232.
    [7]Studier F W. Protein Production by Auto-Induction in High-Density Shaking Cultures[J].Protein Expression and Purification,2005,41(1):207-234.