TAM分泌的C9与肿瘤细胞表面CD59结合在三阴性乳腺癌转移中的作用
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- 论文作者：陶涛 ; 陆豪杰 ; 程纯
- 年：2016
- 作者机构：南通大学医学院免疫学系暨江苏省炎症与分子药靶重点实验室;复旦大学生物医学研究院;
- 论文关键词：三阴性乳腺癌 ; 肿瘤相关巨噬细胞 ; C9 ; CD59 ; N-糖基化修饰
- 会议召开时间：2016-11-04
- 会议录名称：第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编
- 英文会议录名称：Abstracts of 2016 CSI Congress on Immunology
- 语种：中文
- 分类号：R737.9
- 学会代码：IGMD
- 会议名称：第十一届全国免疫学学术大会
- 会议地点：中国安徽合肥
- 主办单位：中国免疫学会
- 学会名称：中国免疫学会
- 页数：2
- 文件大小：1234k
- 原文格式：D
- 会议级别：全国
摘要
研究目的:肿瘤相关巨噬细胞(TAM)在三阴性乳腺癌TNBC的转移中发挥重要作用,但其机制不清楚。蛋白质糖基化修饰参与肿瘤转移,但是其机制不清楚。分析TAM分泌的补体C9与乳腺癌细胞表面补体调节蛋白CD59结合对乳腺癌细胞逃避免疫杀伤、细胞迁移及侵袭影响及其在肿瘤转移中的作用,并分析蛋白质N-糖基化修饰对上述结合的调节及其机制。研究方法:分别构建TAM与TNBC共培养模型,分别利用ELISA检测C9的分泌,并用Transwell及划痕实验检测C9在TNBC转移中的作用;利用生物质谱分析及糖苷酶酶切鉴定C9对的N糖基化修饰为点及其在分泌中的作用;利用共聚焦及流式细胞术分析其与CD59结合;利用乳腺癌原位动物模型分析干预结合对肿瘤转移的影响。研究结果:首先在TNBC患者的TAM及诱导M2极化的巨噬细胞中分析C9的表达及其分泌,发现M2极化的巨噬细胞及TAM可分泌较高含量的C9。荧光共定位分析及流式细胞术分析发现TAM分泌的C9可以与TNBC细胞表面的CD59结合。细胞毒性实验、划痕实验及Transwell实验发现C9与CD59结合可通过抑制补体激活导致肿瘤细胞免疫逃逸,通过激活核因子κB(NF-κB)信号促进肿瘤细胞的迁移及侵袭。利用糖苷酶酶切发现C9可发生N-糖基化修饰,生物质谱鉴定C9的Asn227及Asn419是N-糖基化修饰位点,其中Asn227的N-糖基化修饰可促进C9的分泌;Asn419的N-糖基化修饰可促进C9与CD59的结合。临床标本分析发现C9定位于间质的TAM,而CD59定位于TNBC细胞,两者表达呈现相关性,且高表达与TNBC的不良预后相关。TNBC原位癌模型发现阻断C9与CD59结合可抑制TNBC的转移。结论:本研究结果表明TAM分泌的C9可与乳腺癌细胞表面CD59结合,导致乳腺癌细胞逃避免疫杀伤,促进TNBC的转移,在这过程中C9的N-糖基化修饰可调节C9的分泌及其与CD59的结合,发挥促进作用。
引文