体外研究褐藻糖胶对抗HBV免疫应答的影响及其机制
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摘要
目的:探究褐藻糖胶(Fucoidan)体外的抗乙肝病毒作用及其可能的机制。方法:不同浓度的褐藻糖胶体外刺激HepG2.2.15细胞,24小时后,分别收集培养上清和细胞,ELISA方法检测培养上清和细胞裂解液中HBsAg、HBeAg和IFN-α的水平;qRT-PCR检测培养上清中HBV DNA的水平和细胞内IFN-ɑ的mRNA水平;Western blot方法检测细胞内HBsAg、HBcAg的水及NF-κB、ERK1/2和IRF3的磷酸化水平。通过上述指标分析褐藻糖胶的抗乙肝病毒的作用及其可能的机制,从而明确褐藻糖酵对抗乙肝病毒免疫应答的调节作用。结果:实验中所用褐藻糖胶对HepG2.2.15细胞无毒性作用;不同浓度的褐藻糖胶体外刺激HepG2.2.15细胞24小时后,培养上清和细胞裂解液中的HBsAg和HBeAg水平较对照组降低,差异有统计学意义(p<0.05);另外,褐藻糖胶处理可上调HepG2.2.15细胞分泌的IFN-α水平。qRT-PCR结果显示,刺激组培养上清中乙肝病毒DNA的水平与对照组相比无差异;刺激组细胞中IFN-α的mRNA水平较对照组升高呈剂量依赖性,且差异有统计学意义(p<0.05);Western blot结果显示,刺激组细胞内HBsAg、HBcAg的水平较对照组降低,呈剂量依赖性;刺激组中细胞内NF-κB、ERK1/2和IRF3的磷酸化水平较对照组增加。结论:体外细胞学研究表明,褐藻糖胶可促进抗乙肝病毒免疫应答,研究结果为慢性乙肝的临床辅助治疗提供新的思路。
引文

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