携带bla_(NDM-1)大肠埃希菌的耐药机制及分子分型研究
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摘要
目的研究携带bla_(NDM-1)大肠埃希菌的耐药机制及分子分型。方法收集浙江省人民医院2011年至2014年临床分离碳青霉烯类抗生素非敏感的大肠埃希菌。EDTA双纸片协同试验筛查金属酶;E-test法测定抗生素对产酶菌株的最低抑菌浓度(MIC);接合试验、PCR特异扩增和测序分析研究携带bla_(NDM-1)大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制。脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点序列分型(MLST)和系统发育分型(phylogenetic typing)对菌株进行分子分型。结果分离得到碳青霉烯类抗生素非敏感的大肠埃希菌共125株,其中携带bla_(NDM-1)的大肠埃希菌4株,该4株菌对美罗培南和亚胺培南的MIC范围为1~4μg/ml,且同时携带产其它β-内酰胺酶基因。4株大肠埃希菌均可通过接合试验将碳青霉烯耐药性传递给大肠埃希菌J53,使后者获得bla_(NDM-1)基因及与供体菌相似的耐药性。PFGE显示4株细菌无同源性;MLST显示4株细菌分别属于不同的ST型,包括ST5138、ST167、ST3489、ST533。系统发育分型显示2株属于B2群,D群和A群各1株。结论本院产NDM-1β-内酰胺酶的大肠埃希菌目前并无暴发流行的现象。虽然这4株细菌呈现克隆多样性,但其携带的bla_(NDM-1)基因都易于接合,必须警惕bla_(NDM-1)基因在不同细菌之间流行传播。
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