摘要
目的:探讨Pam3CSK4预处理后的树突状细胞(DC)对热灭活的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)的摄取递呈能力的影响。方法:1.利用rm IL-4和rm GM-CSF诱导产生小鼠骨髓源性DC,用Pam3CSK4(1mg/ml)预处理DC细胞,分别于24h、48h后再次给予FITC标记的热灭活MRSA刺激2h,流式检测DC捕获MRSA的能力;2.将捕获MRSA的DC与正常小鼠T淋巴细胞共培养,流式检测T细胞CD69分子的表达;3.用已捕获MRSA的DC刺激免疫后的小鼠T细胞,CFSE标记法观察Pam3CSK4预处理DC对刺激MRSA特异性T细胞的应答反应。结果:1.PBS预处理组吞噬率为25.2%,Pam3CSK4预处理24h和48h组的吞噬率分别为50.1%,57.6%,结果显示Pam3CSK4预处理DC对MRSA的摄取能力显著高于PBS组(P24h=0.0094,P48h=0.0020);2.T细胞共培养结果显示,PBS预处理组T细胞CD69阳性率为3.47%,Pam3CSK4预处理24h和48h组的T细胞CD69阳性率分别为9.38%,7.00%,统计结果表明Pam3CSK4预处理的DC能显著激发初始T细胞表面CD69分子的表达(P24h=0.0193,P48h=0.0422);3.CFSE标记法检测T细胞增殖试验结果显示,PBS对照组CD4阳性T细胞增殖率为9.97%,Pam3CSK4预处理24h和48h组的CD4阳性T细胞增殖率为15.3%,13.4%,统计结果表明Pam3CSK4预处理24h能显著增强MRSA再次刺激T细胞的增殖(P=0.0376),而Pam3CSK4预处理48h与对照组相比无显著性差异(P=0.0762)。结论:Pam3CSK4预处理可显著增强DC细胞对MRSA的摄取能力,增强对初始T淋巴细胞的活化,并促进MRSA免疫后T细胞增殖
引文